本发明实施例涉及免疫学检测方法技术领域，更具体地，涉及一种抗体包被方法及化学发光检测试剂盒。
背景技术
在现代生物技术中，以荧光类物质标记蛋白质、核酸等生物分子作为示踪、微量定量方法具有广泛的用途。免疫反应一般需要一种标记方案，一种分离方案。96孔微孔板上预包被固相抗体是一种常规、经济、方便的分离方案。96孔微孔板用于化学发光试验时，一般以辣根酶催化鲁米诺发光最为常用。96孔微孔板材质为聚苯乙烯，其包被蛋白有两种具体的操作办法，一种是直接物理吸附，即通过疏水作用将igg分子吸咐于聚苯乙烯材质上，包括将igg分子进行疏水预处理。第二种是共价结合，通过引入氨基、羧基等通过共价反应将igg结合在聚苯乙烯板上，目的是提高吸附量。目前商品化的试剂以第一种为主。直接物理除了包被抗体外，还有一种变通思路就是制备通用性预包被板如第二抗体板、亲和素板、荧光素抗体板等，在免疫反应时将抗体作为一种反应组份加入，这样可以实现统一的预包被板，从而节约研发周期及成本等。
免疫试纸快速检测技术是基于免疫层析原理建立起来的一种适用于现场检测的技术，典型的免疫试纸包括样品垫、标记垫、包被膜和吸收垫。以微孔膜作为固相载体，经渗透和毛细管虹吸作用使待测样品中的抗体或抗原与膜上包被的抗原或抗体结合，通过标记垫上标记物来呈现反应结果。常见的标记材料包括胶体金标记及荧光标记，荧光标记的优点在于可以进行定量分析。而样品中的待检测物与标记垫中荧光标记材料的结合效率是决定检测成功与否的关键因素。
因此如何增强待检测物与标记物的结合是提高检测灵敏度和准确性所必须解决的技术问题。
技术实现要素：
本发明实施例提供了一种克服上述问题或者至少部分地解决上述问题的一种抗体包被方法及化学发光检测试剂盒。
第一方面，本发明实施例提供了一种抗体包被方法，其特征在于，包括：
步骤一、将fitc-anti-psa抗体或anti-fitc抗体与荧光微球按照4-6:300的质量比在ph为8.0-8.5的反应缓冲液中反应1-2h，获得抗体标记微球；其中，所述荧光微球表面具有羟基官能团；
步骤二、将含有fitc-anti-psa，碳二亚胺edc，磁微粒的100μlpbs溶液室温混合并震荡3h；pbs溶液洗涤后保存在3ml含1g/lbsa的pbs溶液中，置于4℃备用；
吸附法包被96孔板：将fitc-anti-psa或anti-fitc的pbs溶液100μl加入微孔板，4℃保存12小时后，用bsa封闭液封闭后干燥，密封备用；
间接法包被96孔板：先以吸附法包被anti-fitc微孔板，1.5μg/孔，预制anti-fitc微孔板；然后每孔加入fitc-anti-psa的pbs溶液100μl，37℃温育50min后以bsa封闭液封闭后干燥，密封。
作为优选的，所述反应缓冲液为含有质量体积百分比为0.8-1.2％的带氨基基团的烷基硅氧烷和质量体积百分比为9-11％的bsa的蹦酸盐缓冲液。
作为优选的，所述96孔板为96孔不透明微孔板，材质为聚苯乙烯，为白色或黑色不透明，每板有96个微孔，可以分拆。
作为优选的，所述荧光微球为聚苯乙烯包埋镧系元素微球、聚乙烯包埋量子点微球或聚苯乙烯包埋有机荧光染料微球。
第一方面，本发明实施例提供了一种化学发光检测试剂盒，包括第一试剂和第二试剂，所述第一试剂和所述第二试剂都包括本发明实施例第一方面所述的抗体包被，所述第一试剂还包括缓冲液和多羟基糖，所述第二试剂还包括缓冲液、磁微粒和多羟基醇。
作为优选的，所述缓冲液是ph6.0～8.0、5mm～100mm的pbs缓冲液。
作为优选的，所述第一试剂还包括1g/l～50g/l牛血清白蛋白、5ml/l～20ml/l丙三醇、0.05ml/l～0.2ml/ltritonx-100、10mg/l～50mg/l4-氨基安替比林和0.5ml/l～5ml/lproclin-300。
作为优选的，所述第二试剂还包括10g/l酪蛋白、10g/l海藻糖或蔗糖、10ml/l丙三醇、0.1ml/ltritonx-100、1ml/lproclin-300和20mg/l4-氨基安替比林。
本发明实施例提供的一种抗体包被方法及化学发光检测试剂盒，成本较低，可以提高抗体的利用率，改善试剂性能，提高试剂在用于检测时的灵敏度。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
第一方面，本发明实施例提供了一种抗体包被方法，其特征在于，包括：
步骤一、将fitc-anti-psa抗体或anti-fitc抗体与荧光微球按照4-6:300的质量比在ph为8.0-8.5的反应缓冲液中反应1-2h，获得抗体标记微球；其中，所述荧光微球表面具有羟基官能团；
步骤二、将含有fitc-anti-psa，碳二亚胺edc，磁微粒的100μlpbs溶液室温混合并震荡3h；pbs溶液洗涤后保存在3ml含1g/lbsa的pbs溶液中，置于4℃备用；
吸附法包被96孔板：将fitc-anti-psa或anti-fitc的pbs溶液100μl加入微孔板，4℃保存12小时后，用bsa封闭液封闭后干燥，密封备用；
间接法包被96孔板：先以吸附法包被anti-fitc微孔板，1.5μg/孔，预制anti-fitc微孔板；然后每孔加入fitc-anti-psa的pbs溶液100μl，37℃温育50min后以bsa封闭液封闭后干燥，密封。
作为优选的，所述反应缓冲液为含有质量体积百分比为0.8-1.2％的带氨基基团的烷基硅氧烷和质量体积百分比为9-11％的bsa的蹦酸盐缓冲液。
作为优选的，所述96孔板为96孔不透明微孔板，材质为聚苯乙烯，为白色或黑色不透明，每板有96个微孔，可以分拆。
作为优选的，所述荧光微球为聚苯乙烯包埋镧系元素微球、聚乙烯包埋量子点微球或聚苯乙烯包埋有机荧光染料微球。
第一方面，本发明实施例提供了一种化学发光检测试剂盒，包括第一试剂和第二试剂，所述第一试剂和所述第二试剂都包括本发明实施例第一方面所述的抗体包被，所述第一试剂还包括缓冲液和多羟基糖，所述第二试剂还包括缓冲液、磁微粒和多羟基醇。
作为优选的，所述缓冲液是ph6.0～8.0、5mm～100mm的pbs缓冲液。
作为优选的，所述第一试剂还包括1g/l～50g/l牛血清白蛋白、5ml/l～20ml/l丙三醇、0.05ml/l～0.2ml/ltritonx-100、10mg/l～50mg/l4-氨基安替比林和0.5ml/l～5ml/lproclin-300。
作为优选的，所述第二试剂还包括10g/l酪蛋白、10g/l海藻糖或蔗糖、10ml/l丙三醇、0.1ml/ltritonx-100、1ml/lproclin-300和20mg/l4-氨基安替比林。
本发明实施例提供的一种抗体包被方法及化学发光检测试剂盒，成本较低，可以提高抗体的利用率，改善试剂性能，提高试剂在用于检测时的灵敏度。
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。