本发明属于化学/生物传感
技术领域：
：，具体涉及一种基于复合膜修饰电极的苯乙醇胺a检测方法及传感器。
背景技术：
：：苯乙醇胺(phenylethanolamine，pea)是一种天然的β3-肾上腺素受体激动剂；而苯乙醇胺a(phenylethanolaminea，pea-a)，是一种功能化的β-受体激动剂，是莱克多巴胺合成过程中的副产物，因不容易被检测出来而常常被忽视，近年来其常被非法用于动物(家禽、猪、牛等)的饲料添加剂，以促进动物胴体生长和提高瘦肉率，所以又称为“变种瘦肉精”。由于瘦肉精能在动物体内富集，人类在长期或大量食用含有β-受体激动剂的肉制品等副产品后会导致毒副作用，比如心悸、肌肉震颤、心神困惑等病症。在体育比赛中，β-受体兴奋剂药曾被非法用于增强体育运动员的肌肉，从而达到提高比赛成绩的效果。因此，国际奥委会已将其指定为禁用药物。另外我国农业部、卫生部和国药监督管理局也已在2010年颁布的第1519号公告《禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物品种目录》中明确禁止使用瘦肉精等β-受体激动剂。因此，开发一种快速、灵敏的检测变种瘦肉精pea-a含量的方法，在动物养殖和食药领域具有重要的意义。目前已有多种方法用于检测pea-a，如酶联免疫吸附法、表面増强拉曼散射免疫层析分析法，液相色谱串联质谱分析、荧光免疫层析分析法等，这些方法存在样品前处理复杂、仪器昂贵、操作繁琐、灵敏度较低等缺点。而电化学传感器具有制备工艺简单、易于操作、选择性好和灵敏度高等优点，已成为国内外学者的研究热潮。其中，lai等(2013)制备了nafion/金纳米粒子-多壁碳纳米管(nafion/aunps-mwcnts)纳米复合材料修饰的玻碳电极(gce)，采用线性扫描伏安法(lsv)，该电极对pea-a具有良好的选择性和的稳定性，检测下限为5.0nmol/l。li等(2015)制备了基于还原氧化石墨烯/聚离子液体(rgo/pil)修饰玻碳电极，该传感器对pea-a有较高的催化活性和良好的重现性，使用差分脉冲伏安法(dpv)，检测下限为2.0nmol/l。此外，一些新型纳米材料如基于金属有机框架结构的分子印迹聚合物(mofs-mip)复合膜修饰金电极的电化学传感器，对pea-a有很高的灵敏度；二维六角形氮化硼/功能化多壁碳纳米管(2d-hbn/f-mwcnts)纳米复合材料修饰玻碳电极对pea-a具有良好的选择性和电催化氧化活性。因此，为了提高pea-a电化学传感器的检测灵敏度、选择性和稳定性，改进电极修饰材料的电化学性能和催化性能是关键因素。近年来，fe3o4磁性纳米微球是应用较为广泛的微型磁性材料之一。fe3o4磁性颗粒具有特殊的磁性效应、较大的比表面积、优异的导电性、表面可修饰性等优点，已经在锂离子电池、电化学传感器、环境污染处理、细胞分离、药物运输、医疗诊断等领域得到了广泛的应用。但是由于fe3o4存在永久团聚性，容易被氧化，因此常对其表面进行改性和功能化修饰，形成性能更加优越的核壳结构微球。二氧化硅是一种化学性质稳定的的无机分子，具有很好的生物兼容性和无毒性，可以作为壳包裹在fe3o4纳米粒子表面，形成fe3o4@sio2磁性核壳微球，既可以防止fe3o4团聚和氧化，又同时具有良好的导电性和催化性，在电化学领域具有优越的性能与应用前景。氧化石墨烯(grapheneoxide，go)是一种由sp2杂化的碳原子排列组成的二维芳香片层碳纳米材料，具有比表面积大、导电性强、稳定性好等优点，是一种极具潜力的电化学修饰材料，可应用于电化学传感器。然而由于go表面呈褶皱纸状，容易团聚在一起，可能会削弱go的电化学性能，因此可以对go的表面进行功能化，以改善其电化学性能。乙炔黑(ab)是一种导电性高、稳定性和吸附性好的碳纳米材料，可以通过π-π键的作用，与氧化石墨烯结合，不仅可以阻止go团聚，还可以进一步提高go的导电性等性能。但是迄今为止，基于fe3o4@sio2核壳纳米粒子负载于ab-go碳纳米复合膜的电化学修饰传感器用于苯乙醇胺a(pea-a)的检测尚无报道。技术实现要素：本发明旨在克服现有技术的不足，提供一种基于复合膜修饰电极的苯乙醇胺a检测方法及传感器。为了达到上述目的，本发明提供的技术方案为：所述基于复合膜修饰电极的苯乙醇胺a检测方法包括如下步骤：(1)制备fe3o4@sio2磁性纳米粒子：a)制备fe3o4磁性纳米粒子：采用水热合成法制备fe3o4磁性纳米粒子；b)制备fe3o4@sio2磁性纳米粒子：将步骤a)制备好的fe3o4磁性纳米粒子加入hcl中超声处理后，分离得到黑色固体，洗净；然后将黑色固体均匀的分散在c2h5oh、超纯水和nh3·h2o的混合液中，再加入si(oc2h5)4，于室温下搅拌反应4～8h，分离得到fe3o4@sio2磁性纳米粒子，依次用c2h5oh和超纯水清洗，干燥后备用；其中，所述hcl的浓度为0.08～0.12mol/l，所述c2h5oh、超纯水和nh3·h2o的混合液中c2h5oh、超纯水和nh3·h2o的体积比为(75～85)：(15～25)：1，所述fe3o4磁性纳米粒子与si(oc2h5)4的质量比为(0.08～0.12)：(0.025～0.035)；(2)制备ab-go复合纳米材料：a)将go加入到无水乙醇中超声分散均匀，得到浓度为0.5～2.0mg/ml的go溶液；b)将ab加入到羧甲基纤维素钠和无水乙醇的混合液中超声分散，得到浓度为1.5～4.5mg/ml的ab溶液；c)将步骤(2)中步骤a)所得的go溶液和步骤(2)中步骤b)所得的ab溶液混合超声4～8h，得到ab-go复合纳米材料的分散液；所述go溶液和ab溶液的体积比为1:1；(3)制备fe3o4@sio2/ab-go/gce复合膜修饰电极：对玻碳电极表面进行抛光，超声洗净后晾干，将ab-go复合纳米材料的分散液滴涂于玻碳电极表面，然后将fe3o4@sio2磁性纳米粒子溶液滴涂于表面已涂有ab-go的玻碳电极上，晾干后即得fe3o4@sio2/ab-go/gce复合膜修饰电极；所述fe3o4@sio2磁性纳米粒子溶液中fe3o4@sio2磁性纳米粒子的浓度为0.5～2.0mg/ml；(4)以fe3o4@sio2/ab-go/gce复合膜修饰电极为工作电极，以银/氯化银电极作为参比电极，以铂丝电极作为对电极，构成三电极体系；然后采用示差脉冲伏安法考察苯乙醇胺a在不同修饰电极上的电化学行为，并对不同浓度的苯乙醇胺a进行测试，绘制工作标准曲线，再采用标准加入法对待测样品中的苯乙醇胺a进行检测。优选地，所述水热合成法制备fe3o4磁性纳米粒子的过程为：将fecl3·6h2o和ch3coona加入(ch2oh)2中，在磁力搅拌下超声分散25～35min后，得到均匀的黄色透明溶液；将黄色溶液转移到聚四氟乙烯高压反应釜中，密封，在200℃下反应6～10h，待高压釜冷却至室温后，在磁力作用下进行固液分离，得到黑色磁性颗粒，将黑色磁性颗粒用乙醇和超纯水分别清洗后干燥，即得fe3o4磁性纳米粒子；其中，所述fecl3·6h2o、ch3coona、(ch2oh)2的比例为(1～2)g：(3～4)g：(20～105)ml。优选地，步骤(3)中对玻碳电极表面进行抛光是分别用0.3μm和0.05μm的α-al2o3粉对玻碳电极表面进行抛光。优选地，步骤(3)中所述玻碳电极直径为3mm，将5μlab-go分散液滴涂于玻碳电极表面，再将5μlfe3o4@sio2溶液滴涂于表面已涂有ab-go的玻碳电极上。优选地，步骤(3)中是采用示差脉冲伏安法考察苯乙醇胺a在不同修饰电极上的电化学行为，设置示差脉冲伏安法参数为：振幅0.05v、脉冲宽度为0.2s、抽样宽度为0.02、脉冲周期为0.5s，对不同浓度的苯乙醇胺a进行测试，绘制工作标准曲线，再采用标准加入法对待测样品中的苯乙醇胺a进行检测。基于复合膜修饰电极的苯乙醇胺a检测传感器包括作为工作电极的复合膜修饰电极；所述复合膜修饰电极包括玻碳基质(5)，所述玻碳基质(5)表面修饰有go-ab层(6)，所述go-ab层(6)上负载有fe3o4@sio2层(7)。优选地，所述传感器包括玻碳基质(5)的厚度为1.0～5.0mm，所述go-ab层(6)的厚度为20～200nm，所述fe3o4@sio2层(7)的厚度为320～520nm。优选地，所述fe3o4@sio2层(7)由球形的fe3o4@sio2磁性纳米粒子组成，所述fe3o4@sio2磁性纳米粒子由fe3o4磁性纳米粒子(9)和包裹于fe3o4磁性纳米粒子外的sio2纳米壳层(10)。优选地，所述fe3o4磁性纳米粒子(9)的半径为150～220nm，所述sio2纳米壳层(10)的厚度为20～80nm。优选地，所述传感器对苯乙醇胺a的浓度存在良好的线性关系，检测的线性范围为1.0～1000mol/l，检出限为0.12nmol/l。本发明采用水热合成法，制备了分散性好、导电性高的四氧化三铁(fe3o4)磁性纳米粒子，将其表面包裹一层二氧化硅(sio2)，形成fe3o4@sio2核壳纳米材料，以氧化石墨烯-乙炔黑(go-ab)为载体，修饰在玻碳电极(gce)表面，形成四氧化三铁@二氧化硅/氧化石墨烯-乙炔黑复合膜修饰电极(fe3o4@sio2/go-ab/gce)。利用扫描电子显微镜对纳米复合材料的形貌进行表征，采用循环伏安法(cv)和示差脉冲伏安法(dpv)探讨了苯乙醇胺a(pea-a)在不同修饰电极上的电化学行为。结果表明，fe3o4@sio2/go-ab/gce对pea-a表现出良好的电催化氧化还原特性。在0.10mol/l的pbs缓冲溶液(ph＝6.5)中，该修饰电极的响应峰电流与pea-a的浓度存在良好的线性关系，线性范围为1.0～1000nmol/l，检出限为0.12nmol/l(s/n＝3)。该电极具有良好的重现性、稳定性和抗干扰能力。将该电极用于猪血清和猪尿液样品中pea-a的测定，回收率分别为96.0％～110.0％和93.8％～104.7％，说明该电极在健康养殖生化检测领域有重要的应用价值。附图说明图1为基于复合膜修饰电极的苯乙醇胺a检测传感器的工作结构示意图；图2为fe3o4@sio2/go-ab/gce修饰电极构建示意图；图3为不同材料的电镜表征图(sem图)：go(a)，ab(b)，ab-go(c)，fe3o4(d)，fe3o4@sio2(e)和fe3o4@sio2/ab-go复合物(f)；图4为不同修饰电极在含有0.10mol/lkcl的[fe(cn)6]4-/3-(1.0mmol/l)中的循环伏安曲线图：(a)baregce，(b)ab-go/gce，(c)fe3o4@sio2/gce，(d)fe3o4@sio2/go-ab/gce；图5为不同修饰电极分别在含有5.800×10-6mol/l和1.160×10-5mol/lpea-a的0.10mol/lpbs缓冲溶液(ph＝6.5)中的循环伏安曲线图和示差脉冲伏安曲线图：(a)baregce，(b)ab-go/gce，(c)fe3o4@sio2/go-ab/gce；图6为苯乙醇胺a的氧化峰电流(a)和氧化峰电位(b)随ph值变化的关系曲线图；图7：(a)不同扫描速率下pea-a在fe3o4@sio2/go-ab/gce上的循环伏安曲线图，(b)pea-a的氧化峰电电流和还原峰电流与扫速线性关系图；图8为苯乙醇胺a在fe3o4@sio2/go-ab/gce上的氧化还原反应机理图；图9为fe3o4@sio2/go-ab/gce对不同浓度pea-a的示差脉冲伏安曲线(a)及相应的氧化峰电流电流与浓度的线性关系曲线图(b)；图10为干扰物质对fe3o4@sio2/go-ab/gce的影响图。图1中：1、银/氯化银电极；2、铂丝电极；3、玻碳电极；4、待测溶液；5、玻碳基质；6、go-ab层；7、fe3o4@sio2层；8、pea-a；9、fe3o4磁性纳米粒子；10、sio2纳米壳层。具体实施方式实施例中所用试剂均为分析纯(ar)，实验用水均为超纯水(电阻率≥18.3mω·cm)。一、实验过程1、fe3o4@sio2磁性纳米粒子的制备(1)fe3o4磁性纳米粒子的制备：采用水热合成法制备fe3o4磁性纳米粒子。首先，取1.35g的fecl3·6h2o和3.60g的ch3coona于100ml的圆底烧瓶中，再加入50ml的(ch2oh)2，在磁力搅拌下超声分散30min后，得到均匀的黄色透明溶液。然后，将黄色溶液转移到不锈钢聚四氟乙烯高压反应釜中，密封，在200℃下反应8小时，待高压釜冷却至室温后，在磁力作用下进行固液分离，得到的黑色磁性颗粒。最后，将黑色磁性颗粒用乙醇和超纯水分别洗3次，在60℃的真空干燥箱中干燥12小时后，得到的黑色固体。(2)fe3o4@sio2磁性纳米粒子的制备：取0.1g上一步制备好的fe3o4磁性纳米粒子，加入50ml的hcl(0.1mol/l)超声处理10min后，分离得到黑色的固体用去离子水冲洗。然后将其均匀的分散在由80ml的c2h5oh、20ml的超纯水、1.0ml的nh3·h2o(20wt％)组成的混合液中，然后加入0.03g的si(oc2h5)4(0.144mmol)，室温下搅拌反应6小时，分离得到fe3o4@sio2固体，依次用c2h5oh和超纯水清洗3次，干燥后备用。2、ab-go复合纳米材料的制备(1)取10mg氧化石墨烯(go)加人10ml无水乙醇，超声5h使其完全分散均匀，得到1.0mg/ml的go溶液。(2)取30mg乙炔黑(ab)固体，分别加入0.3ml羧甲基纤维素钠(5％)和9.7ml无水乙醇，超声分散4小时，得到分散均匀的ab溶液(3.0mg/ml)。(3)将10ml的go溶液和10ml的ab溶液混合超声6小时，得到分散性良好的的ab-go复合纳米材料。3、fe3o4@sio2/ab-go/gce复合膜修饰电极的制备首先将玻碳电极(gce，3mm)表面分别用0.3μm和0.05μm的α-al2o3粉打磨抛光成镜面，再分别用超纯水、乙醇超声清洗干净。取5l的ab-go分散液滴涂在gce表面，然后再滴涂5μl的fe3o4@sio2溶液(1.0mg/ml)，自然晾干后于4℃保存备用(如图2所示)。4、pea-a的电化学检测参见图1，以表面修饰的玻碳电极3作为工作电极，银/氯化银(内含饱和氯化钾溶液)电极1作为参比电极，铂丝电极2作为对电极的三电极体系，在背景溶液为0.10mol/l的pbs缓冲溶液中，设置示差脉冲伏安法(dpv)参数：振幅为0.05v，脉冲宽度为0.2s，抽样宽度为0.02，脉冲周期为0.5s。其中，所述表面修饰的玻碳电极3即为本发明所述基于复合膜修饰电极的苯乙醇胺a检测传感器中的复合膜修饰电极；所述复合膜修饰电极包括玻碳基质5，所述玻碳基质5表面修饰有go-ab层6，所述go-ab层6上负载有fe3o4@sio2层7。所述传感器包括玻碳基质5的厚度为1.0～5.0mm，所述go-ab层6的厚度为20～200nm，所述fe3o4@sio2层7的厚度为320～520nm。所述fe3o4@sio2层7由球形的fe3o4@sio2磁性纳米粒子组成，所述fe3o4@sio2磁性纳米粒子由fe3o4磁性纳米粒子9和包裹于fe3o4磁性纳米粒子外的sio2纳米壳层10。所述fe3o4磁性纳米粒子9的半径为150～220nm，所述sio2纳米壳层10的厚度为20～80nm。采用dpv法考察pea-a8在不同修饰电极上的电化学行为，并对不同浓度的pea-a(0.001，0.008，0.020，0.050，0.080，0.200，0.500，0.800，1.000mol/l)进行测试，绘制工作曲线。采用标准加入法对猪血清和猪尿液样品(待测溶液4)中pea-a进行检测。猪血清和猪尿液样品(来源于5头活体三元杂小猪，体重为7～15kg)由中国科学院亚热带农业生态研究所(长沙)提供。分别将5种不同的猪血清样品和猪尿液样品(50.00μl)加入ph＝6.5的pbs缓冲溶液(4.950ml)中稀释100倍，再向猪血清和猪尿液溶液中加入不同浓度的pea-a(0.100，0.200，0.400，0.600，0.800μmol/l)，采用dpv法进行测定。二、实验结果与分析1、材料的表征采用扫描电子显微镜(sem)分别对go、ab、go-ab、fe3o4、fe3o4@sio2、fe3o4@sio2/go-ab的结构和表面形貌进行表征，结果如图3所示。由图3(a)可以看到，go的表面成一层褶皱的薄纱状，具有比较大的比表面积。由图3(b)可以看到,ab呈细小的颗粒状。图3(c)为go-ab复合物，从图中可以看到加入ab之后，go将颗粒状的ab包裹在了一起，形成了一种多孔碳复合材料，既改善了go表面的平展性，又提供了更多的活性位点。由图3(d)可以看到，fe3o4呈微球状，表面较为粗糙，具有良好的分散性。由图3(e)所示，在fe3o4的表面沉积一层sio2后形成核壳结构的微球，即fe3o4@sio2，表面变得较为光滑，粒径相对fe3o4略有增加。由图3(f)所示，fe3o4@sio2较好地负载到go-ab上，进一步增大了复合材料的比表面积，更加有利于目标物如pea-a的吸附富集，提高检测的灵敏度。2、修饰电极的循环伏安特性分别考察裸gce(a)，fe3o4@sio2/gce(b)，go-ab/gce(c)，fe3o4@sio2/go-ab/gce(d)在含有0.1mol/lkcl的1.0mmol/l[fe(cn)6]4-/3-溶液中的循环伏安行为(cv)。结果如图4所示，在扫速为50mv/s、扫描电位0.00～0.60v时，裸gce上有一对氧化还原峰。当修饰fe3o4@sio2后，氧化还原峰电流增强，峰电位负移，说明fe3o4@sio2/gce对[fe(cn)6]4-/3-有一定的催化作用。而修饰了go-ab后，氧化还原峰电流有显著的增加，这说明go-ab有优异的导电性，明显提高了[fe(cn)6]4-/3-氧化还原过程中电子的传递速率。将fe3o4@sio2核壳纳米材料与go-ab碳材料复合后修饰玻碳电极，由于两种材料的协同作用又一步加强了材料的导电性和催化性。3、pea-a在电极表面的电化学行为分别考察裸gce，go-ab/gce，fe3o4@sio2/go-ab/gce在含有5.800×10-6mol/l的pea-a的0.10mol/lpbs缓冲溶液中的示差脉冲伏安行为(dpv)，及在1.160×10-5mol/l的的0.10mol/lpbs缓冲溶液中的循环伏安伏安行为(cv)，如图5所示。由图5(a)可知，pea-a在裸gce上没有出现明显的氧化还原峰，说明pea-a在裸gce上较难被氧化；而相对于裸gce，pea-a在go-ab/gce上有明显的氧化还原峰(曲线b)，说明go-ab对pea-a有一定的电催化氧化还原作用。与裸gce和go-ab/gce相比，pea-a在fe3o4@sio2/go-ab/gce上的氧化峰电流和还原峰电流分别增大了5.63倍和5.61倍，说明fe3o4@sio2和go-ab复合后，复合材料的导电性能和电化学催化性能得到了显著的提高，增强了pea-a在电极表面的电催化氧化还原反应。而从图5(b)的dpv曲线中，同样可以明显地看到fe3o4@sio2/go-ab/gce相对于裸gce和go-ab/gce，对pea-a也表现出更强的电化学响应信号，同时进一步证实了fe3o4@sio2/go-ab复合纳米材料能够促进pea-a在修饰电极表面发生电化学反应。4、ph值对pea-a电化学行为的影响采用dpv法考察修饰电极fe3o4@sio2/go-ab/gce在ph为5.0～8.0的pbs溶液(0.10mol/l)中对pea-a(5.800×10-6mol/l)的氧化峰电流和峰电位随ph值变化的关系，结果如图6所示。由图6(a)可在得，ph从5.0到6.5时，pea-a的峰电流随ph值的增加而逐渐增大；当ph从6.5增加到8.0时，pea-a峰电流随ph的增加而逐步减小。当ph＝6.5时，pea-a的峰电流达到最大值。因此选择ph＝6.5的pbs缓冲溶液作为检测pea-a的最佳底液。由图6(b)可以看出pea-a的峰电位与ph值成线性关系，说明pea-a在其电极界面反应过程中存在质子和电子的转移过程；其线性方程拟合为epa＝0.05859ph–0.2787，线性相关系数为r＝0.9987，根据能斯特方程：ep＝e0–0.05916(m/n)ph，其中m为反应转移的质子数，n为转移的电子数，由此可推算出m＝0.904n,即m≈n，说明pea-a在该修饰电极界面上的转移的电子数和质子数相等。5、pea-a在修饰电极上氧化机理的探讨采用cv法考察pea-a的峰电流、峰电位随扫速变化的关系，结果如图7所示。从图7(a)中可以看出，在扫速为40～140mv/s范围内，pea-a在该电极上的氧化峰电流和还原峰电流随扫速的增大而增大，并且可以得到pea-a在电极上的电化学行为是一个可逆的氧化还原过程。从图7(b)的中可以看出，pea-a的氧化峰电流和还原峰电流均与扫速呈线性关系，线性方程可拟合为ip＝–0.9024–0.01827v和ip＝–0.9024–0.01827，线性相关系数r＝0.9969和，这说明pea-a在修饰电极上的氧化还原反应为一个吸附控制过程。又根据pea-a的氧化还原反应是等电子等质子的反应，因此可以推断pea-a的氧化还原机理的反应方程式如图8所示。6、线性范围和检出限在优化实验条件下，采用fe3o4@sio2/go-ab/gce修饰电极，通过dpv法对不同浓度的苯乙醇胺a(pea-a)进行检测，结果如图9所示。图9(a)是fe3o4@sio2/go-ab/gce修饰电极对不同浓度的pea-a的示差脉冲伏安曲线，由图9(b)可知，pea-a的氧化峰电流与其浓度在1.0～1000nmol/l范围有良好的线性关系，线性方程可拟合为：ip＝6.4146c+0.1109，相关系数r＝0.9996，检出限达到0.12nmol/l(s/n＝3)，表明该修饰电极对苯乙醇胺a的检测有比较好的的线性范围和检出限。7、电极的重现性、重复性与稳定性在优化实验条件下，使用同一批次下制备的7支fe3o4@sio2/go-ab/gce电极对4.0×10-7mol/l的pea-a进行反复测定，几次测量结果的相对标准偏差为2.34％，说明该电极具有良好的重现性。而且，采用同一支fe3o4@sio2/go-ab/gce电极对4.0×10-7mol/l的pea-a连续检测5次，几次测量结果的相对标准偏差为3.58％，说明该电极具有较好的重复性。此外，为了考察了修饰电极长期使用的稳定性，将修饰电极保存于4℃的冷藏室30天，每隔三天测试该电极对pea-a的响应性能。实验发现，连续使用30天后，修饰电极对pea-a的响应信号可达到最初时的83.64％，表明该修饰电极具有良好的长期使用稳定性。8、抗干扰性测试测试常见的几种β-受体激动剂和氨基酸对pea-a(pa)的影响(如图10所示)。在含有4.0×10-7mol/l的pa样品的pbs缓冲溶液中，分别加入50倍浓度的沙丁胺醇(sal)、莱克多巴胺(rac)、克伦特罗(clb)、酪氨酸(tyr)、脯氨酸(pro)、甲硫氨酸(met)、甘氨酸(gly)、谷氨酸(glu)、赖氨酸(lys)、组氨酸(his)、半胱氨酸(cys)干扰组分，采用dpv法对其进行检测。结果表明，加入这10种干扰组分后，修饰电极的峰电流几乎没有发生明显变化。由此可见，fe3o4@sio2/go-ab/gce对pa有很好的抗干扰性。9、分析应用考察fe3o4@sio2/go-ab/gce修饰电极对不同实际样品(猪血清和猪尿液)中苯乙醇胺a(pea-a)的分析检测应用。猪血清和猪尿液样品(取自5头活体三元杂小猪，体重为7～15kg)由中国科学院亚热带农业生态研究所提供。采用标准加入法进行测定，即向猪血清和猪尿液溶液中加入不同浓度的pea-a(0.100，0.200，0.400，0.600，0.800μmol/l)，采用dpv法进行检测并计算加标回收率。由表1和表2可知，加标回收率分别为96.0％～110.0％和93.8％～104.7％，表明该修饰电极具有比较好的准确性，可应用于实际猪血清和猪尿液样品中pea-a的快速灵敏检测，在生化检测和养殖行业具有潜在应用价值。表1猪血清样品中苯乙醇胺a的测定table1applicationoffe3o4@sio2/go-ab/gcetodeterminationofpea-ainporkserumsamples表2猪尿液样品中苯乙醇胺a的测定table2applicationoffe3o4@sio2/go-ab/gcetodeterminationofpea-ainporkurinesamples本发明采用超声法制备了ab-go纳米复合材料，将fe3o4@sio2核壳纳米颗粒通过自组装法负载在ab-go复合材料，构建了fe3o4@sio2/go-ab/gce复合膜修饰电极。采用电化学方法探讨该修饰电极对pea-a的电催化氧化还原机理，并将该修饰电极应用于猪血清和猪尿液样品中pea-a的测定，表现出良好的选择性、重现性和稳定性，检测限达到0.12nmol/l，在动物养殖和食品安全检测领域具有很好的实际应用价值。当前第1页12当前第1页12