1.一种用于确定样品中分析物的量的方法,包括以下步骤:
(a)提供多个已知浓度的分析物样品;
(b)提供分析物捕获分子和检测分子,所述分析物捕获分子和检测分子均适合与分析物结合,其中检测分子包括用于识别与分析物的反应的信号传输装置;
(c)将分析物样品与分析物捕获分子和检测分子混合,以形成分析物-捕获分子-检测分子复合物;
(d)检测分析物与检测分子反应所产生的信号;
(e)将数学变换函数应用于检测信号;
(f)使用计算机对分析物浓度与步骤(e)的变换检测信号的双相标准曲线进行数学建模,使用以下方程:
其中f是数学变换函数,其放大了测定范围内相对于较高浓度的较低浓度的信号值;
y是在分析物浓度下产生的信号[l];
bmax1是由较高亲和力的分析物-捕获分子相互作用产生的最大信号;
kd1是较高亲和力的分析物-捕获分子相互作用的解离常数;
bmax2是由较低亲和力的分析物-捕获分子相互作用产生的最大信号;和
kd2是较低亲和力的分析物-捕获分子相互作用的解离常数;
(g)提供未知浓度的分析物样品;
(h)提供分析物捕获分子和检测分子,所述分析物捕获分子和检测分子均适合与所述分析物结合,其中所述检测分子包括用于识别与所述分析物的反应的信号装置;
(i)将分析物样品与分析物捕获分子和检测分子混合,以形成分析物-捕获分子-检测分子复合物;
(j)检测分析物与检测分子反应所产生的信号;
(k)将数学变换函数应用于步骤(iv)的检测信号;和
(l)通过使用步骤(f)中生成的双相标准曲线,将步骤(k)的变换检测信号与分析物浓度相关联,确定样品中分析物的量。
2.根据权利要求1所述的用于确定样品中分析物的量的方法,其中步骤(f)中的方程还包括与分析物浓度为零时的背景信号传输bkd相关的项:
3.根据权利要求1所述的用于确定样品中分析物的量的方法,其中步骤(f)中的方程还包括与非特异性信号传输ns相关的项f(ns×[l]),其随分析物浓度而变化:
4.根据权利要求1所述的用于确定样品中分析物的量的方法,其中步骤(f)中的方程还包括与分析物浓度为零时的背景信号传输bkd相关的项,以及与非特异性信号传输ns相关的项f(ns×[l]),其随分析物浓度而变化:
5.根据前述权利要求中任一项所述的用于确定样品中分析物的量的方法,其中在步骤(f)中应用于信号结果的变换函数f选自包括以下的组:lognx、lnx、asinh(x)、和
6.根据前述权利要求中任一项所述的用于确定样品中分析物的量的方法,其中步骤(a)中已知浓度的样品的数量至少为六个。
7.根据前述权利要求中任一项所述的用于确定样品中分析物的量的方法,其中所述检测分子的信号传输装置选包括以下的组:生色标记、化学发光标记、荧光标记、磷光标记、生物发光标记、电化学发光标记、晶体发光标记、白炽标记或辐射标记。
8.根据前述权利要求中任一项所述的用于确定样品中分析物的量的方法,其中在步骤(d)和(j)中使用选自包括以下的组的设备检测信号:x射线检测器,α、β和γ辐射探测器,ccd照相机成像设备,cmos照相机成像设备,磷光成像仪,荧光计,流式细胞仪,时间分辨荧光光谱仪,荧光偏振分析仪,定量聚合链反应指示仪和分光光度计。
9.根据前述权利要求中任一项所述的用于确定样品中分析物的量的方法,其中所述测定是免疫测定。
10.一种用于对测定的校准数据建模的方法,包括以下步骤:
(a)提供多个已知浓度的分析物样品;
(b)提供分析物捕获分子和检测分子,所述分析物捕获分子和检测分子均适合与分析物结合,其中检测分子包括用于识别与分析物的反应的信号传输装置;
(c)将分析物样品与分析物捕获分子和检测分子混合,以形成分析物-捕获分子-检测分子复合物;
(d)检测分析物与检测分子反应所产生的信号;
(e)将数学变换函数应用于检测信号;
(f)使用计算机对分析物浓度与步骤(e)的变换检测信号的双相标准曲线进行数学建模,使用以下方程:
其中f是数学变换函数,其放大了测定范围内相对于较高浓度的较低浓度的信号值;
y是在分析物浓度下产生的信号[l];
bmax1是由较高亲和力的分析物-捕获分子相互作用产生的最大信号;
kd1是较高亲和力的分析物-捕获分子相互作用的解离常数;
bmax2是由较低亲和力的分析物-捕获分子相互作用产生的最大信号;和
kd2是较低亲和力的分析物-捕获分子相互作用的解离常数。
11.根据权利要求10所述的用于对测定的校准数据建模的方法,其中步骤(f)中的方程还包括与分析物浓度为零时的背景信号传输bkd相关的项:
12.根据权利要求10所述的用于对测定的校准数据建模的方法,其中步骤(f)中的方程还包括与非特异性信号传输ns有关的项f(ns×[l]),其随分析物浓度而变化:
13.根据权利要求10所述的用于对测定的校准数据建模的方法,其中步骤(f)中的方程还包括与分析物浓度为零时的背景信号传输bkd相关的项和与非特异性信号传输ns相关的项f(ns×[l]),其随分析物浓度而变化:
14.根据权利要求10至13中任一项所述的用于对测定的校准数据建模的方法,其中应用于步骤(f)中的信号结果的变换函数f选自包括以下的组:lognx、lnx、asinh(x)、和
其中x=要变换的信号结果,n介于2和100之间。
15.一种编程为对分析物浓度与变换检测信号的双相标准曲线进行数学建模的计算机,其使用以下方程:
其中f是数学变换函数,其放大了测定范围内相对于较高浓度的较低浓度的信号值;
y是在分析物浓度下产生的信号[l];
bmax1是由较高亲和力的分析物-捕获分子相互作用产生的最大信号;
kd1是较高亲和力的分析物-捕获分子相互作用的解离常数;
bmax2是由较低亲和力的分析物-捕获分子相互作用产生的最大信号;和
kd2是较低亲和力分析物-捕获分子相互作用的解离常数。
16.根据权利要求15所述的编程为对分析物浓度与变换检测信号的双相标准曲线进行数学建模的计算机,其中所述方程还包括与分析物浓度为零时的背景信号传输bkd相关的项:
17.根据权利要求15所述的编程为对分析物浓度与变换检测信号的双相标准曲线进行数学建模的计算机,其中所述方程还包括与非特异性信号传输ns相关的项f(ns×[l]),其随分析物浓度而变化:
18.根据权利要求15所述的编程为对分析物浓度与变换检测信号的双相标准曲线进行数学建模的计算机,其中所述方程还包括与分析物浓度为零时的背景信号传输bkd相关的项,以及与非特异性信号传输ns相关的项f(ns×[l]),其随分析物浓度而变化:
19.根据权利要求15至18中任一项所述的编程为对分析物浓度与变换检测信号的双相标准曲线进行数学建模的计算机,其中应用于信号结果的变换函数f选自包括以下的组:lognx、lnx、asinh(x)、和
其中x=要变换的信号结果,n介于2和100之间。
20.一种用于确定样品中分析物的量的部件盒,包括:
至少一种测定基底,其涂有适合与分析物结合的分析物捕获分子;
至少一种检测分子,其适合与分析物结合,所述检测分子包括信号传输装置以识别与分析物的反应;和
一组用于对测定的校准数据建模的指令,包括以下步骤:
(i)将多个已知浓度的分析物样品添加到测定基底中,分析物的每个样品独立测定;
(ii)将检测分子添加到测定基底中;
(iii)检测由每个分析物样品与检测分子反应产生的信号;
(iv)将数学变换函数应用于检测信号;和
(v)使用计算机对分析物浓度与步骤(e)的变换检测信号的双相标准曲线进行数学建模,使用以下方程:
其中f是数学变换函数,其放大了测定范围内相对于较高浓度的较低浓度的信号值;
y是在分析物浓度下产生的信号[l];
bmax1是由较高亲和力的分析物-捕获分子相互作用产生的最大信号;
kd1是较高亲和力的分析物-捕获分子相互作用的解离常数;
bmax2是由较低亲和力的分析物-捕获分子相互作用产生的最大信号;和
kd2是较低亲和力的分析物-捕获分子相互作用的解离常数。
21.根据权利要求20所述的部件盒,其中所述至少一种测定基底是多孔板。
22.根据权利要求20所述的部件盒,其中所述至少一种测定基底是颗粒或珠子。
23.根据权利要求20至22中任一项所述的部件盒,还包括至少一个校准分析物样品。