一种注射用艾司奥美拉唑钠有关物质检测方法与流程

[0001]
本发明属于药物检测领域，具体涉及一种注射用艾司奥美拉唑钠有关物质检测方法。


背景技术：

[0002]
艾司奥美拉唑钠(曾用名：埃索美拉唑钠)属质子泵抑制剂，质子泵抑制剂(ppi)是治疗消化性溃疡、胃食管反流病等酸相关疾病的首选药物，目前临床上常用的ppi有奥美拉唑、兰索拉唑、雷贝拉唑、泮托拉唑和埃索美拉唑5种，奥美拉唑作为第一种ppi药物，其治疗酸相关疾病的疗效得到了一致认可，埃索美拉唑是奥美拉唑的s-异构体，通过特异性的靶向作用机制减少胃酸分泌，为壁细胞中质子泵的特异性抑制剂，相比于奥美拉唑具有更高的生物利用度和更一致的药代动力学，在控制胃酸方面明显优于兰索拉唑，泮托拉唑和雷贝拉唑等其他质子泵抑制剂。
[0003]
艾司奥美拉唑钠在酸性溶液及光照条件下不稳定，在高温条件下也会缓慢降解产生杂质，杂质含量的增加可能引起严重的不良反应，为了保证产品的安全、有效，需对产品中的相关杂质进行严格监控，因此有关物质检测方法是产品质量控制的重要指标。
[0004]
目前，各国药典收载的该品种有关物质检测方法存在灵敏度低、杂质检出少等缺陷，因此开发一种能对多个杂质进行有效检测和分离且灵敏度高，耐用性好的操作简单的方法显得尤为重要。


技术实现要素：

[0005]
本发明的目的在于提供一种注射用艾司奥美拉唑钠有关物质检测方法。
[0006]
本发明要解决的技术问题：
[0007]
现有的注射用艾司奥美拉唑钠有关物质的检测方法，检测灵敏度低使得检测的准确度降低，同时现有的参测方法能够检测出的杂质较少，使得洗脱后的样品中任然含有杂质。
[0008]
本发明的目的可以通过以下技术方案实现：
[0009]
一种注射用艾司奥美拉唑钠有关物质检测方法，具体包括如下步骤：
[0010]
步骤s1：将去离子水、磷酸盐缓冲液、乙腈加入搅拌釜中，进行混合至均匀，制得流动相a；
[0011]
步骤s2：将去离子水、磷酸盐缓冲液、乙腈加入搅拌釜中，进行混合至均匀，制得流动相b；
[0012]
步骤s3：将步骤s1制得的流动相a和步骤s2制得的流动相b，在检测波长为302nm，柱温30℃，进行梯度洗脱。
[0013]
进一步，步骤s1所述的流动相a中去离子水、磷酸盐缓冲液、乙腈的用量体积比为8:1:1。
[0014]
进一步，步骤s2所述的流动相b中去离子水、磷酸盐缓冲液、乙腈的用量体积比为
19:1:80。
[0015]
进一步，步骤s1和步骤s2所述的磷酸盐缓冲液由如下步骤制成：将0.0052mol磷酸二氢钠和0.032mol磷酸氢二钠溶于蒸馏水中，用浓度为1mol/l的氢氧化钠溶液调节ph值为7.6后，用去离子水定容至1000ml。
[0016]
进一步，步骤s3所述的梯度洗脱使用的洗脱柱为十八烷基硅烷键合硅胶洗脱柱，该洗脱柱型号为waters xterra ms c18，4.6mm
×
150mm，3.5μm。
[0017]
进一步，步骤s3所述的梯度洗脱程序具体为0min，95％流动相a，5％流动相b；5min，95％流动相a，5％流动相b；15min，80％流动相a，20％流动相b；25min，75％流动相a，25％流动相b；30min，75％流动相a，25％流动相b；45min，0％流动相a，100％流动相b；49min，0％流动相a，100％流动相b；50min，95％流动相a，5％流动相b；60min，95％流动相a，5％流动相b。
[0018]
进一步，步骤s3所述的梯度洗脱使用的供试品溶液由如下步骤制成：将艾司奥美拉唑钠样品和稀释液进行混合至艾司奥美拉唑钠样品完全溶解，定量稀释制成每1ml中约含1mg的供试品溶液。
[0019]
进一步，所述的稀释液为磷酸盐缓冲液和甲醇以体积比为3:2的比例混合，磷酸盐缓冲液与步骤s1和步骤s2所述的磷酸盐缓冲液相同。
[0020]
本发明的有益效果：本发明提供的是一种注射用艾司奥美拉唑钠有关物质的检测方法，该方法能将工艺杂质、降解杂质与主成分良好分离，灵敏度高，耐用性好且操作简便。
附图说明
[0021]
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0022]
图1为系统适用性结果；
[0023]
图2为部分杂质分析方法的方法学考察的线型图；
[0024]
图3为部分杂质分析方法的方法学考察的线型图。
具体实施方式
[0025]
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
[0026]
实施例1
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一种注射用艾司奥美拉唑钠有关物质检测方法，具体包括如下步骤：
[0028]
步骤s1：将去离子水、磷酸盐缓冲液、乙腈按照体积比为8:1:1加入搅拌釜中，进行混合至均匀，制得流动相a；
[0029]
步骤s2：将去离子水、磷酸盐缓冲液、乙腈按照体积比为19:1:80加入搅拌釜中，进行混合至均匀，制得流动相b；
[0030]
步骤s3：将步骤s1制得的流动相a和步骤s2制得的流动相b，在检测波长为302nm，柱温30℃，进行梯度洗脱。
[0031]
步骤s1和步骤s2所述的磷酸盐缓冲液由如下步骤制成：将0.0052mol磷酸二氢钠和0.032mol磷酸氢二钠溶于蒸馏水中，用浓度为1mol/l的氢氧化钠溶液调节ph值为7.6后，用去离子水定容至1000ml。
[0032]
步骤s3所述的梯度洗脱使用的洗脱柱为十八烷基硅烷键合硅胶洗脱柱，该洗脱柱型号为waters xterra ms c18，4.6mm
×
150mm，3.5μm。
[0033]
步骤s3所述的梯度洗脱程序具体为0min，95％流动相a，5％流动相b；5min，95％流动相a，5％流动相b；15min，80％流动相a，20％流动相b；25min，75％流动相a，25％流动相b；30min，75％流动相a，25％流动相b；45min，0％流动相a，100％流动相b；49min，0％流动相a，100％流动相b；50min，95％流动相a，5％流动相b；60min，95％流动相a，5％流动相b。
[0034]
步骤s3所述的梯度洗脱使用的供试品溶液由如下步骤制成：将艾司奥美拉唑钠样品和稀释液进行混合至艾司奥美拉唑钠样品完全溶解，定量稀释制成每1ml中约含1mg的供试品溶液。
[0035]
所述的稀释液为磷酸盐缓冲液和甲醇以体积比为3:2的比例混合，磷酸盐缓冲液与步骤s1和步骤s2所述的磷酸盐缓冲液相同。
[0036]
实施例2
[0037]
一种注射用艾司奥美拉唑钠有关物质检测方法,具体包括如下步骤：
[0038]
步骤s1：将去离子水、磷酸盐缓冲液、乙腈按照体积比为8:1:1加入搅拌釜中，进行混合至均匀，制得流动相a；
[0039]
步骤s2：将去离子水、磷酸盐缓冲液、乙腈按照体积比为19:1:80加入搅拌釜中，进行混合至均匀，制得流动相b；
[0040]
步骤s3：将步骤s1制得的流动相a和步骤s2制得的流动相b，在检测波长为302nm，柱温30℃，流速为1.0ml/min进行梯度洗脱。
[0041]
步骤s3所述的梯度洗脱程序具体为0min，95％流动相a，5％流动相b；5min，95％流动相a，5％流动相b；15min，80％流动相a，20％流动相b；25min，75％流动相a，25％流动相b；30min，75％流动相a，25％流动相b；45min，0％流动相a，100％流动相b；49min，0％流动相a，100％流动相b；50min，95％流动相a，5％流动相b；60min，95％流动相a，5％流动相b。
[0042]
系统适用性溶液制备：
[0043]
取杂质a(2-巯基-5-甲氧基-1h-苯并咪唑)、杂质c(5-甲氧基-2-((4-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-2-基)甲基)硫代)-1h-苯并[d]咪唑)、杂质d(5-甲氧基-2-[[(4-甲氧基-3，5-二甲基-2-吡啶基)甲基]磺酰基]-1h-苯并咪唑)、杂质h(1,4-二氢-1-(5-甲氧基-1h-苯并咪唑-2-基)-3,5-二甲基-4-氧代-2-吡啶羧酸)、杂质i(5-甲氧基-2-[[(4-甲氧基-3，5-二甲基-2-吡啶基)甲基]亚硫酰基]-1-甲基苯并咪唑与6-甲氧基-2-[[(4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)甲基]亚硫酰基]-1-甲基苯并咪唑)各10mg，同置于50ml容量瓶中，加入乙腈30ml，纯化水15ml，超声溶解，乙腈定容，摇匀，制得杂质储备液1-5；取杂质j(2-[[(5-甲氧基-1h-苯并咪唑-2-基)亚硫酰基]甲基]-3,5-二甲基-4(1h)-1-吡啶酮)10mg，置于50ml量瓶中，先加入二氯甲烷约40ml，再加入甲醇约5ml，振摇使溶解后，加二氯甲烷定容，摇匀，得杂质储备液6，称取奥美拉唑对照品约10mg，精密称定，置10ml量瓶中，加稀释剂约7ml溶解，
取杂质储备液1-6各0.2ml，加稀释剂定容，摇匀，制成每1ml中约含1mg的奥美拉唑、各杂质约为2ug的混合溶液，制得系统适用性溶液1-6。
[0044]
供试品制备：
[0045]
取艾司奥美拉唑钠样品和稀释液进行混合至艾司奥美拉唑钠样品完全溶解，并转移至200ml量瓶中，加稀释剂稀释至刻度。
[0046]
0.2％对照溶液：
[0047]
取供试品0.2ml至100ml量瓶，加稀释剂定容，摇匀。
[0048]
灵敏度溶液：
[0049]
取供试品适量，用稀释剂稀释制成每1ml中约含0.5μg的溶液，作为灵敏度溶液。
[0050]
取20μl系统适用性溶液注入液相色谱仪，奥美拉唑峰的保留时间为25～26分钟，奥美拉唑峰与杂质d峰的分离度大于1.5，其他已知杂质间分离度应大于1.5；取灵敏度溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，主成分峰高的信噪比应大于10；再量取供试品溶液和对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按乘以校正因子的主成分自身对照法计算杂质含量，均应符合相应限度规定；供试品溶液色谱图中小于对照溶液主峰面积0.25倍(0.05％)的峰忽略不计。
[0051]
取稀释剂、空白辅料溶液、灵敏度溶液、系统适用性溶液、供试品溶液及0.2％对照溶液各20μl，按如下表进样顺序注入液相色谱仪，记录色谱图。
[0052]
名称进样针数1.空白溶剂(稀释剂)至少1针2.空白辅料至少1针3.灵敏度溶液1针4.系统适用性溶液1针5.第一批次供试品溶液1针6.第二批次供试品1针7.第一批次供试品0.2％对照溶液1针8.第二批次供试品0.2％对照溶液1针
[0053]
系统适用性结果如图1所示，溶剂不干扰供试品溶液中各已知杂质的有关物质测定，各杂质之间，杂质与主峰之间均分离良好，各拖尾因子，理论塔板数均满足有关物质测定的要求。
[0054]
实施例3
[0055]
对各杂质分析方法的方法学考察，杂质v同杂质a，杂质i同杂质d，杂质iii同杂质i，杂质iv同杂质j。
[0056]
各杂质线型图如图2和图3所示；由图2和图3可知各杂质的线性良好。
[0057]
以上内容仅仅是对本发明的构思所作的举例和说明，所属本技术领域的技术人员对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，只要不偏离发明的构思或者超越本权利要求书所定义的范围，均应属于本发明的保护范围。