含有机和无机基质的样品中的微塑料的提取及测定方法与流程

文档序号:23100339发布日期:2020-11-27 13:07阅读:321来源:国知局
说明书本发明涉及一种用于从有机和无机基质中提取微塑料并确定其数量和质量的方法。更具体地讲,本发明提供了一种用于提取、鉴定和定量有机和无机基质样品中的聚乙烯、超高分子量聚乙烯(uhmwpe)、聚碳酸酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯(pet)和聚氯乙烯(pvc)微塑料的方法。对微塑料的研究和分析在医学领域和与环境有关的问题方面都具有重要意义。截至今天,微塑料对全身水平的影响,例如对心脏循环系统的影响,以及它们在神经退行性疾病和赘生性疾病发作中所起的作用,都是未知的。相反,从临床观点来看,与医疗设备磨损有关的问题是已知的。例如,金属-聚乙烯和陶瓷-聚乙烯关节置换术被广泛用于假体置换,从生物力学的角度来看,其效果极佳。研究了由聚乙烯磨损产生的碎片对关节水平的影响,假体部件的磨损状态与由对异物的慢性炎症反应触发的假体周围骨的骨质溶解似乎存在相关性(choudhury等人,2018)。已知,由超高分子量聚乙烯的磨损引起的骨质溶解是这样的过程,由假体关节表面机械释放的假体碎片诱导免疫反应,该免疫反应促进骨分解代谢,假体随之松动并且有潜在的断裂或破裂。kandahariam等人(2016)描述了一种专门针对巨噬细胞的正电子发射断层扫描的成像模块,其在疾病的早期诊断和治疗定位方面很有前景。然而,该系统复杂且昂贵,并且仅适用于医学领域。armstrongbl等人(2012)描述了用于测定从可植入医疗设备分解的低含量组分的搅拌棒吸附萃取(sbse)联合gc-ms/ms;该方法描述了多种检测方法,这些方法通过测定源自骨科膝关节插入物的超高分子量聚乙烯中的降解产物来进行确认。然而,所用的色谱方法不同于本发明中描述的方法,并且应用更加复杂。测定聚乙烯颗粒的其他方法在文献中有描述,如基于pokorny等人(2006)描述的“光散射”原理对颗粒进行计数的方法,该方法在全髋关节置换术中专门应用于假体周围组织。该方法成本很高,并且样品的制备可重现性不太高。sosna等人(2003)描述了一种用于鉴定组织中的聚乙烯颗粒并且在有机结构完全溶解在硝酸中之后使聚乙烯颗粒可视化的方法。该方法使用特定的过滤器,成本很高,而且可重现性不太高。narayan(2015)描述了一种用于定量经抗氧化剂稳定的超高分子量聚乙烯的方法。更具体地讲,uhmwpe(超高分子量聚乙烯)颗粒应用ftir(傅立叶变换红外)光谱法和uv-vis进行定量。通过对pbhp的γ辐照产生的化学副产物可通过使用气相色谱法联合质谱法,然后进行第二阶段质谱法(gc-ms/ms)进行鉴定。narayan(2015)提出的方法与本发明在本文中描述的方法不同,因为它需要使用添加了α-生育酚的聚乙烯,并且基于其他检测技术的使用。最后,vesely等人(2012)描述了用于测定小于一毫克的源自超高分子量聚乙烯磨损的颗粒的比色法。这些方法是基于牛血清白蛋白与荧光素或油红o疏水性着色剂的不可逆连接而造成的颗粒磨损。引起极大科学关注的是当前所有环境和食品基质中包括uhmwpe颗粒在内的微塑料污染问题,微塑料污染问题正无法补救地改变着生物系统和食物链,从最简单的到最复杂的,并且缺乏关于在动物和人类中长期暴露的影响的科学信息(wright等人,2017)。而且,专利文件cn102353618a描述了一种用于测定超高分子量聚乙烯(uhmwpe)的重量分布质量的方法;该专利参考了一组用于比较和评价uhmwpe的分子分布的方法,考虑到了对粘度和溶解度的依赖性。鉴于这里到目前为止所考虑到的内容,因此它构成了本发明的范围以提供一种用于提取、鉴定和定量有机和无机基质样品中属于下组的微塑料的方法,所述组包括聚乙烯、超高分子量聚乙烯(uhmwpe)、聚碳酸酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯(pet)、聚氯乙烯(pvc)、它们的混合物和副产物。本发明提供了一种方法,该方法基于样品的酸消解,用定义为液-液的常规方法提取微塑料以及随后通过扫描电子显微镜(sem)结合x射线微量分析进行鉴定和定量。本发明提供了一种用于定量微塑料颗粒的方法,所述微塑料颗粒的直径小于500微米,优选小于100微米,甚至更优选直径在1至5微米之间,因此受到文献中通常报告的10微米的限制。本发明的另一个范围是提供一种不使用特定过滤方法和/或成本很高的聚乙烯过滤器的方法,该方法适用于各种有机和无机基质,并且其中样品的制备与其他已知的最先进的方法相比成本低得多。实际上,本方法提供了在市场上易于找到的廉价玻璃器皿和溶剂的使用。而且,该方法使制备时期样品的污染以及分析时期仪器反应的干扰最小化,这是因为永远不会使用聚碳酸酯或化学组成类似于或等同于所讨论的微塑料颗粒的化学组成的物质中的过滤器。在所附的后续权利要求中描述了本发明的其他方面,包括实施方案以及对有机和无机基质的应用。上述权利要求应理解为已包括在本文中。在下面的详细描述中,参考所附图表,本发明更加明显,所附图表说明了用于提取和测定含有机和无机基质的样品中的微塑料的方法的实施方案,其中:图1是本发明方法的基本阶段的方框图;图2是微塑料标准样品或参考材料的sem图像;图3是通过专用microplast软件对聚乙烯颗粒进行定量分析的结果的截屏;图4是通过专用microplast软件对聚乙烯颗粒进行定量分析的结果的另一截屏;图5是通过专用microplast软件对聚乙烯颗粒进行定量分析的结果的另一截屏;图6是提取并分散在载物台(stub)上的“病例”的滑液(sinovia)的sem图像,其可视化了尺寸为600x450μm且平均碳含量等于98.4%的聚乙烯颗粒;图7是提取并分散在载物台(stub)上的“病例”的滑液(sinovia)的sem图像,其可视化了尺寸为5x5μm且平均碳含量等于94.0%的聚乙烯颗粒;图8是“对照”的滑液样品的sem图像。明显不存在聚乙烯颗粒;图9是提取并分散在载物台上的“病例”的组织样品的sem图像,其可视化了一组最大尺寸为5x15μm的颗粒;图10是提取并分散在载物台上的“对照”的组织样品的sem图像。明显不存在聚乙烯颗粒。下面是对示例性实现形式的描述,并且因此不限于对用于提取和测定含有机和无机基质的样品中的微塑料的方法的描述。具体实施方式参考图1,用于提取和测定含有机和无机基质的样品中的微塑料的方法包括以下基本阶段:a)采样和预处理,b)所述样品的酸消解,c)在液相期间对微塑料的提取,d)所述微塑料的鉴定和定量。本发明固有的方法适用于提取和测定有机物和有机基质样品中属于下组的微塑料,该组包括:聚乙烯、超高分子量聚乙烯(uhmwpe)、聚碳酸酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯(pet)和聚氯乙烯(pvc)。所述微塑料的尺寸小于500μm,更具体地尺寸小于100μm,甚至更具体地尺寸在1至5μm之间。在本发明固有的方法的处理中,如果未另外说明,则任何样品都将被隐式地认为是一克或一毫升。所述采样阶段提供对具有含水基体的样品或有机基质的样品的选择,所述样品包括下组:人、植物和动物的生物组织和液体,药物,化妆品,食物,矿泉水,旨在供人消耗的水,地下水,地表水,海水,来自游泳池和水产养殖设施的水,城市和工业用水,以及污水,液体废弃物。可替代地,所述采样阶段提供对空气传播的样品或土壤样品的选择。方便地,含有机或无机基质的样品的所述酸消解状态或矿化提供用强酸与上述样品以1:1m/v或v/v的比率进行处理,在60℃的温度下持续至少24小时。所述强酸选自包括盐酸、硝酸和硫酸的组。微塑料的所述提取阶段包括以下时期:1.将一等分试样的超纯水与经强酸处理的所述样品以1:3m/v或v/v的比率混合,以获得液体混合物;2.将第一等分试样的非极性卤化溶剂与所述液体混合物以1:3m/v或v/v的比率混合,以获得非均质液体混合物;3.搅拌所述非均质液体混合物30秒,并以4000rpm将其离心15分钟以获得两个级分:a和b,其中级分a是含水的而级分b是有机的;4.将所述含水级分a与所述有机级分b分离;5.将第二等分试样的非极性卤化溶剂添加到所述含水级分a中以获得第二非均质混合物;6.搅拌所述第二非均质液体混合物30秒,并以4000rpm将其离心15分钟以获得两个液相:c和d,其中级分c是含水的而级分d是有机的;7.将所述有机级分b和d再合并,然后在70℃的温度下蒸发至干,以获得微塑料提取物;8.将所述微塑料提取物悬浮在体积介于100至500微升之间的乙腈中。所述非极性卤化溶剂选自包括二氯甲烷(dcm)和氯仿的组。在提取阶段的时期3和6进行的搅拌方便地通过涡旋进行,持续30秒。所述微塑料的鉴定和定量阶段提供了将悬浮在乙腈中的所述微塑料提取物转移到金属载体上,优选地是直径为25mm的扫描电子显微镜铝制载物台(sem样本载物台),注意使提取物分布到载物台的整个表面上。在载物台表面明显饱和的情况下,增加乙腈的体积并且使用更多的载物台。然后,必须等待乙腈蒸发,注意不要使载物台翻倒,防止颗粒滑落或改变其分散度。最后,将载物台用金进行金属化,然后插入sem样品定位室中,以通过电子显微镜术联合能量色散x射线,更具体地讲是通过扫描电子显微镜(sem)联合能量色散x射线分析(edx)对微塑料进行连续鉴定和定量。微塑料的鉴定和定量在载物台内1mm2的总读数区域中进行,该读数区域对应于1500倍放大的总共228个视野。方便地,在有大量颗粒的情况下减少视野数量。微塑料的鉴定和定量阶段需要微量分析采集时期(或颗粒的读取和鉴定)以及测量和计数时期(或测定颗粒尺寸和计数)。微量分析采集时期提供了对仅由碳构成的微塑料化学结构的检验。更具体地讲,它在不区分位置的情况下提供了对观察视野范围内任何尺寸和形式的微塑料的测定和计数,从而测量了每种微塑料颗粒的长度和宽度(图6-图10)。方便地,每种微塑料颗粒的长度和宽度的每个测量值都在电子格式的计算表中进行报告,该计算表是专门为应用用于提取和测定含有机和无机基质的样品中的微塑料的方法而创建的,(microplast软件,其示例性截屏可在图3-图5中找到)。所述软件自动计算微塑料的浓度,根据所计数的微塑料的变化的数量和尺寸并针对其他参数的值(包括所分析的样品的量、载物台的直径等)实时更新结果。而且,会自动估算样品中所含微塑料的总重量:每种颗粒的平均半径;体积,将其视为规则球体,最后是颗粒的重量,考虑到了微塑料的平均密度。方便地,含有机和无机基质的样品中的微塑料的测定以每克(或每毫升)的样品和每立方米的空气中的颗粒数量表示,两者均以每克(或毫升)的样品或每立方米的空气中的微塑料的微克数表示。方便地,与测定含有机和无机基质的样品中的微塑料相关的扩展不确定度以置信区间(最小值和最大值)表示。在测量块状样品中聚乙烯浓度c时的实验误差的评估基本上是由于两个因素:假设载物台上的颗粒具有偶然泊松分布,对载物台读取期间n个颗粒的采样统计,以及样品中所含颗粒的粒度谱的宽度,从而因采用仅基于所鉴定的n个颗粒计算的平均值作为整个样品内的颗粒的平均重量pm而产生误差。因此,可以使用以下关系式来评估浓度的实验误差(或读数误差):其中对应于与所鉴定的n个颗粒的平均重量pm相关的相对误差,并且是与所计数的n个颗粒相关的相对误差。假设所计数的n个颗粒具有泊松分布,则关系式也可以表示为而鉴定出的n个颗粒pi的平均重量pm的相对误差可以使用标准误差表示。因此,前一关系式变为或基于以下关系式,为了获得对总不确定度更准确的评估,考虑源于样品制备程序中的不确定度的作用被认为是有用的,该样品制备程序需要研磨/掺混、称重、提取和分散在载物台上的时期。所得关系式如下:或其中up是与所鉴定的n个颗粒的平均重量pm相关的不确定度un是与所计数的n个颗粒相关的不确定度并且upr是源于制备的不确定度的作用。方便地,软件自动计算up和un。操作员可以通过执行n次重复性测试并计算标准偏差来估计不确定度upr。最后,必须在软件的特定单元格中插入upr。在第一个实施方案中,本发明的方法提供了从具有含水基体的样品和/或有机基质的样品中提取微塑料,所述样品属于包括以下各项的组:人、植物和动物的生物组织和液体,药物,化妆品,食物,矿泉水,旨在供人消耗的水,地下水,地表水,海水,来自游泳池和水产养殖设施的水,城市和工业用水,以及污水,液体废弃物。具有含水基体和/或有机基质的所述样品可以在自然条件下找到或预先冻干。根据已知最先进的方法对上述具有含水基体和/或有机基质的样品进行采样。方便地,将上述具有含水基体和/或有机基质的样品通过研磨和/或掺混进行预处理,预处理的持续时间取决于样品的硬度,以获得均质样品,然后进行称重。将一等分试样的样品转移到玻璃试管中-玻璃试管优选体积为16ml,高100mm,带有锥形底,直径为16mm的磨细颈部和玻璃塞-并且添加1:1m/v或v/v比率的一等分试样的强酸进行酸消解,或矿化,在60℃的温度下持续至少24小时。在该第一实施方案中,强酸是37%的硝酸。在密闭容器或敞口容器中使用矿化器进行矿化的持续时间可少于24小时。矿化过程的成功使得可以获得某种程度上透明的液体。上述酸消解阶段使得可以通过氧化过程破坏样品的所有有机级分并增加无机盐的溶解度,否则无机盐以晶体形式(也为无定形形式)存在,这可以代表在微塑料的鉴定和定量阶段中造成混淆的一个因素。相继将矿化样品进行液相微塑料提取阶段,如先前在时期1-8中所述。如先前所述,进行微塑料的鉴定和定量阶段。在第二个实施方案中,本发明的方法提供了从取自室内和室外的居住和工作环境的空气样品中的微塑料的提取和测定。本发明提出的方法的采样和预处理阶段提供了直径为25mm且孔隙度为至少0.8μm的混合纤维素酯过滤膜的使用。所用的过滤器支架仅由金属(铝或钢)制成,并且为开放式的,带有也是由金属制成的圆柱形罩,该圆柱形罩在过滤器前面延伸30mm至50mm,并且允许暴露直径为至少20mm的圆形区域。空气传播的微塑料的采样阶段可以使用两种不同的方法进行:个人方法和环境方法。“个人”方法使用具有良好容量的样品以补偿负载损失,以便即使在尘土飞扬的条件下也能获得样品,从而使得可以在整个采样持续期间保持最初样品的至少10%的容量。方便地,将过滤器支架固定在气道附近的区域中,开口朝下。抽吸流量设置为1至5l/min,优选2至3l/min。“环境”方法使用三脚架将过滤器支架定位在距地面150cm的高度,且罩朝下;所连接的样品是环境类型的,具有18至25l/min的恒定的高抽吸流量。采样时间取决于抽吸流量,需要的最小抽吸空气体积不少于3000升。方便地,可以将过滤器插入特殊的级分收集器中,以便仅对直径小于10微米或小于2.5微米的颗粒进行采样。每个采样过滤器都置于玻璃或金属盒内;然后将这些盒置于密封容器内,以避免产生冲击并防止灰尘或其他颗粒污染过滤器的可能性。在对样品进行酸消解之前,对上述过滤器进行预处理。另一个优点是上述过滤器可以通过金属制成的合适装置分割,然后分割地放置在高度为100mm的16ml透明玻璃试管中,该玻璃试管带有锥形底,直径为16mm的磨细颈部和玻璃塞。然后,该过程提供了以下阶段:样品的酸消解,液相中微塑料的提取,通过扫描电子显微镜结合能量色散x射线分析(sem-edx)进行微塑料的鉴定和定量,如上所述。在第三个实施方案中,本发明中描述的方法提供了从土壤样品中微塑料的提取和测定。将上述来自土壤样品的微塑料进行预处理,预处理包括以下时期:-用带有10mm金属网的筛子进行筛分-将过筛样品转移到透明玻璃试管中,-用强酸与上述样品以1:1m/v或v/v的比率进行酸消解,在60℃的温度下持续至少24小时,-用1m氢氧化钠中和样品,-通过孔隙度为10μm或100μm的混合纤维素酯过滤膜进行真空过滤。本发明固有的方法要求在第三实施方案中,从酸消解开始,连续提取微塑料的时期遵循本发明第一实施方案所述的相同方法。可以通过举例而非限制本发明的方式考虑以下实施例。实施例1举例来说,以下是用于提取和测定含有机和无机基质的样品中的微塑料的方法的潜在实验应用,用于测定源于假体周围组织和滑液中关节置换术的磨损的聚乙烯微粒。在各种类型的聚乙烯中,骨科中应用的聚乙烯是超高分子量聚乙烯(密度为0.96g/cm3的uhmwpe),因为它具有最佳的机械性能。应用本发明固有的方法的目的是确定髋关节置换患者的滑液和假体周围组织中聚乙烯颗粒的存在,假设髋臼插入物机械磨损后这些颗粒可能释放。因此,从接收干预以修正髋关节置换的患者(case)获得假体周围组织的术中样品和滑液样品。并行地,分析了从接收首次髋关节置换干预的受试者获取相同样品(对照)。同时,进行了一项试验以评估结构上相似而无聚乙烯污染的生物基质(动物肌肉)的回收率,该生物基质先前用通过粉碎髋臼插入物(标准品或也称为参考材料)而获得的聚乙烯微粒强化。将各1克的样品等分试样转移到高度为100mm的16ml透明玻璃试管中,该玻璃试管带有锥形底,直径为16mm的磨细颈部和玻璃塞。然后将1毫升37%的硝酸添加到样品中,并将其在60℃的温度下静置24小时,以使得能够如本发明固有的方法中所述的那样发生化学矿化。然后将3ml超纯水和3ml二氯甲烷(dcm)添加到矿化样品中。然后,使用高速涡旋混合器将非均质混合物有效搅拌约30秒。此时,用带有可移动接收器和角式转子的台式离心机以4000rpm将样品离心15分钟。相继地,将更多的水相转移到新的试管中,该试管具有与上述那些相同的特征。再添加另外3ml二氯甲烷(dcm)之后,再次通过涡旋搅拌溶液,并用相同的离心机以4000rpm再离心15分钟。去除水相,并将有机相与前者合并。使每份样品的提取物蒸发至干,仅通过用设为70℃的板加热来促进该过程。相继地,将干燥的残留物与100微升的乙腈混合。然后,在使用巴斯德吸管(pasteurpipette)吸移多次以利于颗粒分散之后,将每份样品的悬浮液转移到25mm的扫描电子显微镜专用铝制载物台(sem样本载物台)上,努力使溶液分布在载物台的整个表面上。使溶剂蒸发后,用金将残留物金属化并插入sem的样品定位室中。更具体地,使用了cambridgestereoscan360的扫描电子显微镜(sem)。通过重复两次萃取和分析用0.2毫克微粉化聚乙烯加强的白色基质进行上述回收测试,使得鉴定直径在2至25μm之间变化的颗粒成为可能。微量分析突出显示,所研究的颗粒的化学结构平均由92.5%的碳组成。其余百分比仅由铝和铜组成,或由构成金属载体(载物台)的元素组成,提取的颗粒分散在该金属载体上(图2和表1)。表1.图2中通过微量分析检查的颗粒的化学组成通过microplast软件进行的定量分析(图3和图4)使得计算颗粒的平均直径(分别等于4.52μm和4.37μm)成为可能。两个复型样品的浓度分别等于268μg/g和218μg/g。计算出的平均回收率等于121.5%。对非强化基质的定量分析(图5)使得确定该过程中的低污染度成为可能。浓度等于2.81μg/g。滑液(sinovia)的结果本发明固有的方法对“病例”和“对照”样品的应用突出显示了相对于“病例”的滑液与相对于“对照”的滑液之间的显著差异。对“病例”滑液提取物的连续sem分析突出显示,存在直径在几微米(大约1-10μm)到三毫米之间变化的聚乙烯颗粒。颗粒全部呈现出与标准品相似的形态特征,如边缘的不规则曲率和明显紧凑的结构。微量分析的结果突出显示,化学组成几乎完全由碳组成,平均百分比为95.1%。其余百分比仅由铝和铜组成,或由构成金属载体(载物台)的元素组成,提取的颗粒分散在该金属载体上。发现了少量的微量元素(如k、na、ca、cl)(图6-图7、表2-表3)。表2.图6中颗粒的化学组成百分比表3.图7中颗粒的化学组成百分比相对于“对照”,滑液样品未突出显示存在聚乙烯颗粒,证明本发明固有方法的有效性和效率。必须指出,在对照的滑液样品中怎么找不到聚乙烯颗粒。在载物台的三个不同点进行的微量分析发现,铝是最丰富的化学元素(图8和表4)。因此,本发明仅对鉴定和定量阳性样品中的聚乙烯有效并且有区别。表4.图8中对照的化学组成百分比组织样品的结果本发明固有的方法对“病例”和“对照”样品的应用突出显示了相对于“病例”的组织与相对于“对照”的组织之间的显著差异。对“病例”的组织应用本发明之后进行的sem分析突出显示存在尺寸远小于在“病例”滑液中发现的聚乙烯(直径为0.8μm至7μm)的聚乙烯颗粒。所分析的颗粒全部呈现出标准品和在“病例”滑液中发现的微粒的形态相似性,如边缘的不规则曲率和明显紧凑的结构。微量分析的结果突出显示,化学组成几乎完全由碳组成,平均百分比为80.1%。其余百分比仅由铝和铜组成,或由构成金属载体(载物台)的元素组成,提取的颗粒分散在该金属载体上。发现了少量的微量元素(如k、na、ca、cl)(图9和表5)。表5.图9中颗粒的化学组成百分比突出显示了在对照的组织样品中怎么找不到聚乙烯颗粒。在载物台的三个不同点进行的微量分析发现,铝是最丰富的化学元素(图10和表6)。该结果突出显示了本发明的区别性效果,并且指出不会产生相同的假阳性和假阴性,这是在药物、法医、食品、医学/生物医学应用以及所有其他类型供商业或环境使用的样品的质量控制的基本特征。表6.图10中对照的化学组成百分比本发明的目的易于进行多种修改和变型,全部在所附权利要求中表述的发明构思的相同构思下。在不脱离本发明的保护范围的情况下,所有部分都可以用其他技术上等效的要素替换,并且材料可以根据需要而不同。尽管特别参考附图描述了目的,但是说明书和权利要求书中使用的参考编号用于更好地理解本发明,而不构成对所公开的保护范围的任何限制。引用的参考文献-kandahariam,yangx,larocheka,digheas,pand2,cuiq;areviewofuhmwpewear-inducedosteolysis:theroleforearlydetectionoftheimmuneresponse(uhmwpe磨损引起的骨质溶解的综述:免疫反应早期检测的作用);boneres.(骨吸收)2016年7月12日;4:16014.doi:10.1038/boneres.2016.14.ecollection2016.-choudhuryd,flemingra,vrbkam,i,teetermg,gossj,zoum.mechanicalwearandoxidativedegradationanalysisofretrievedultra-highmolecularweightpolyethyleneacetabularcups(对回收的超高分子量聚乙烯髋臼杯的机械磨损和氧化降解分析).jmechbehavbiomedmater.(生物医学材料力学行为杂志)2018年3月;79:314-323.doi:10.1016/j.jmbbm.2018.01.003).-armstrongbl,senyurtaf,narayanv,wangx,alquierl,vasg.,stirbarsorptiveextractioncombinedwithgc-ms/msfordeterminationoflowlevelleachablecomponentsfromimplantablemedicaldevices(搅拌棒吸附萃取结合gc-ms/ms用于测定可植入医疗设备中低水平浸出组分),jpharmbiomedanal.(药学与生物医学分析杂志)2013年2月23日;74:162-70.doi:10.1016/j.jpba.2012.10.019.电子出版日期2012年10月22日.d,sloufm,horákz,jahodad,entlicherg,eklovás,sosnaa.,methodforassessmentofdistributionofuhmwpewearparticlesinperiprosthetictissuesintotalhiparthroplasty(用于评估在全髋关节置换术中uhmwpe磨损颗粒在假体周围组织中的分布的方法),actachirorthoptraumatolcech.(骨科及盲肠创伤学报)2006年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