苏木素
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碱性复红
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苦味酸染色试剂盒及其染色方法
技术领域
1.本发明涉及生物技术领域，具体的是一种苏木素
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碱性复红
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苦味酸染色试剂盒及其染色方法。
背景技术：
2.心肌缺血(myocardial ischemia)是指心脏的血液灌注减少，导致心脏的供氧减少，心肌能量代谢不正常，不能支持心脏正常工作的一种病理状态。随着心肌缺血患者越来越年轻化，对心肌缺血的早期改变进行病理诊断、对实验性心肌缺血材料进行观察研究具有很重要的意义。
技术实现要素：
3.为了克服现有技术中的缺陷，本发明实施例提供了一种苏木素
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碱性复红
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苦味酸染色试剂盒及其染色方法，其提供了一种制备方法简单、成本低、使用方法简单的试剂盒。
4.本申请实施例公开了：一种苏木素
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碱性复红
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苦味酸染色试剂盒，包括：harris苏木素液、碱性复红液和苦味酸丙酮液；其中：
5.所述harris苏木素液的制备方法包括：将harris苏木素加入无水乙醇中以获得溶液a，将硫酸铝钾加入蒸馏水中充分溶解以获得溶液b，将溶液a和溶液b以1:20的体积比混合以获得溶液c，向溶液c中加入氧化汞并混合后静置12～24小时以获得溶液d，向溶液d中加入柠檬酸并混合均匀，获得所述harris苏木素液，其中，以质量百分比计，所述harris苏木素液中包含harris苏木素0.01～0.03％；
6.所述碱性复红液的制备方法包括：将碱性复红加入蒸馏水中以获得所述碱性复红液，其中，以质量百分比计，所述碱性复红液中包含碱性复红0.08～0.12％；
7.所述苦味酸丙酮液的制备方法包括：将苦味酸加入丙酮中以获得所述苦味酸丙酮液，其中，以质量百分比计，所述苦味酸丙酮液中包含苦味酸0.08～0.12％。
8.具体的，所述harris苏木素液的制备方法包括：将2.5克harris苏木素加入25毫升无水乙醇中以获得溶液a，将22硫酸铝钾加入500毫升蒸馏水中充分溶解以获得溶液b，将上述溶液a和上述溶液b混合以获得溶液c，向所述溶液c中加入1.25克氧化汞并混合后静置12～24小时以获得溶液d，向溶液d中加入2克柠檬酸并混合均匀，获得所述harris苏木素液。
9.具体的，所述碱性复红液的制备方法包括：将0.1克碱性复红加入100毫升蒸馏水中以获得所述碱性复红液。
10.具体的，所述苦味酸丙酮液的制备方法包括：将0.1克苦味酸加入100毫升丙酮中以获得所述苦味酸丙酮液。
11.具体的，以质量百分比计，所述碱性复红液中包含碱性复红0.1％，所述苦味酸丙酮液中包含苦味酸0.1％。
12.具体的，所述苏木素
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碱性复红
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苦味酸染色试剂盒中包括：harris苏木素液500毫升、碱性复红液100毫升、苦味酸丙酮液100毫升。
13.本实施还公开：一种采用本实施例所述的苏木素
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碱性复红
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苦味酸染色试剂盒染色的方法，包括以下步骤：
14.步骤1：石蜡切片脱蜡至水洗；
15.步骤2：将步骤1中获得的石蜡切片浸入所述harris苏木素液中染色30～35秒，然后采用自来水冲洗300～305秒钟；
16.步骤3：将步骤2中获得的石蜡切片浸入所述碱性复红液中染色180～185秒钟，然后采用蒸馏水水洗5～10秒钟；
17.步骤4：对步骤3中获得的石蜡切片进行纯丙酮洗5～10秒钟；
18.步骤5：采用苦味酸丙酮液对步骤4中获得的石蜡切片进行分化5～15秒钟，以使得石蜡切片上无红色染液流下；
19.步骤6：对步骤5中获得的石蜡切片进行纯丙酮脱水5～10秒钟；
20.步骤7：依次对步骤6中获得的石蜡切片进行二甲苯透明、中性树脂封固。
21.具体的，以质量百分比计，所述碱性复红液中包括碱性复红0.1％。
22.具体的，以质量百分比计，所述苦味酸丙酮液中包括苦味酸0.1％。
23.具体的，所述石蜡切片的厚度介于3～10μm之间。
24.本发明至少具有如下有益效果：
25.本实施例的苏木素
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碱性复红
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苦味酸染色试剂盒，其制备方法简单、成本低，其染色方法简单、染色效果明显。
26.为让本发明的上述和其他目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例作详细说明如下。
具体实施方式
27.下面将结合本发明实施例对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
28.本实施例的苏木素
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碱性复红
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苦味酸染色试剂盒，包括：harris苏木素液、碱性复红液和苦味酸丙酮液。较佳的，各个成分的液体量分别为：harris苏木素液500毫升、碱性复红液100毫升、苦味酸丙酮液100毫升。
29.其中，各个成分的制备方法如下：
30.所述harris苏木素液的制备方法包括：将harris苏木素加入无水乙醇中以获得溶液a，将硫酸铝钾加入蒸馏水中充分溶解以获得溶液b，将溶液a和溶液b以1:20的体积比混合以获得溶液c，向溶液c中加入氧化汞并混合后静置12～24小时以获得溶液d，向溶液d中加入柠檬酸并混合均匀，获得所述harris苏木素液，其中，以质量百分比计，所述harris苏木素液中包含harris苏木素0.01～0.03％，较佳的，所述harris苏木素液中包含harris苏木素0.02％。
31.所述碱性复红液的制备方法包括：将碱性复红加入蒸馏水中以获得所述碱性复红液，其中，以质量百分比计，所述碱性复红液中包含碱性复红0.08～0.12％。
32.所述苦味酸丙酮液的制备方法包括：将苦味酸加入丙酮中以获得所述苦味酸丙酮
液，其中，以质量百分比计，所述苦味酸丙酮液中包含苦味酸0.08～0.12％。
33.在一具体的实施方式中，所述harris苏木素液的制备方法包括：将2.5克harris苏木素加入25毫升无水乙醇中以获得溶液a，将22硫酸铝钾加入500毫升蒸馏水中充分溶解以获得溶液b，将上述溶液a和上述溶液b混合以获得溶液c，向所述溶液c中加入1.25克氧化汞并混合后静置12～24小时以获得溶液d，向溶液d中加入2克柠檬酸并混合均匀，获得所述harris苏木素液。
34.在一具体的实施方式中，所述碱性复红液的制备方法包括：将0.1克碱性复红加入100毫升蒸馏水中以获得所述碱性复红液。
35.在一具体的实施方式中，所述苦味酸丙酮液的制备方法包括：将0.1克苦味酸加入100毫升丙酮中以获得所述苦味酸丙酮液。
36.具体的，以质量百分比计，所述碱性复红液中包含碱性复红0.1％，所述苦味酸丙酮液中包含苦味酸0.1％，如此，有利于提高染色效果。
37.采用本实施例的苏木素
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碱性复红
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苦味酸染色试剂盒进行染色的方法，包括以下步骤：
38.步骤1：石蜡切片脱蜡至水洗；
39.步骤2：将步骤1中获得的石蜡切片浸入所述harris苏木素液中染色30～35秒，然后采用自来水冲洗300～305秒钟，在此步骤中，优选染色30秒，冲洗300秒；
40.步骤3：将步骤2中获得的石蜡切片浸入所述碱性复红液中染色180～185秒钟，然后采用蒸馏水水洗5～10秒钟，在此步骤中，优选染色180秒；
41.步骤4：对步骤3中获得的石蜡切片进行纯丙酮洗5～10秒钟；
42.步骤5：采用所述苦味酸丙酮液对步骤4中获得的石蜡切片进行分化5～15秒钟，以使得石蜡切片上无红色染液流下；
43.步骤6：对步骤5中获得的石蜡切片进行纯丙酮脱水5～10秒钟；
44.步骤7：依次对步骤6中获得的石蜡切片进行二甲苯透明、中性树脂封固。
45.具体的，在步骤3中，以质量百分比计，所述碱性复红液中包括碱性复红0.1％；在步骤5中，以质量百分比计，所述苦味酸丙酮液中包括苦味酸0.1％，有利于提高染色效果。
46.具体的，所述石蜡切片的厚度介于3～10μm之间，可以根据实际情况进行适当调整。
47.采用上述苏木素
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碱性复红
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苦味酸染色试剂盒及其染色方法进行染色后，缺氧缺血心肌、红细胞、血浆蛋白、弹力纤维及胶原纤维均呈现艳红色或深红色，正常心肌呈黄色或黄棕色，细胞核呈黑蓝色。
48.本发明中应用了具体实施例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本发明的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处，综上所述，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。