1.本发明属于分析化学技术领域；涉及一种哌啶醇化合物的分析方法；具体地，涉及一种中空纤维液相微萃取和液相色谱联用的分析方法。
背景技术：
[0002]1‑
苄基
‑3‑
哌啶醇是贝尼地平(benidipine)的关键中间体，后者可由其通过一步酯化反应得到。贝尼地平具有降低血压、抗心绞痛、保护肾脏的功效，此外，贝尼地平对骨骼代谢也具有一定影响。贝尼地平是第二代二氢吡啶类钙拮抗药物，作用效果强于硝苯地平、氨氯地平，对血管具有良好的保护功能。在合成过程中，所使用的中间体1
‑
苄基
‑3‑
哌啶醇为(r)
‑1‑
苄基
‑3‑
哌啶醇。
[0003]
针对1
‑
苄基
‑3‑
哌啶醇的检测分析，通常采取液相色谱的分析方法。分析前，选择适当的色谱柱和流动相，开泵后冲洗色谱柱，等到色谱柱达到平衡且基线平衡后，用微量注射器把样品注入进样口，流动相将样品带入色谱柱中进行分离。分离后的组分依次流入检测器的流通池内，最后和洗脱液一起排入流出物收集器中。当有样品组分流过流通池时，检测器将组分浓度转变成电信号，经过放大，用记录器记录下来就得到了色谱图。
[0004]
随着技术不断发展，样品前处理新技术不断出现，如固相萃取技术、膜萃取技术、超临界流体萃取技术、微波辅助萃取技术、超声波萃取技术等。这些样品前处理技术成功地克服了传统方法中一些弊端。
[0005]
然而，当1
‑
苄基
‑3‑
哌啶醇在水中的浓度较低时，仪器的检测限相差甚远，以至于不能直接进行样品的定性及定量分析。因此，需要样品前处理，即对样品进行分离和富集，使待测组分与样品中的其他组分尽可能地分离，浓度可以满足所测定的仪器的要求。
[0006]
因而，针对现有技术的种种缺陷，需要寻找一种哌啶醇化合物的分析方法。
技术实现要素：
[0007]
针对上述问题，本发明目的在于提供一种哌啶醇化合物的分析方法。
[0008]
为实现上述目的，本发明采取以下技术方案：一种哌啶醇化合物的分析方法，所述分析方法选自中空纤维液相微萃取和液相色谱联用的分析方法。
[0009]
根据本发明所述的分析方法，其中，所述分析方法包括以下步骤：
[0010]
将中空纤维切成3cm的小段，置于色谱纯丙酮中超声清洗，自然晾干；
[0011]
将晾干的中空纤维置于乙酸乙酯中超声润洗，形成微液态薄膜；
[0012]
将中空纤维取出，套在微量注射器针尖上，推出乙酸乙酯，将中空纤维两端热封；
[0013]
将热封的中空纤维投入到样品溶液中进行萃取；
[0014]
萃取完毕，剪开中空纤维一端，抽回乙酸乙酯溶液，注入高效液相色谱仪中分析。
[0015]
根据本发明所述的分析方法，其中，所述中空纤维选自聚丙烯中空纤维。
[0016]
根据本发明所述的分析方法，其中，所述中空纤维的壁厚为100
‑
300μm，内径为400
‑
800μm，孔径为0.1
‑
0.3μm。
[0017]
优选地，所述中空纤维的壁厚为150
‑
250μm，内径为500
‑
700μm，孔径为0.15
‑
0.25μm。
[0018]
根据本发明所述的分析方法，其中，所述中空纤维的孔隙率为60
‑
90％。
[0019]
优选地，所述中空纤维的孔隙率为70
‑
80％。
[0020]
根据本发明所述的分析方法，其中，色谱条件为：agilent zorbaxsb
‑
aq c18柱液相色谱柱(250mm
×
4.6mm，5μm)；流动相为体积比70:30的meoh/h2o；流速为0.8ml/min；检测波长260nm；进样量5μl；柱温：30℃。
[0021]
根据本发明所述的分析方法，其中，所述萃取温度为30
‑
50℃，萃取时间为15
‑
45min。
[0022]
优选地，所述萃取温度为35
‑
45℃，萃取时间为20
‑
40min。
[0023]
根据本发明所述的分析方法，其中，所述萃取在搅拌条件下进行。
[0024]
有利地，搅拌速率为300
‑
500rpm；优选为350
‑
450rpm。
[0025]
根据本发明所述的分析方法，其中，所述哌啶醇化合物选自(r)
‑1‑
苄基
‑3‑
哌啶醇、(s)
‑1‑
苄基
‑3‑
哌啶醇或外消旋的1
‑
苄基
‑3‑
哌啶醇。
[0026]
本发明具有以下有益技术效果：与常规液相色谱方法相比，采用本发明的分析方法能够实现1
‑
苄基
‑3‑
哌啶醇的富集，富集倍数高达数十倍，同时检测限明显降低，由此提高了分析方法的灵敏度。
具体实施方式
[0027]
下列实施例仅仅是为了向本领域的普通技术人员提供如何制得和评价本发明所述并受权利要求书保护的化合物、组合物、制品、装置和/或方法的完整公开内容和描述，并且旨在仅仅为示例性的，而非旨在限制发明人视为其发明的范围。已做出了努力以确保关于数字(例如数量、温度等)的准确性，但是应当考虑到一些误差和偏差。
[0028]
除非另外指明，否则份数均为重量份，温度均以℃表示或处于环境温度下，并且压力为大气压或接近大气压。存在反应条件(例如组分浓度、所需的溶剂、溶剂混合物、温度、压力和其它反应范围)以及可用于优化通过所述方法得到的产物纯度和收率的条件的多种变型形式和组合。将只需要合理的常规实验来优化此类方法条件。
[0029]
实施例1
[0030]
外消旋1
‑
苄基
‑3‑
哌啶醇的分析方法选自中空纤维液相微萃取和液相色谱联用的分析方法。
[0031]
中空纤维购自德国membrana公司，所述中空纤维的壁厚为150
‑
250μm，内径为500
‑
700μm，孔径为0.15
‑
0.25μm；所述中空纤维的孔隙率为75％。
[0032]
所述分析方法包括以下步骤：
[0033]
将中空纤维切成3cm的小段，置于色谱纯丙酮中超声清洗5min，自然晾干；
[0034]
将晾干的中空纤维置于乙酸乙酯中超声润洗，使乙酸乙酯均匀进入中空纤维的多孔壁中，形成微液态薄膜；
[0035]
将中空纤维取出，套在微量注射器针尖上，推出乙酸乙酯，将中空纤维两端热封；
[0036]
将热封的中空纤维投入到样品溶液中进行萃取；所述萃取温度为40℃，萃取时间为30min。所述萃取在搅拌条件下进行，搅拌速率为400rpm。
[0037]
萃取完毕，剪开中空纤维一端，抽回乙酸乙酯溶液，注入高效液相色谱仪中分析。
[0038]
色谱条件为：agilent zorbax sb
‑
aq c18柱液相色谱柱(250mm
×
4.6mm，5μm)；流动相为体积比70:30的meoh/h2o；流速为0.8ml/min；检测波长260nm；进样量5μl；柱温：30℃。
[0039]
准确称取0.0500g的1
‑
苄基
‑3‑
哌啶醇，用甲醇溶解并定容至50ml的容量瓶中，即得浓度为1.0g/l的1
‑
苄基
‑3‑
哌啶醇标准储备液。不同浓度的标准溶液由此标准储备液用二次水稀释后配制得到。
[0040]
将不同浓度的标准溶液按照上述方法进行萃取，并在上述色谱条件下测定并绘制工作曲线，得出工作曲线方程为h＝39.451c+6.816(其中h为峰高，c为浓度)。1
‑
苄基
‑3‑
哌啶醇在0.01
‑
5.0mg/l范围内线性关系良好，相关系数为0.9998。
[0041]
取浓度为0.01mg/l的标准溶液，按照上述方法进行萃取，并在上述色谱条件下测定，重复11次，rsd为2.9％。取信噪比s/n为3，计算检测限为0.87μg/l。
[0042]
此外，取浓度为0.05mg/l、0.1mg/l、0.5mg/l的标准溶液，分别按照上述方法进行萃取，从各自萃取前后的色谱图可以计算出三者的富集倍数分别为86.2、64.7和39.1。
[0043]
比较例1
[0044]
准确称取0.0500g的1
‑
苄基
‑3‑
哌啶醇，用甲醇溶解并定容至50ml的容量瓶中，即得浓度为1.0g/l的1
‑
苄基
‑3‑
哌啶醇标准储备液。不同浓度的标准溶液由此标准储备液用二次水稀释后配制得到。
[0045]
将不同浓度的标准溶液在上述色谱条件下直接测定并绘制工作曲线，得出工作曲线方程为h＝1.362c+3.587(其中h为峰高，c为浓度)。1
‑
苄基
‑3‑
哌啶醇在0.5
‑
80mg/l范围内线性关系良好，相关系数为0.9997。
[0046]
取浓度为0.5mg/l的标准溶液，按照上述方法进行萃取，并在上述色谱条件下测定，重复11次，rsd为3.4％。取信噪比s/n为3，计算检测限为51μg/l。
[0047]
应理解，本发明的具体实施方式仅用于阐释本发明的精神和原则，而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明的内容之后，本领域技术人员可以对本发明的技术方案作出各种改动、替换、删减、修正或调整，这些等价技术方案同样落于本发明权利要求书所限定的范围。