本发明涉及富硒茶的指纹图谱检测方法，尤其涉及一种基于b-z非线性化学震荡技术的富硒茶叶非线性化学指纹图谱检测方法。
背景技术：
茶树是一种吸收、富集硒元素能力很强的植物，茶树通过生物富集和转化作用，能把非生物活性和毒性高的无机硒转化为安全有效、毒性低的有机硒，中国茶几乎都含有硒，含量为0.017～6.590mg/kg，茶叶中有机硒占硒总量的80％，利于人体吸收，所以茶叶是理想的补硒资源，经常饮茶，尤其是饮用富硒茶，可以改善人体的硒营养，起到预防疾病的效果。此外，富硒茶中除了含有对人体有益的有机硒外，还含有茶多酚、儿茶素、咖啡碱、氨基酸和微量元素，对人体健康有着重要意义。因此，富硒茶的开发利用有重要意义，正因为富硒茶有着较好的保健功效，很多地方的茶叶硒含量很低，但也打着富硒茶的旗号进行售卖，因此建立富硒茶叶相应的指纹图谱有着重要的现实意义。然而，现有技术中，并没有通过建立富硒茶叶相应的指纹图谱，并根据该指纹图谱进行检测的相关技术。
技术实现要素：
本发明提供了一种富硒茶叶的指纹图谱检测方法，可以有效解决上述问题。
本发明是这样实现的：
s1，将样品茶叶粉碎，并过筛制成茶叶粉末备用；
s2，称取所述茶叶粉末0.3000～0.7000g，保持反应总体积为100ml前提下依次加入0.01～0.03mol硫酸、0.00002～0.00005mol硫酸铈至反应器中，在25～45℃条件下进行磁力搅拌预定时间；然后加入0.001～0.005mol溴酸钾和0.0005～0.003mol丙二酸并用chi660e型非线性工作站进行图谱扫描，记录e-t曲线至电位消失为止，获得样品非线性指纹图谱；
s3,将所述样品非线性指纹图谱进行分析。
本发明的有益效果是：
1.本发明采用b-z非线性化学振荡技术建立一种富硒茶叶的非线性指纹图谱检测方法，相较于目前的基于hpcl、gc/ms等技术的指纹图谱检测方法具有对设备要求低、操作简单、无需提取、分离等预处理就可用于复杂样本质量评价等有点。
2.本发明针对茶叶中复杂组成成分，其有效成分通常不是单一成分且作用机制还没有完全清楚的特点，根据指纹图谱模糊性的基本属性，着眼于茶叶宏观的规律性特征分析，而不是求索细枝末节。
3.本发明提供的非线性化学指纹图谱的信息十分完整，包含复杂样本活性成分在整个非线性化学反应过程中所产生的信号随时间、空间变化的全谱，而且特征性强，重现性好。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施方式的技术方案，下面将对实施方式中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1是本发明实施例提供的富硒茶叶的非线性指纹图谱。
图2是本发明实施例提供的二次加入富硒茶叶样品后的非线性图谱。
图3-1至图3-3是本发明实施例提供的富硒茶叶非线性指纹图谱的平行测定。
具体实施方式
为使本发明实施方式的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施方式中的附图，对本发明实施方式中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施方式是本发明一部分实施方式，而不是全部的实施方式。基于本发明中的实施方式，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，都属于本发明保护的范围。因此，以下对在附图中提供的本发明的实施方式的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施方式。基于本发明中的实施方式，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，都属于本发明保护的范围。
一种富硒茶叶的非线性指纹图谱检测方法，包括以下步骤：
s1，将样品茶叶粉碎，并过筛制成茶叶粉末备用；
s2，称取所述茶叶粉末0.3000～0.7000g，保持反应总体积为100ml前提下依次加入0.01～0.03mol硫酸、0.00002～0.00005mol硫酸铈至反应器中，在25～45℃条件下进行磁力搅拌预定时间；然后加入0.001～0.005mol溴酸钾和0.0005～0.003mol丙二酸并用chi660e型非线性工作站进行图谱扫描，记录e-t曲线至电位消失为止，获得样品非线性指纹图谱；
s3,将所述样品非线性指纹图谱进行分析。
在步骤s1中，可以理解，茶叶粉末的粒径以及干燥程度对后续活性成分的析出均有较大影响。因此，优选的，将茶叶粉碎后过60目筛制成茶叶粉末备用，并将所述新鲜富硒茶茶叶烘干使其含水量达到25％左右。
在步骤s2中，当茶叶粉末质量增加时，其相应参数变差可能是富硒茶叶中活性成分的增加反而会对振荡反应进行抑制。当茶叶粉末质量减少时，活性成分的减少引起了诱导时间的增加，振荡寿命的缩短，最大振幅的减小，不利于图谱分析的研究。优选的，所述茶叶粉末的加入量为0.4000～0.6000g。更优选的，茶叶粉末加入量为0.5000g。茶叶粉末加入量为0.5000g时，其诱导时间最短，振荡周期最长，最大振幅最大，因此选择该质量为最佳加入量。
作为进一步改进的，在其中一个实施例中，加入0.015mol硫酸、0.00004mol硫酸铈至反应器中。
随着温度的升高，诱导反应和振荡反应过程中各基元反应加快，指纹图谱的各个指标均有较大变化。特别显著的是提高反应温度振荡寿命和最大振幅明显增大。在25℃时，存在诱导时间长，振荡寿命短和最大振幅小等缺点，不利于非线性图谱的分析研究。因此选择一个合适的温度条件，对反应时间的控制以及图谱稳定性和重现性，均有重要意义。由于茶水被人服用，而35～38℃左右是接近人体温度，并且实验证明该温度下有较好的振荡特征，因此，优选的，在35～38℃条件下进行磁力搅拌10min。更优选的，在37℃条件下进行磁力搅拌10min。这是由于37℃是最接近人体温度，且该温度下有最好的振荡特征，所以实验体系温度选择37℃。
作为进一步改进的，在其中一个实施例中，加入0.002mol溴酸钾和0.001mol丙二酸。
在步骤s3中，所述将样品非线性指纹图谱进行分析的步骤包括：
s31，将所述样品非线性指纹图谱与标准非线性指纹图谱中的数据进行对比，获得茶叶样品的产地信息。
实施例1
将样品茶叶粉碎，并过筛制成茶叶粉末备用；称取所述茶叶粉末0.3000，保持反应总体积为100ml前提下依次加入0.01mol硫酸、0.00002mol硫酸铈至反应器中，在25℃条件下进行磁力搅拌预定时间；然后加入0.001mol溴酸钾和0.0005mol丙二酸并用chi660e型非线性工作站进行图谱扫描，记录e-t曲线至电位消失为止，获得样品非线性指纹图谱；将所述样品非线性指纹图谱进行分析。
如图1所示，可以看出该振荡体系有一段较短的诱导期，诱导时间tin为90s，随着振荡的进行，振幅越来越大，在270s处，振幅达到了最大，随后振幅逐渐缩小直至振荡消失，振荡寿命ts为800s，振荡周期tp为11s。进一步实验发现，当振荡结束后，往振荡体系里加入硫酸铈铵、丙二酸，溴酸钾等药品均不能使振荡重新起振，但往体系里加入富硒茶样品后，可发现体系重新振荡，由图2可知，在600s处加入少量茶叶粉末，又会重新出现一个振荡体系，说明该振荡体系为富硒茶的特征非线性指纹图谱，是富硒茶叶里活性成分共同作用的结果。
实施例2
将样品茶叶粉碎，并过筛制成茶叶粉末备用；称取所述茶叶粉末0.7000g，保持反应总体积为100ml前提下依次加入0.03mol硫酸、0.00005mol硫酸铈至反应器中，在45℃条件下进行磁力搅拌预定时间；然后加入0.005mol溴酸钾和0.003mol丙二酸并用chi660e型非线性工作站进行图谱扫描，记录e-t曲线至电位消失为止，获得样品非线性指纹图谱；将所述样品非线性指纹图谱进行分析。
重现性试验：平行测定3次，由图3-1至图3-3可见，同一来源的同种茶叶样品因化学成分及其含量相同，在相同实验条件下，测得的非线性指纹图谱的各种指标基本相同，非线性指纹图谱有良好的重现性。
实施例3
将样品茶叶粉碎，并过筛制成茶叶粉末备用；称取所述茶叶粉末0.5000g，保持反应总体积为100ml前提下依次加入0.02mol硫酸、0.00004mol硫酸铈至反应器中，在37℃条件下进行磁力搅拌预定时间；然后加入0.002mol溴酸钾和0.001mol丙二酸并用chi660e型非线性工作站进行图谱扫描，记录e-t曲线至电位消失为止，获得样品非线性指纹图谱；将所述样品非线性指纹图谱进行分析。
以上所述仅为本发明的优选实施方式而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。