核桃或其核桃制品中卵磷脂的检测方法

1.本发明涉及农产品和食品品质检测技术领域，具体而言，涉及一种核桃或其核桃制品中卵磷脂的检测方法。


背景技术：

2.目前，国内外针对核桃的营养成分的分析研究主要集中在主要营养成分(包括粗脂肪、蛋白质、淀粉、总糖、碳水化合物、能量、脂肪酸、氨基酸组成以及钾、钙、镁、铁、锰、铜、锌、磷等元素)的定量分析及影响因素(品种、成熟度、贮藏条件、保鲜处理等)研究上.但针对特色营养成分的系统研究较少.因此，在核桃产品品牌升级中无法避免同质化问题。
3.卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”，能增强大脑活力；而众多文献虽引用了“核桃仁富含卵磷脂”的结论，但只证实了核桃富含蛋白质和磷等元素，对核桃中的卵磷脂含量并未做具体的检测。主要原因是缺乏方便、快捷且自动化程度高的测定方法。此外，现有的一些方法也存在前处理步骤多、操作繁琐等问题。
4.鉴于此，特提出本发明。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供一种核桃或其核桃制品中卵磷脂的检测方法。该检测方法具有操作简单、耗时短、检测准确的特点，适用于核桃或其核桃制品的卵磷脂含量检测。
6.本发明是这样实现的：
7.本发明提供一种核桃或其核桃制品中卵磷脂的检测方法，其包括如下步骤：
8.样品预处理步骤：用有机溶剂处理待测样品，得到分析用的供试品溶液；所述有机溶剂为乙醇；
9.检测步骤：采用高效液相色谱法检测所述供试品溶液。
10.本发明的检测方法与其他检测方式相比，无需除脂的步骤，具有预处理操作简便、耗时短、避免使用高毒性的有机试剂、检测准确的特点。
11.本发明提供的检测方法适用于核桃及其制品中卵磷脂的含量检测，检测结果准确，能为深入挖掘核桃中特征营养品质、提升核桃品牌知名度提供准确的分析方法。本发明的这些特别之处在国内外文献中未见报道。
12.可选地，在一些实施方案中，采用高效液相色谱法检测所述供试品溶液的色谱条件包括如下：
13.流动相：乙腈、甲醇和水的混合溶液；
14.洗脱方式：等度洗脱；
15.流速：0.8-1.2ml/min。
16.可选地，在一些实施方案中，所述流动相中乙腈、甲醇和水的体积比为34-36:59-61:4-6。
17.可选地，在一些实施方案中，采用高效液相色谱法检测所述供试品溶液的色谱条
件还包括如下：色谱柱：ultimate xb-nh2柱；
18.检测波长：199-201nm；
19.柱温：34-36℃；
20.进样量：9-11μl。
21.可选地，在一些实施方案中，所述乙醇的浓度为94％-96％。
22.可选地，在一些实施方案中，所述待测样品为固体样品或液体样品。
23.可选地，在一些实施方案中，所述待测样品为固体样品，每g所述待测样品对应使用48-52ml所述有机溶剂进行预处理。
24.可选地，在一些实施方案中，所述待测样品为液体样品，每ml所述待测样品对应使用3.5-4.5ml所述有机溶剂进行预处理。
25.可选地，在一些实施方案中，用所述有机溶剂处理所述待测样品包括：将所述有机溶剂处理与所述待测样品混合，置于涡旋提取仪上于2400-2600r/min提取9-11min，再于4800-5200r/min条件下离心9-11min，取0.9-1.1ml上清液，氮气吹干，再加入2.4-2.6ml甲醇复溶，过滤后，得到所述供试品溶液。
26.可选地，在一些实施方案中，所述待测样品选自干核桃、核桃粉、核桃乳和核桃油样品中的任意一种。
27.本发明的检测方法适用于多种核桃制品的卵磷脂检测，而且对低、中、高含量的卵磷脂含量检测都准确有效。
附图说明
28.为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
29.图1为卵磷脂(pc)标准品谱图。
30.图2为叶城核桃样品谱图。
具体实施方式
31.为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
32.以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
33.实施例1
34.1取市售的干核桃、核桃粉、核桃乳、核桃油等样品，分别按下述操作过程进行分析检测。
35.前处理步骤：
36.准确称取约固体样品0.5g(精确至0.0001g)，液体样品5.0ml于50ml离心管中，固体样品中准确加入25.0ml 95％乙醇，液体样品中准确加入20.0ml 95％乙醇盖塞，将离心
管置于涡旋提取仪上2500r/min提取10min后，取出离心管，5000r/min离心10min，吸取1.0ml上清液于试管中，氮气吹干，再准确加入2.5ml甲醇复溶(如出现乳浊，属正常现象)，过0.22μm有机相滤膜至澄清后，转移至进样瓶中，待上机(高效液相色谱仪为waters 2690)分析。
37.仪器分析条件：
38.a.色谱柱：ultimate xb-nh2柱(250mm
×
4.6mm,5μm)。
39.b.检测波长：200nm。
40.c.流动相：乙腈-甲醇-水35：60:5，v/v。
41.d.流速：1.0ml/min。
42.e.柱温：35℃。
43.f.进样量：10μl。
44.标准品的处理：准确称取卵磷脂(pc)标准品25mg(精确至0.1mg)，用甲醇定容至25ml。该标准溶液中卵磷脂的质量浓度为1mg/ml，4℃冰箱密封保存备用。分别移取该溶液0.10ml、0.25ml，0.50ml，1.0ml，2.5ml，并用甲醇定容至10ml，配制的标准溶液的浓度分别为10μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、250μg/ml。将标准系列工作液分别注入液相色谱仪中，测定相应的峰面积，以峰面积为横坐标，标准工作液的浓度为纵坐标绘制标准曲线。将待测样品的峰面积代入标准曲线即可得到待测样品的卵磷脂含量。
45.结果见图1-图2和表1。
46.表1核桃及其制品中卵磷脂的检测结果
[0047][0048]
本实施例提供检测方法的检出限为1mg/kg，定量限为3mg/kg：将卵磷脂标准溶液不断稀释进样，当标准溶液浓度为1μg/ml时，其在高效液相色谱中的峰高为仪器噪音的3倍，符合方法检出限的要求，折算成样品浓度的话其检出限为1mg/kg，根据定量限为为检出限的3倍，计算出卵磷脂的方法定量限为3mg/kg。对测定了本底值(2706mg/kg)的核桃样品做加标回收试验，添加量分别为250mg/kg、1000mg/kg和2500mg/kg，回收率均在93.6％～104.8％之间。上述数据说明该检测方法不仅灵敏度高，而且对低、中、高含量的卵磷脂含量检测都准确有效。
[0049]
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。