一种应用液体闪烁计数仪测定酒用香料冰乙酸天然度的方法及其应用与流程

本发明涉及酒类产品的检测分析技术领域，具体是一种应用液体闪烁计数仪测定酒用香料冰乙酸天然度的方法及其应用。

背景技术：

当前用于酒类产品中的香料有乙酸乙酯、己酸、己酸乙酯、乳酸乙酯、乙酸、丁酸、丁酸乙酯等等，而现有市面上所售香料部分有天然发酵而成和化学合成两种。而酒类产品中倡导使用纯天然的食品香精香料，因此有必要加强香精香料天然度的识别能力。

c-14由于受到宇宙射线中子对氮14原子的作用，不断地形成于大气上层。它在空气中迅速氧化，形成二氧化碳并进入全球碳循环。动植物在它们的一生中都从二氧化碳中吸收碳14，当它们死亡后，就停止与生物圈的碳交换，其碳14含量开始减少，减少的速度由放射性衰变决定，其半衰期为5500年。而由亿万年形成的化石原料(石油、煤、天然气)及其衍生产品中的c14活性可以忽略不计(接近于0)。因此，通过对c14的测定，便可判定该产品是全部或部分来自于石油衍生制品(合成)或者是纯天然产物。

目前，对于天然产物鉴别使用的是同位素分析技术，鉴定方法主要为两种，即加速器质谱法与液体闪烁计数法，这两种方法都是通过测定c-14的含量来确定香料天然度。而加速器质谱仪该设备价格相当昂贵，相反液体闪烁计数法虽然检测周期相对较长，但使用的仪器设备价格相对较低，操作也较为简单。因此，本发明提供一种应用液体闪烁计数仪测定酒用香料冰乙酸天然度的方法，通过天然度来判定其是否来源于天然产物，从而确定酒用香料及提取物是否为天然来源。

技术实现要素：

本发明的目的就是提供一种应用液体闪烁计数仪测定酒用香料冰乙酸天然度的方法及其应用，通过天然度来判定其是否来源于天然产物，从而确定酒用香料及提取物是否为天然来源。

为实现上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明的一种应用液体闪烁计数仪测定酒用香料冰乙酸天然度的方法，包含以下步骤：

(1)配制不同天然度水平的冰乙酸标准样品，混合均匀后备用；

(2)将冰乙酸标准样品和待测样品分别与闪烁液充分溶解，摇匀后备用；

(3)使用液体闪烁计数仪对混匀后的标准样品和待测样品中的c-14进行计数；

(4)建立计数值cpm与冰乙酸标准样品中天然度的线性关系；

(5)以待测样品的cpm值从线性关系中得出待测样品的天然度水平。

优选地，本发明中所述步骤(1)中冰乙酸标准样品是美国beta实验室检测天然度为100％的冰乙酸标准品，使用分析纯试剂冰乙酸进行稀释，配制成天然度水平为0％、20％、25％、50％、100％的不同冰乙酸标准样品。

优选地，本发明中所述步骤(2)中标准样品以及待测样品体积为10.0ml，加入闪烁液的体积为10.0ml。

优选地，本发明中所述步骤(3)中液体闪烁计数仪的计数条件为，能量范围(kevenergyregions)，a：0～156.0kev，b：4.0kev～156.0kev；选择核素14c；淬灭方法tsie/aec；淬灭标准14c-ug；计数时间90min。

本发明还提供了一种应用液体闪烁计数仪测定酒用香料冰乙酸天然度的方法在酒用香料中的应用。

优选地，本发明中所述酒用香料包括乙酸乙酯、己酸、己酸乙酯、乳酸乙酯、丁酸和丁酸乙酯。

本发明的液体闪烁计数法是一种放射性碳定年技术，是依赖于放射性核素发射的β粒子与由闪烁液中的一个构成成分闪烁体之间的相互作用，该闪烁体将来自放射性核素的电离辐射转化为光电子的输出(闪烁过程)，使用液体闪烁计数仪检测每个样品中的c-14每分钟计数cpm。液体闪烁计数法分析时间短，简单便捷，结果的准确度高，对操作人员技术水平要求低，易于推广。

附图说明

图1是实施例1中冰乙酸的天然度与cpm数值的线性关系图；

图2是实施例1中一周后冰乙酸的天然度与cpm数值的线性关系图；

图3是实施例2中乙酸乙酯的天然度与cpm数值的线性关系图。

具体实施方式

实施例1

本实施例的一种应用液体闪烁计数仪测定酒用香料冰乙酸天然度的方法，包含以下步骤：

(1)使用美国beta实验室检测天然度为100％的冰乙酸标准品，批号分别为f170315003与f16046008，使用分析纯试剂冰乙酸进行稀释，按照下表1配制成天然度水平为0％、20％、25％、50％、100％的不同冰乙酸标准样品；

表1

(2)取10ml酒用香料样品溶液置于闪烁瓶中，并向闪烁瓶中加入10ml闪烁液，充分摇匀后得到待测样品；将步骤(1)中配制的不同天然度水平的冰乙酸标准样品分别置于9个闪烁瓶中，再分别加入10ml闪烁液，充分摇匀后得到冰乙酸标准样品。

(3)使用液体闪烁计数仪对混匀后的冰乙酸标准样品中的c-14进行计数，液体闪烁计数仪的计数条件为，能量范围(kevenergyregions)，a：0～156.0kev，b：4.0kev～156.0kev；选择核素14c；淬灭方法tsie/aec；淬灭标准14c-ug；计数时间90min，得到的结果如下表2。

表2

(4)将表2中得到的冰乙酸的天然度与cpm数值建立线性关系，得到的线性关系图，参见附图1。

从图1可以看出，乙酸的计数值cpm与其天然度之间的线性关系良好，相关系数r²为0.9999，满足其天然度的检测要求。

为了考察线性关系的稳定性，一周后对乙酸的计数值cpm进行了测量，并重新建立线性关系，得到的线性关系图参见附图2。

从图2可以看出，一周后乙酸的计数值cpm与其天然度之间的线性关系良好，相关系数r²为0.9994，稳定性较好。

(5)将待测样品使用液体闪烁计数仪进行测量cpm值，得到的实验结果见下表3。

表3

从表3的结果可以看出，本次待测样品中乙酸20171010的天然度最高为95％，适合用作酒用香料。

为验证试验结果的准确性，我们还进行了精密度试验和重复性试验，选取酒用香料的批号为flyl170626001和flyl170803003两批样品进行测试，每批样品同时进行6个平行试验，试验结果见下表4。

表4

并于24h后对上述两个批次的样品又进行了测定，结果如下表5。

表5

从上表4和表5可以看出，检测结果的重复性较好；批号为乙酸flyl170626001的样品，由于cpm值较低，导致相对标准偏差较大；而批号为乙酸flyl170803003的样品，cpm值较高，相对标准偏差rsd％<5％，表明检测结果的精密度很好。隔天对相同样品进行测定cpm值，结果显示其精密度也较好。

实施例2

本实施例的一种应用液体闪烁计数仪测定酒用香料乙酸乙酯天然度的方法，包含以下步骤：

(1)使用美国beta实验室检测天然度为50％的乙酸乙酯标准品，批号分别为f17055004与f15095014，使用分析纯试剂乙酸乙酯进行稀释，按照下表6配制成天然度水平为0％、10％、20％、25％、50％的不同乙酸乙酯标准样品。

表6

(2)取10ml酒用香料样品溶液置于闪烁瓶中，并向闪烁瓶中加入10ml闪烁液，充分摇匀后得到待测样品；将步骤(1)中配制的不同天然度水平的乙酸乙酯标准样品分别置于9个闪烁瓶中，再分别加入10ml闪烁液，充分摇匀后得到乙酸乙酯标准样品。

(3)使用液体闪烁计数仪对混匀后的乙酸乙酯标准样品中的c-14进行计数，液体闪烁计数仪的计数条件为，能量范围(kevenergyregions)，a：0～156.0kev，b：4.0kev～156.0kev；选择核素14c；淬灭方法tsie/aec；淬灭标准14c-ug；计数时间90min，得到的结果如下表7。

表7

(4)将表7中得到的乙酸乙酯的天然度与cpm数值建立线性关系，得到的线性关系图，参见附图3。

从图3可以看出，乙酸乙酯的计数值cpm与其天然度之间的线性关系良好，相关系数r²为0.9935，满足其天然度的检测要求。

(5)将待测样品使用液体闪烁计数仪进行测量cpm值，得到的实验结果见下表8。

表8

从表8的结果可以看出，本次待测样品中乙酸乙酯bjyl171117002的天然度最高为59％。