毒品六项检测装置及其制作方法与流程

本发明涉及检测领域，尤其是涉及一种毒品六项检测装置及其制作方法。

背景技术：

随着社会经济的发展，机动车和驾驶员数量持续大幅增长，驾驶员中的吸毒者数量也持续增加。吸食毒品会使驾驶员精神亢奋，产生幻觉，降低判断能力，对交通安全的危害甚至超过酒驾。英国一项研究表明，酒后驾车比正常反应时间慢12％，而“毒驾”比正常反应时间慢21％。吸毒者往往会出现幻象，驾驶能力严重削弱，为恶性交通事故的发生埋下隐患。毒驾作为危险驾驶罪已严重危及到人们的生命安全。

目前市场上的毒品检测装置主要以检测尿液为主，均存在取样复杂、样品易污染、侵犯隐私等问题；即便市面上有个别唾液检测的产品，也存在取样量不足，唾液层析过程太慢，灵敏度较低，一次能检测的毒品种类少等问题。

技术实现要素：

基于此，有必要提供一种能够快速检测唾液等样品中的毒品种类的毒品六项检测装置及其制作方法。

一种毒品六项检测装置，包括检测卡、检测试纸条以及加样漏斗；所述检测卡具有检测腔，并设有与所述检测腔连通的加样槽和观察窗，所述检测试纸条安装在所述检测腔内，所述加样漏斗安装在所述加样槽上；所述检测试纸条包括基底和设在所述基底上且从所述基底的一端至另一端顺次连接的样品垫、结合垫、检测膜及吸收垫，所述样品垫位于所述加样槽中且位于所述加样漏斗的下方，所述结合垫上设有六种毒品的有色微球标记的特异性单克隆抗体，所述检测膜上具有至少六条分别对应于六种毒品的检测线，各所述检测线包被有相应毒品的合成抗原，所述检测线露于所述观察窗；所述六种毒品是吗啡、甲基安非他明、氯胺酮、二甲基双氧安非他明、四氢大麻酚酸及可卡因。

在其中的一个实施例中，每个所述检测卡内设有一条所述检测试纸条，该检测试纸条的结合垫上设有六种有色微球标记的特异性单克隆抗体，且该检测试纸条的检测膜上具有六条所述检测线；或者

每个所述检测卡内设有两条所述检测试纸条，各所述检测试纸条的结合垫上设有三种有色微球标记的特异性单克隆抗体，且各所述检测试纸条的检测膜上具有相应的三条所述检测线，两条所述检测试纸条用于检测的毒品不重复。

在其中的一个实施例中，所述检测膜上还设有包被羊抗鼠igg抗体的质控线。

在其中的一个实施例中，所述有色微球为红色微球。

一种毒品六项检测装置的制作方法，包括如下步骤：

制备结合垫和检测膜；其中，所述结合垫的制备步骤如下：将有色微球标记的六种毒品的特异性单克隆抗体溶液均匀涂布在结合垫上，干燥后即得；所述检测膜的制备步骤如下：将六种毒品的合成抗原溶液分别划线于所述检测膜上，形成对应于不同毒品的检测线，干燥后即得；所述六种毒品是吗啡、甲基安非他明、氯胺酮、二甲基双氧安非他明、四氢大麻酚酸及可卡因；

将样品垫、结合垫、检测膜和吸收垫从基底的一端至另一端顺次粘附在基底的一侧表面上，形成检测试纸条；

将所述检测试纸条安装在检测卡的检测腔中，使样品垫位于检测卡的加样槽中，且检测线露于检测卡的观察窗；

将加样漏斗对应于样品垫的上方安装在所述加样槽中。

在其中的一个实施例中，所述有色微球标记的六种毒品的特异性单克隆抗体溶液是通过如下步骤制备得到：

将有色微球溶于mes缓冲液中，加入edc/nhs活化剂活化；

活化后洗涤、离心，将收集的有色微球用硼酸缓冲液复溶，随后加入相应毒品的特异性单克隆抗体进行反应；

反应完后加入封闭剂进行封闭；

封闭过后，洗涤、离心，收集固体再次用硼酸缓冲液及封闭剂复溶，超声使有色微球标记的特异性单克隆抗体均匀分散在缓冲液中。

在其中的一个实施例中，有色微球与特异性单克隆抗体的质量比为(0.8～1.2):0.03；和/或

所述封闭剂是牛血清白蛋白；和/或

所述有色微球标记的六种毒品的特异性单克隆抗体溶液中有色微球标记的特异性单克隆抗体的浓度是0.1～1mg/ml。

在其中的一个实施例中，所述合成抗原溶液是将相应的合成抗原使用磷酸盐缓冲液或海藻糖稀释液稀释至浓度为0.3～1mg/ml得到。

在其中的一个实施例中，所述毒品六项检测装置的制作方法还包括在检测膜上使用羊抗鼠igg抗体溶液进行划线，并干燥形成质控线的步骤；所述羊抗鼠igg抗体溶液是将羊抗鼠igg抗体使用磷酸盐缓冲液或海藻糖稀释液稀释至浓度为1～3mg/ml得到。

在其中的一个实施例中，在制作形成所述检测试纸条时，是按照如下方法进行制作：

将六种毒品的合成抗原均匀涂布至用于制作同一检测试纸条的结合垫上，对应地，将六种毒品的有色微球标记的特异性单克隆抗体划线至用于制作同一检测试纸条的检测膜的不同区域，形成的每条所述检测试纸条具有六种毒品的合成抗原和相应的有色微球标记的特异性单克隆抗体；或

将六种毒品中的三种毒品合成抗原均匀涂布至用于制作同一检测试纸条的结合垫上，对应地，将该三种毒品的有色微球标记的特异性单克隆抗体划线至用于制作同一检测试纸条的检测膜的不同区域，形成的每条所述检测试纸条具有三种毒品的合成抗原和相应的有色微球标记的特异性单克隆抗体，另三种毒品的合成抗原及对应的有色微球标记的特异性单克隆抗体形成在另一条检测试纸条上；相应地，后续将该两条检测试纸条放入同一检测卡的检测腔中。

上述毒品六项检测装置可以同时检测唾液中的六种常见毒品，极大的提高了唾液中毒品检测的方便性，相比传统只能检测1～3种毒品的检测装置，检测效率大大提高。

并且，该毒品六项检测装置使用显色灵敏度更高的有色微球(如红色微球)进行标记，相对于传统使用胶体金标记抗体并制作的试剂条，在使用更少的抗体原料的情况下，还能获得更高的灵敏度。通过实验验证，本发明的毒品六项检测装置能检测的灵敏度分别是：吗啡为7.5ng/ml、甲基安非他明为25ng/ml、氯胺酮为50ng/ml、二甲基双氧安非他明为50ng/ml、四氢大麻酚酸为2ng/ml、可卡因为15ng/ml，这样的检测灵敏度分别比尿液检测的灵敏度提高约10倍，比其它使用胶体金标记制作的同类唾液检测试剂提高约1倍。

进一步，该毒品六项检测装置采用新型的加样结构及加样方式，采用光滑的加样漏斗与检测卡相配合，检测时，可直接将唾液吐到加样漏斗中，当唾液流进加样漏斗时，唾液泡沫会浮在加样漏斗的上方，而大部分唾液液体在沉在底部，使得大部分唾液液体能顺利滑到承载检测试纸条的检测腔中，唾液能顺利接触到检测试纸条，同时还能形成一定的液压，加速了唾液的层析速度，提高了检测效率。采用上述这种新型的加样方式，可避免传统方法中使用口含口腔拭子，经常取不到足够多的唾液量进行检测的问题，整个检测过程操作简单，便于使用。

附图说明

图1为本发明一实施例的毒品六项检测装置的结构示意图，其中a为俯视图，b为使用示意图；

图2为图1中检测试纸条的结构示意图；

图3为本发明另一实施例的毒品六项检测装置的结构示意图，其中a为俯视图，b为使用示意图。

具体实施方式

为了便于理解本发明，下面将参照相关附图对本发明进行更全面的描述。附图中给出了本发明的较佳实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。

需要说明的是，当元件被称为“固定于”、“设于”另一个元件，它可以直接在另一个元件上或者也可以存在居中的元件。当一个元件被认为是“连接”另一个元件，它可以是直接连接到另一个元件或者可能同时存在居中元件。

除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。

请结合图1和图2，本发明一实施例提供了一种毒品六项检测装置10，其包括检测卡100、检测试纸条200以及加样漏斗300。

检测卡100具有检测腔(图未示)，并设有与检测腔连通的加样槽102和观察窗104。检测试纸条200安装在检测腔内，加样漏斗300安装在加样槽102上。检测试纸条200包括基底210和设在基底210上且从基底210的一端至另一端顺次连接的样品垫220、结合垫230、检测膜240及吸收垫250。样品垫220位于加样槽102中且位于加样漏斗300的下方。

在本实施例中，结合垫230上设有六种毒品的有色微球标记的特异性单克隆抗体(例如重庆探生生物科技有限公司生产的单克隆抗体产品)，可与检测的毒品小分子高效的发生特异性结合。检测膜240上具有至少六条分别对应于六种毒品的检测线242。各检测线242包被有相应的毒品合成抗原(例如重庆探生生物科技有限公司生产的合成抗原)。一种偶联了牛血清白蛋白的小分子，与检测毒品分子相似的物质，更有利于结合到检测膜240上。检测线242露于观察窗104。

本发明所述的六种毒品是吗啡(mop)、甲基安非他明(met)、氯胺酮(ket)、二甲基双氧安非他明(mdma)、四氢大麻酚酸(thc)、可卡因(coc)。

该毒品六项检测装置10可以同时检测唾液中的六种常见毒品，极大的提高了唾液中毒品检测的方便性，相比传统只能检测1～3种毒品的检测装置，检测效率大大提高。

在图1和图2所示的具体示例中，每个检测卡100内设有一条检测试纸条200。该检测试纸条200的结合垫230上设有六种有色微球标记的特异性单克隆抗体，且该检测试纸条200的检测膜240上具有六条检测线242。因而，该检测试纸条200就可以实现同时检测六种毒品的作用。

在其他实施例中，如图3所示，每个检测卡100内也可以设有两条检测试纸条200。各检测试纸条200的结合垫230上设有三种有色微球标记的特异性单克隆抗体，且各检测试纸条200的检测膜240上具有相应的三条检测线242，两条检测试纸条200用于检测的毒品不重复。

进一步，在一个优选的示例中，检测试纸条200的检测膜240上还设有质控线244。质控线244优选包被有羊抗鼠igg抗体。

更进一步，本申请使用的有色微球为红色微球，其具有信号强、易于观察和显示的有益效果，相对于传统使用胶体金标记抗体并制作的试剂条，在使用更少的抗体原料的情况下，还能获得更高的灵敏度。通过实验验证，本发明的毒品六项检测装置的检测灵敏度比尿液检测的灵敏度提高约10倍，比其它使用胶体金标记制作的同类唾液检测试剂提高约1倍，具体可参后面的实验部分。

该毒品六项检测装置10采用新型的加样结构及加样方式，采用光滑的加样漏斗300与检测卡100相配合，检测时，可直接将唾液吐到加样漏斗300中，当唾液流进加样漏斗300时，唾液泡沫会浮在加样漏斗300的上方，而大部分唾液液体在沉在底部，使得大部分唾液液体能顺利滑到承载检测试纸条200的检测腔中，唾液能顺利接触到检测试纸条200，同时还能形成一定的液压，加速了唾液的层析速度，提高了检测效率。采用上述这种新型的加样方式，可避免传统方法中使用口含口腔拭子，经常取不到足够多的唾液量进行检测的问题，整个检测过程操作简单，便于使用。

本发明进一步还提供了一种毒品六项检测装置的制作方法，其包括如下步骤：

步骤一：制备结合垫和检测膜；其中，结合垫的制备步骤如下：将有色微球标记的六种毒品的特异性单克隆抗体溶液均匀涂布在结合垫上，干燥后即得；检测膜的制备步骤如下：将六种毒品的合成抗原溶液分别划线于检测膜上，形成对应于不同毒品的检测线，干燥后即得；六种毒品是吗啡、甲基安非他明、氯胺酮、二甲基双氧安非他明、四氢大麻酚酸及可卡因；

步骤二：将样品垫、结合垫、检测膜和吸收垫从基底的一端至另一端顺次粘附在基底的一侧表面上，形成检测试纸条；

步骤三：将检测试纸条安装在检测卡的检测腔中，使样品垫位于检测卡的加样槽中，且检测线露于检测卡的观察窗；

步骤四：将加样漏斗对应于样品垫的上方安装在加样槽中。

在步骤一中，有色微球标记的六种毒品的特异性单克隆抗体溶液是通过如下步骤制备得到：

将南京基蛋生物科技有限公司生产的100nm～400nm的有色微球(如红色微球)溶于20mm～100mm的mes缓冲液中，优选ph为5～7，加入edc/nhs活化剂室温活化，优选加入量为5～50μl，时间为10～60min；

活化后洗涤、离心，将收集的有色微球用硼酸缓冲液复溶，优选浓度为5mm～50mm，ph7～8.5，随后加入相应毒品的特异性单克隆抗体进行反应；

反应完后加入封闭剂进行封闭，优选加入量为50～100μl；

封闭过后，洗涤、离心，收集固体再次用硼酸缓冲液及封闭剂复溶，优选加入浓度为5mm～20mm，ph7～8.5，加入恢复原有体积的量，超声使有色微球标记的特异性单克隆抗体均匀分散在缓冲液中，于2～8℃避光保存。

其中，有色微球与特异性单克隆抗体的质量比优选为(0.8～1.2):0.03。封闭剂优选是牛血清白蛋白。最终制备的有色微球标记的六种毒品的特异性单克隆抗体溶液中有色微球标记的特异性单克隆抗体的浓度优选是0.1～1mg/ml。

涂布时可以使用但不限于biodot点膜仪将相应的溶液均匀喷涂在经过预处理的结合垫上。所述预处理是先在结合垫加入0.05％～2.50％的tween-80或tx-100溶液10ml～80ml烘干改性。

在步骤一中，在一个具体的示例中，合成抗原溶液是将相应的合成抗原使用磷酸盐缓冲液或海藻糖稀释液稀释至浓度为0.3～1mg/ml得到。

在一个具体的示例中，在步骤一中，该毒品六项检测装置的制作方法还包括在检测膜上使用羊抗鼠igg抗体溶液进行划线，并干燥形成质控线的步骤。其中，羊抗鼠igg抗体溶液优选是将羊抗鼠igg抗体使用磷酸盐缓冲液或海藻糖稀释液稀释至浓度为1～3mg/ml得到。

步骤一中，制作检测膜时的干燥条件可以是但不限于在37～45℃下干燥12～48小时；制作结合垫时的干燥条件可以是但不限于在37～45℃下干燥1～2小时。

进一步，在制作形成检测试纸条时，是按照如下方法进行制作：

将六种毒品的合成抗原均匀涂布至用于制作同一检测试纸条的结合垫上，对应地，将六种毒品的有色微球标记的特异性单克隆抗体划线至用于制作同一检测试纸条的检测膜的不同区域，形成的每条检测试纸条具有六种毒品的合成抗原和相应的有色微球标记的特异性单克隆抗体；或

将六种毒品中的三种毒品合成抗原均匀涂布至用于制作同一检测试纸条的结合垫上，例如氯胺酮、甲基安非他明、四氢大麻酚酸为一组，另外吗啡、二甲基双氧安非他明、可卡因为一组，减少因分子式相似而不可避免的交叉反应。对应地，将该三种毒品的有色微球标记的特异性单克隆抗体划线至用于制作同一检测试纸条的检测膜的不同区域，形成的每条检测试纸条具有三种毒品的合成抗原和相应的有色微球标记的特异性单克隆抗体，另三种毒品的合成抗原及对应的有色微球标记的特异性单克隆抗体形成在另一条检测试纸条上；相应地，后续将该两条检测试纸条放入同一检测卡的检测腔中。

上述毒品六项检测装置的制作方法简单易行，可广泛推广使用。

以下为具体的检测实施例部分。

利用上述毒品六项检测装置，检测时间为1-3min，比传统的检测方法(5-10min)，例如气相色谱法10-20min，要快约1倍以上。

利用上述毒品六项检测装置，对检测的六种常见毒品具有更高的灵敏度，用正常人尿液稀释传统的尿液检测限浓度，例如吗啡的传统检测限为300ng/ml，氯胺酮为1000ng/ml，甲基安非他明为1000ng/ml，四氢大麻酚酸为50ng/ml，可卡因为300ng/ml，二甲基双氧安非他明为500ng/ml。当稀释至10倍时，依然可检出阳性。通过购买市面上三家唾液检测试纸条的产品，同时倍比稀释毒品标准品，同时加样检测。其中本发明的检测限：吗啡为7.5ng/ml、甲基安非他明为25ng/ml、氯胺酮为50ng/ml、二甲基双氧安非他明为50ng/ml、四氢大麻酚酸为2ng/ml、可卡因为15ng/ml，比其它唾液检测产品高出约1倍。

利用上述毒品六项检测装置检测了确定为阴性的样本30人份，6种毒品分别为阳性样品各30份，检测符合率在95％以上。采集60例健康人群(无药物依赖菲吸毒个体)的唾液，其中30份添加购买的毒品标准品至唾液检测限浓度，例如氯胺酮为100ng/ml，分别加样加测。

以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。