一种对天然药物产物进行筛选和垂钓的方法

技术特征：
1.一种对天然药物产物进行筛选和垂钓的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤s1，分别制备金属纳米粒子探针和磁珠探针；步骤s2，将所述步骤s1制得的金属纳米粒子探针、磁珠探针分别与靶蛋白或靶蛋白结合受体蛋白偶联；步骤s3，将所述步骤s2制得的金属纳米粒子探针或磁珠探针同时加入待筛选天然药物产物中，孵育；步骤s4，将所述步骤s3中筛选出的带有靶向药物的探针通过离心或磁分离的方法分离出来；步骤s5，将所述步骤s4分离出的探针通过酸性溶液洗脱，得到不含金属纳米粒子或磁珠微粒的靶向药物溶液；步骤s6，将所述步骤s5得到的靶向药物溶液进行核磁共振、快速液相串联高分辨质谱、红外光谱学检测，确认其分子结构信息。步骤s7，将制备的金属纳米粒子探针或磁珠探针与拉曼信号分子耦联，再将金属纳米粒子探针和磁珠探针分别与靶蛋白或靶蛋白结合受体蛋白耦联，加入s5垂钓筛选出的化合物；步骤s8，检测拉曼信号，判断所述待筛选天然药物产物是否为靶向药物，所述靶向药物是否具有抑制或激活靶蛋白与其结合受体结合的活性。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述天然药物产物为通过处理后的中药提取混合物。3.根检权利要求1所述的方法，其特征在于，所述金属纳米粒子探针为金纳米粒子探针或银纳米粒子探针。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述拉曼信号分子为4
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mba或4
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abp。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述靶蛋白为pd
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l1蛋白。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述结合受体为具有能够与靶蛋白或核酸结合活性的受体蛋白。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤s8中的判断具体为：若检测到sers信号明显由强变弱或由弱变强，则所述待筛选化合物为针对特定靶点的靶向药物；若sers信号没有明显改变，则所述待筛选化合物非针对特定靶点的靶向药物。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括设置阳性对照，所述阳性对照为已知具有抑制靶蛋白与靶蛋白结合受体结合活性的化合物。9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述天然药物为穿心莲。

技术总结
本发明公开了一种基于表面增强拉曼光谱技术对天然药物产物分子进行筛选和垂钓的技术方法，设计在体外可以模拟体内相关靶点正常生物功能的靶蛋白对(组)，将其分别与金/银纳米粒子或磁珠微粒偶联，构建能够特异性识别作用于该靶点的中药活性成分的拉曼检测探针，并同时加入到待检测的天然药物产物中，靶向垂钓出特异性作用于该靶点的中药活性成分，并通过质谱或红外光谱等技术确认其分子结构信息，然后进行生物学活性验证。本发明首次将表面增强拉曼光谱技术与天然药物产物库相结合，利用金属纳米粒子及磁珠微粒构建的拉曼探针，形成简单灵敏的中药活性成分高通量筛选方法。单灵敏的中药活性成分高通量筛选方法。单灵敏的中药活性成分高通量筛选方法。


技术研发人员：梁重阳 徐雅娟 徐抒平 戴璐
受保护的技术使用者：吉林大学
技术研发日：2021.07.14
技术公布日：2021/11/28