一种凝胶免疫扩散试验仪的制作方法

本发明涉及免疫学检验领域，尤其涉及一种凝胶免疫扩散试验仪。

背景技术：

可溶性抗原和相应抗体在凝胶中扩散，形成浓度梯度，在抗原抗体相遇并且浓度比例适当的位置形成肉眼可见的沉淀线或沉淀环。常用的凝胶有琼脂、葡聚糖或聚丙烯酰胺凝胶。凝胶免疫扩散试验分为单向扩散试验和双向扩散试验。

以琼脂凝胶为例，单向扩散试验方法为在含有特异抗体的琼脂板中打孔，并在孔中加入定量的抗原，当抗原向周围扩散后与琼脂中抗体相结合，即形成白色沉淀环，其直径或面积与抗原浓度呈正相关。同时用标准抗原或国际参考蛋白制成标准曲线，即可用以定量检测未知标本的抗原浓度(mg/ml或u/ml)。

双向扩散试验方法为将抗原抗体分别加在琼脂板不同的对应孔中，两者在凝胶中自由扩散，在比例合适处形成白色沉淀线。双扩可对抗体效价、标本中抗原或抗体的存在与否、抗原抗体相对含量及其分子量等进行估测。

目前教学和研究中进行凝胶免疫扩散试验，在平皿或载玻片上制备琼脂板，倒入融化琼脂时不易控制移液管导致制板失败；在琼脂板上打孔时，为了控制孔距，需用笔在平皿或载玻片底部提前做标记，既不准确，也非常繁琐；抗原抗体反应需在37℃保湿的环境中进行，而目前一般采用的方法是将琼脂平板放在底部有湿润吸水纸的搪瓷盒内，搪瓷盒放置于37℃温箱中温育24或48小时，没有特定的用于凝胶免疫扩散试验的温育装置，试验过程显得非常繁琐，且容易在操作中多次转移琼脂平板易造成污染。

目前，教学和研究中进行凝胶免疫扩散试验，没有专门的试验仪器，试验从制板、打孔、孵育到检测等环节，需要准备多种试验器材并将琼脂板转移多次，过程繁琐且容易造成污染。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种凝胶免疫扩散试验仪，为凝胶免疫扩散试验提供所需的试验环境，保证试验顺利进行，提高试验结果的准确性，为科研和教学带来便利。

为此，本发明提供了一种凝胶免疫扩散试验仪，为凝胶免疫扩散试验的专用仪器，以减少试验中凝胶板转移次数，包括：温控箱，下部设有电热装置，还设有电子显示屏，用于显示箱内温度和时间，还设有蜂鸣报警器和计时按键，用于提醒试验的时间；不锈钢浅槽，设置在所述电热装置的顶部，置放有吸水材料件，试验时加水，以保证试验内部的湿度、避免琼脂板在实验过程中被烘干；温育盒，用于试验时供反应体系在其中完成，底部为镂空的百叶结构，所述温育盒有一盖，试验时盖上盖，防止琼脂板水分挥发；以及若干制板小盒，设置在所述温育盒内，用于直接制备凝胶板，用于直接制备凝胶板，所述底部有刻度以及适用于双扩或单扩试验的各种孔型，其中，该温育盒直接放在吸水材料上，所述温育盒的百叶结构将所述制板小盒与吸水材料隔开。

进一步地，上述温控箱具有透明玻璃箱门，用于随时观察仪器内部情况，所述温控箱还具有门磁密封装置。

进一步地，上述温控箱的顶部或侧边装有led灯，在所述箱门打开时点亮，用于观察温控箱内部情况。

进一步地，上述温育盒为白色不锈钢盒或搪瓷盒，包括盒体和盒盖。

进一步地，上述温控箱后方和侧方装有插头和开关。

进一步地，上述凝胶免疫扩散试验仪为凝胶免疫扩散试验专用仪器。

进一步地，上述电子显示屏位于温控箱的下部箱体的外表面，所述电子显示屏旁边设有控温按键和计时按键。

进一步地，上述吸水材料件为吸水棉块。

进一步地，上述制板小盒为黑色不透明耐热盒体，所述底部有白色标记的刻度以及适用于双扩或单扩试验的各种孔型，在所述制板小盒内直接制备凝胶板时，底部白色孔型用于指示打孔器直接打孔，黑色的背景便于观察试验形成的沉淀线，刻度便于测量单扩试验沉淀线直径。

目前教学和研究中进行凝胶免疫扩散试验,没有专门的试验仪器，试验从制板、打孔、孵育到检测等环节，需要准备多种试验器材并将琼脂板转移多次，过程繁琐且容易造成污染，本发明提供了一种凝胶免疫扩散试验专用仪器，提供凝胶免疫扩散试验所需的所有需求，保证试验顺利进行，避免试验中将琼脂板转移多次从而造成污染，提高试验结果的准确性和试验效率，为科研和教学带来便利。

除了上面所描述的目的、特征和优点之外，本发明还有其它的目的、特征和优点。下面将参照图，对本发明作进一步详细的说明。

附图说明

构成本申请的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。在附图中：

图1是根据本发明的凝胶免疫扩散试验仪的结构示意图；

图2是根据本发明的凝胶免疫扩散试验仪的结构示意图；

图3是根据本发明的温育盒盖的结构示意图；

图4是根据本发明的温育盒体的结构示意图；

图5是根据本发明的制板小盒的结构示意图；

图6是根据本发明的一组制板小盒底部的示意图；以及

图7示出了根据本发明的装有一组制板小盒的温育盒的示意图。

具体实施方式

需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考附图并结合实施例来详细说明本发明。

图1至图7示出了根据本发明的一些实施例。

在一实施例中，如图1和图2所示，本试验仪设计为箱式(或者称为柜式)，即温控箱10(或者温控柜)，包括箱体11和箱门12。

其中，箱门11为透明玻璃制成，便于观察箱内情况。门边设有磁条边(门磁密封结构)13，工作时关上箱门，保证试验仪密封，防止箱内水分挥发。

试验仪的下部为电热装置40，控制箱内温度，下部箱体外表面装有电子显示屏17，显示箱内温度和时间，电子显示屏旁边设置有控温按键18和计时按键19，电子显示屏旁边装有蜂鸣报警器(图中未示出)。试验仪后方和侧方装有插头和开关15。

试验仪内部，电热装置的顶部设计为一个不锈钢浅槽16(凹槽)，根据试验需要加入少量的水。试验仪配备一些吸水材料例如吸水棉块30，该吸水棉块的尺寸与不锈钢凹槽适应，试验时将吸水棉放置于盛适量水的凹槽内。

不锈钢凹槽上部的空间，用于放置于试验仪相配的抗原抗体反应温育装置即温育盒20。

试验仪的顶部或侧边装有led灯14，在打开试验仪门的时候，led灯亮，便于观察试验仪内部情况。

如图3和图4所示，温育盒20为白色不锈钢或搪瓷盒，包括盒体20a和盒盖20b。

如图4所示，盒体20a底部设计为镂空的百叶结构21，且百叶与水平面有一定的角度例如呈竖直状态，当盒体放置于吸水棉上时，底部不会完全与吸水棉贴合，而是有一定角度站立于吸水棉上，避免水沾附到盒内其他的装置。

如图3所示，盒盖20b不与盒体相连，使用时盖于盒体上，盒盖上设计一个提手22，便于打开。

如图5所示，制板小盒50整体由黑色不透明的耐热材料制成，黑色的制板小盒背景便于在抗原抗体孵育完成后观察所形成的白色沉淀线。

本发明以琼脂胶为例，凝胶免疫扩散试验时，根据试验需要选取制板小盒放置于大盒中，试验仪配备不同规格的制板小盒，根据琼脂单向扩散试验和琼脂双向扩散的需要，在不同制板小盒的底部51都设计了适应试验需要的白色涂料绘制刻度51a和孔型，图6为几种规格的制板小盒的底面，适应于单扩试验的小盒底部(a)仅绘制了白色的5cm刻度51a，适应于双扩的一小盒(b)底部设计了白色刻度和三角孔51b、梅花孔(c)51c以及双排孔(d)51d等几种孔型。

图7为试验时将选取的小盒放置于大盒内。本试验仪配置相应的琼脂打孔器。

试验实例一：单向琼脂扩散试验

试验原理：抗体与待测的抗原，在两者比例合适的部位结合形成沉淀环。环的大小与抗原的浓度成正相关。

在单向琼脂凝胶免疫扩散试验时，提前打开凝胶免疫扩散仪，将箱内温度设定为37℃，不锈钢浅槽内加入适量水，放入吸水棉，使吸水棉保持湿润的状态，并设定时间为24～48h。

选取底部有白色刻度线的小盒，将抗体混入0.9％琼脂糖内(50℃)，移取适量的琼脂在未凝固前倒入小盒，琼脂在小盒底部凝固成厚度约为2～3mm平板，根据试验需要对照小盒底部的白色刻度线用打孔器打孔(孔径3～5mm)，待凝固后向孔内加入抗原溶液和不同浓度的标准品，盖上盒盖，将温育盒放置于预热好的试验仪内，放置于吸水棉上，由于温育大盒底部的百叶与水平面有一定角度，因此小盒不会接触吸水棉。

温育盒内的抗原抗体反应在37℃和湿润的环境(防止琼脂干燥)下孵育24～48h。观察孔周围是否出现白色沉淀环并根据小盒底部的刻度线测量环的直径。并对抗原的浓度进行计算。

试验实例二：双向琼脂扩散试验

原理：将抗原抗体分别加在琼脂凝胶不同的对应孔中，两者在琼脂凝胶中自由扩散，在比例合适处形成白色沉淀线。

在双向琼脂扩散试验时，提前打开凝胶免疫扩散仪，将箱内温度设定为37℃，不锈钢浅槽内加入适量水，放入吸水棉，使吸水棉保持湿润的状态，并设定时间为18～24h。

根据试验的需要，选择相应规格的小盒。

以检测抗体效价为例，选取底部绘制梅花孔为例选取底部有白色刻度线的小盒，倾注一层均匀的琼脂凝胶薄层，凝固后打孔，琼脂厚度一般为2～3mm，孔径为3mm，孔间距在3～5mm之间，在对应的孔中加入抗原或抗体，盖上盒盖，放置于吸水棉上，由于温育大盒底部的百叶与水平面有一定角度，因此小盒不会接触吸水棉。

将温育盒放置于预热好的试验仪内，温育37℃18～24h后观察，凝胶中各自扩散的抗原和抗体可在浓度比例适当处形成可见的白色沉淀线。根据沉淀线出现的位置判断抗体的效价。

与现有技术相比，本发明具有以下特点/效果：

(1)设计一种专用于凝胶免疫扩散试验的专用试验仪，避免试验中将琼脂板转移多次从而造成污染。

(2)试验仪包括电热装置，可以对温度进行调节，保证凝胶免疫扩散试验抗原抗体孵育时所需的温度。

(3)试验仪设计了电子显示屏，用以显示试验过程中的温度和孵育的时间，并设计了蜂鸣报警器，提醒试验的时间。

(4)试验仪内部设计了不锈钢浅槽和吸水材料，试验时加入少量的水，保证试验内部的湿度避免凝胶在试验过程中被烘干。

(5)试验仪配置了孵育装置即温育盒，试验时反应体系在温育盒中完成。孵育装置为搪瓷或不锈钢材质，底部为镂空的百叶结构，百叶结构竖起，这样孵育装置可以直接放在吸水材料上，但不会接触到孵育盒内的小盒。孵育盒有一盖，试验时盖上盖，防止凝胶板水分挥发。

(6)孵育盒内设置数个小盒，小盒为黑色不透明的耐热材料制成，底部有白色标记的刻度或者适用于双扩的各种孔型。可以直接在小盒内制备凝胶板，底部白色孔型便于打孔器直接打孔。黑色的背景便于观察试验形成的沉淀线，刻度便于测量单扩试验沉淀线直径。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。