一种检测蜂王浆中26种农药残留的样本制作方法与流程

1.本发明涉及蜂蜜中农药残留检测领域，尤其涉及一种检测蜂王浆中26种农药残留的样本制作方法。


背景技术：

2.蜂王浆(royal jelly别名蜂王乳、蜂皇浆、蜂乳)是蜜蜂巢中培育幼虫的青年工蜂咽头腺的分泌物，是供给将要变成蜂王的幼虫的食物，也是蜂王终身的食物，营养价值很高，蜂王浆呈乳状，具有一种典型的酚与酸的气味，味道酸、涩、略带辛辣，回味略甜，颜色根据蜜蜂食用花粉的不同而稍有改变，一般分为乳白色和微黄色。
3.在对蜂蜜中农药成分检测之前，需要对蜂蜜进行样本的制作，然而样本制作过程中，大多需要通过水将其中的杂质进行过滤处理，然而水中自身含有一定的化合物和杂质，容易与蜂蜜中或者蜂蜜中含有的农药残留产生反应，从而生成其它物质影响检测结构，因此本发明提出一种检测蜂王浆中26种农药残留的样本制作方法。


技术实现要素：

4.本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种检测蜂王浆中26种农药残留的样本制作方法。
5.为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
6.一种检测蜂王浆中26种农药残留的样本制作方法，所述样本的制作步骤如下：
7.s1、将水进行过滤，将水中的杂志进行去除，并将水的其他化合物进行去除，得到纯净的水，之后将水加热至沸腾，经过蒸馏后得到更加纯净的水，留以备用；
8.s2、将蜂蜜进行除杂：机取出蜂蜜的样品，进行抽样检查，将取出的蜂蜜放置于显微镜下进行观察，观察蜂蜜的纯度和杂质，根据杂质选择合适的过滤装置，将蜂蜜的中杂质进行过滤，得到纯净的蜂蜜；
9.s3、将样品分为三份，分别在常温保存和冷藏保存，保存48h，一份立即制备；
10.s4、将常温保存的蜂蜜，称取2g蜂蜜的试样于50ml塑料离心管中，加入10ml纯净的水进行涡旋混匀，混匀后的产品加入300μl氨水，涡旋充分混匀，然后加入乙腈-三氯甲烷溶液10ml，进行涡旋 5min，进行过滤，将过滤中试样中的残渣，将残渣进行收集，放入废弃箱中；
11.s5、将上述步骤中过滤后的试样加入10g无水硫酸钠，剧烈振荡 3-5min后，使用离心机进行离心，离心机以6000r/min，离心5min，吸取上清液，将上清液进行过滤，去除上清液中的杂质；
12.s6、将上述步骤中除上清液的残渣中加入5ml乙腈，剧烈振荡 3min后6000r/min离心5min，使用离心机进行离心，提取上清液，将上清液进行除杂；
13.s7、将s5步骤以及s6步骤中过滤后的上清液进行合并，然后加入5ml正丙醇，使用40℃水浴中氮气吹干，加入1ml乙腈复溶，过 0.22μm滤膜，用于测定，通上述操作，将冷藏保
存的蜂蜜制备用于制备检测的样品，通上述操作，将常温保存的蜂蜜制备用于制备检测的样品。
14.优选的，在步骤s3中，常温保存状态下的蜂蜜保存在30-36℃的环境中，冷藏保温保存状态下的蜂蜜保存在0-5℃的环境中。
15.优选的，所述步骤s4中残渣放入废弃箱后，利用滤网将残渣中的杂质过滤干净，之后液体经过蒸发结晶后通过显微镜再次观察，保留其中有用杂质留待后续处理。
16.优选的，所述步骤s4中称取的蜂蜜误差不超过0.01g。
17.优选的，步骤s4式样在涡旋5min后直至使试样完全乳化溶解，无颗粒物，然后将完全乳化溶解的试样进行过滤。
18.优选的，所述显微镜的型号为cx23，所述离心机的型号为 cf1524r。
19.本发明的有益效果为：
20.1.本发明中，本发明中过滤后的试样加入10g无水硫酸钠，剧烈振荡3-5min后，使用离心机进行离心，离心机以6000r/min，离心 5min，吸取上清液，将上清液进行过滤，去除上清液中的杂质；将上述步骤中除上清液的残渣中加入5ml乙腈，剧烈振荡3min后 6000r/min离心5min，使用离心机进行离心，提取上清液，将上清液进行除杂；在将两次过滤后的上清液进行合并，然后加入5ml正丙醇，使用40℃水浴中氮气吹干，加入1ml乙腈复溶，过0.22μm滤膜，用于测定，通上述操作，将冷藏保存的蜂蜜制备用于制备检测的样品，通上述操作，将常温保存的蜂蜜制备用于制备检测的样品，通过将样品一次提取剩余的残渣进行了二次提取，从而有效的提高了样品的利用率，使得同一份样品能够制作出更多的样本，无需通过多份样品制作一份样本，大大减少了样本制作的成本；
21.2.本发明中，将常温保存的蜂蜜，称取2g蜂蜜的试样于50ml塑料离心管中，加入10ml纯净的水进行涡旋混匀，从而对蜂蜜中的杂质进行初次处理，而加入的纯净水是通过过滤，将水中的杂志进行去除，并将水的其他化合物进行去除，得到纯净的水，之后将水加热至沸腾，经过蒸馏后得到更加纯净的水，从而使得涡旋混匀过程中使用的水中不含杂质，避免在式样处理过程中因为水中的杂质或者其他化合物对样本的制作造成影响，使得制作后的样本因为与水中的杂质或者化合物反应后产生其他物质，从而造成后期检测结果不精确的情况。
具体实施方式
22.一种检测蜂王浆中26种农药残留的样本制作方法，所述样本的制作步骤如下：
23.s1、将水进行过滤，将水中的杂志进行去除，并将水的其他化合物进行去除，得到纯净的水，之后将水加热至沸腾，经过蒸馏后得到更加纯净的水，留以备用；
24.s2、将蜂蜜进行除杂：机取出蜂蜜的样品，进行抽样检查，将取出的蜂蜜放置于显微镜下进行观察，观察蜂蜜的纯度和杂质，根据杂质选择合适的过滤装置，将蜂蜜的中杂质进行过滤，得到纯净的蜂蜜；
25.s3、将样品分为三份，分别在常温保存和冷藏保存，保存48h，一份立即制备，常温保存状态下的蜂蜜保存在30-36℃的环境中，冷藏保温保存状态下的蜂蜜保存在0-5℃的环境中；
26.s4、将常温保存的蜂蜜，称取2g(称取的蜂蜜误差不超过0.01g) 蜂蜜的试样于
50ml塑料离心管中，加入10ml纯净的水进行涡旋混匀，混匀后的产品加入300μl氨水，涡旋充分混匀，然后加入乙腈-三氯甲烷溶液10ml，进行涡旋5min，直至试样完全乳化溶解，无颗粒物，然后将完全乳化溶解的试样进行过滤，将过滤中试样中的残渣，将残渣进行收集，放入废弃箱中，残渣放入废弃箱后，利用滤网将残渣中的杂质过滤干净，之后液体经过蒸发结晶后通过显微镜再次观察，保留其中有用杂质留待后续处理；
27.s5、将上述步骤中过滤后的试样加入10g无水硫酸钠，剧烈振荡 3-5min后，使用离心机进行离心，离心机以6000r/min，离心5min，吸取上清液，将上清液进行过滤，去除上清液中的杂质；
28.s6、将上述步骤中除上清液的残渣中加入5ml乙腈，剧烈振荡 3min后6000r/min离心5min，使用离心机进行离心，提取上清液，将上清液进行除杂；
29.s7、将s5步骤以及s6步骤中过滤后的上清液进行合并，然后加入5ml正丙醇，使用40℃水浴中氮气吹干，加入1ml乙腈复溶，过 0.22μm滤膜，用于测定，通上述操作，将冷藏保存的蜂蜜制备用于制备检测的样品，通上述操作，将常温保存的蜂蜜制备用于制备检测的样品。
30.其中，在上述步骤中，所述显微镜的型号为cx23，所述离心机的型号为cf1524r。
31.对比例1
32.本对比例与所提供的实施例1的方法大致相同，其主要区别在于：在步骤s1过程中，不对水进行过滤以及蒸馏处理，使用《工业企业设计卫生标准》的标准进行检测，检测数据具体数据如下表：
[0033][0034]
对比例2
[0035]
本对比例与所提供的实施例1的方法大致相同，其主要区别在于：在步骤s2过程中，不对蜂蜜样品的纯度和杂质进行挑选，检测数据具体数据如下表：
[0036] 蜂蜜纯度实施例199％对比例280％
[0037]
对比例3
[0038]
本对比例与所提供的实施例1的方法大致相同，其主要区别在于：在步骤s6过程中，不对s5步骤中除上清液的残渣进行处理，则会使得制作后的样本质量达不到要求，检测数据具体数据如下表：
[0039] 样本质量实施例11.2g对比例30.65g
[0040]
由对比例1、2、3可知，本发明中，本发明中，将常温保存的蜂蜜，称取2g蜂蜜的试样于50ml塑料离心管中，加入10ml纯净的水进行涡旋混匀，从而对蜂蜜中的杂质进行初次处理，而加入的纯净水是通过过滤，将水中的杂志进行去除，并将水的其他化合物进行去除，得到纯净的水，之后将水加热至沸腾，经过蒸馏后得到更加纯净的水，从而使得涡旋混匀过程中使用的水中不含杂质，避免在式样处理过程中因为水中的杂质或者其他化合物对样本的制作造成影响，使得制作后的样本因为与水中的杂质或者化合物反应后产生其他物质，从而造成后期检测结果不精确的情况；
[0041]
本发明中通过显微镜对蜂蜜中的杂质进行过滤，从而使得蜂蜜的纯度更高，进而避免了在后期样本制作过程中因为纯度不达标使得制作后的样本在检测过程中造成检测结构不精确的情况；
[0042]
本发明中过滤后的试样加入10g无水硫酸钠，剧烈振荡3-5min 后，使用离心机进行离心，离心机以6000r/min，离心5min，吸取上清液，将上清液进行过滤，去除上清液中的杂质；将上述步骤中除上清液的残渣中加入5ml乙腈，剧烈振荡3min后6000r/min离心5min，使用离心机进行离心，提取上清液，将上清液进行除杂；在将两次过滤后的上清液进行合并，然后加入5ml正丙醇，使用40℃水浴中氮气吹干，加入1ml乙腈复溶，过0.22μm滤膜，用于测定，通上述操作，将冷藏保存的蜂蜜制备用于制备检测的样品，通上述操作，将常温保存的蜂蜜制备用于制备检测的样品，通过将样品一次提取剩余的残渣进行了二次提取，从而有效的提高了样品的利用率，使得同一份样品能够制作出更多的样本，无需通过多份样品制作一份样本，大大减少了样本制作的成本。
[0043]
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。