快速检测复杂基质中蛋白质的分析方法

文档序号:31343199发布日期:2022-08-31 11:02阅读:来源:国知局

技术特征:
1.快速检测复杂基质中蛋白质的分析方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤(1):将毛细管插入包含蛋白质的溶液中,吸入溶液,任选地所述毛细管的针尖开口直径为1纳米到10毫米,优选1微米-20微米;步骤(2)将吸入溶液的毛细管,静置(优选地,所述静置时间为5-100s),使蛋白质充分吸附于毛细管内表面;步骤(3)将毛细管内的残余溶液推出;步骤(4)向毛细管内注入解吸附溶液;步骤(5)将毛细管放置于离子化装置上,进行蛋白质的离子化;步骤(6)使用质谱仪进行蛋白质的离子化信息检测,获得蛋白质的信号。2.根据权利要求1所述的快速检测复杂基质中蛋白质的分析方法,其特征在于,在步骤(3)和步骤(4)之间还包括洗涤步骤,优选地,所述洗涤步骤通过去离子水进行,优选地,所述洗涤次数为1-50次,优选5次。3.根据权利要求1或2所述的快速检测复杂基质中蛋白质的分析方法,其特征在于,吸入溶液的方式,可以是毛细管的自吸或在毛细管内施加负0.01-10000kpa的负气压,推出溶液的方式,可以是在毛细管内施加正0.01-10000kpa的正气压。4.根据权利要求1-3中任一项所述的快速检测复杂基质中蛋白质的分析方法,其特征在于,所述解吸附溶液选自去离子水、蒸馏水、醋酸铵、甲酸铵、碳酸氢铵、氯化铵、甲酸、乙酸和其混合物,任选地,所述解吸附溶液选自去离子水、蒸馏水、1-1000mm醋酸铵、1-1000mm甲酸铵、1-1000mm碳酸氢铵、1-1000mm氯化铵、0.01-10%甲酸、0.01-10%乙酸和其混合物。5.根据权利要求1-3中任一项所述的快速检测复杂基质中蛋白质的分析方法,其特征在于,蛋白质在溶液中的存在形式选自蛋白质单体、蛋白质-金属复合物、蛋白质-蛋白质复合物、蛋白质-核酸复合物、蛋白质-小分子复合物。6.根据权利要求1-5中任一项所述的快速检测复杂基质中蛋白质的分析方法,其特征在于,所述解吸附溶液为甲酸,优选地,0.01-10%甲酸,更优选地1%甲酸,用于蛋白质单体的检测。7.根据权利要求1-5中任一项所述的快速检测复杂基质中蛋白质的分析方法,其特征在于,所述解吸附溶液为醋酸铵,优选地,1-1000mm醋酸铵,更优选地500mm醋酸铵,用于蛋白质复合物的检测。8.根据权利要求1-7中任一项所述的快速检测复杂基质中蛋白质的分析方法,其特征在于,将毛细管放置在距离质谱入口2-10毫米的位置进行离子化。9.根据权利要求1-8中任一项所述的快速检测复杂基质中蛋白质的分析方法,其特征在于,所述毛细管吸入溶液后,内表面吸附蛋白质时间范围为1飞秒到1000小时,优选地,30秒。10.根据权利要求1-9中任一项所述的快速检测复杂基质中蛋白质的分析方法,其特征在于,所述毛细管灌入解吸附溶液后,解吸附时间范围为1飞秒到1000小时,优选地,10秒。

技术总结
本发明公开了快速检测复杂基质下蛋白质的分析方法,包括以下步骤:(1)将毛细管插入包含蛋白质的溶液中,吸入少量溶液;(2)将吸入溶液的毛细管静置,使蛋白质充分吸附于毛细管内表面;(3)将毛细管内的残余溶液推出;(4)向毛细管内注入解吸附溶液;(5)将毛细管放置于离子化装置上,进行蛋白质的离子化,(6)使用质谱仪进行蛋白质的离子化信息检测,获得蛋白质的信号。信号。信号。


技术研发人员:黄光明 侯壮豪
受保护的技术使用者:中国科学技术大学
技术研发日:2022.04.14
技术公布日:2022/8/30
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