乳制品中6S-5-甲基四氢叶酸钙的检测方法与流程

本发明属于乳制品添加剂检测，具体涉及一种乳制品中6s-5-甲基四氢叶酸钙的检测方法。

背景技术：

1、化合物6s-5-甲基四氢叶酸钙，是叶酸的一种化合物来源，是组织或血叶酸的主要形式，参与体内多种重要的生化反应，它在人体中不需要经过繁琐的酶促反应，可以被直接利用，能够预防神经管缺陷，治疗抑郁症，老年痴呆症以及巨幼红细胞贫血症等，国家卫生计生委于2017年12月22日批准6s-5-甲基四氢叶酸钙为食品营养强化剂新品种，目前，6s-5-甲基四氢叶酸钙可用于调制乳粉(儿童用乳粉和孕产妇用乳粉除外)和固体饮料，使用量与gb14880中规定叶酸的使用量一致。然而，关于添加有6s-5-甲基四氢叶酸钙原料的乳与乳制品中6s-5-甲基四氢叶酸钙含量的检测，国家暂未制定相关检测方法。

2、关于6s-5-甲基四氢叶酸钙，现有技术资料显示：一种6s-5-甲基四氢叶酸钙的检测方法(庞正查，申请号201810500346.6，2017)、稳定的6s-5-甲基四氢叶酸晶型及其检测方法(王哲清，申请号201410757024.1，2014)和一种6s-5-甲基四氢叶酸钙口服营养补充剂及其检测方法(严玲，申请号201510431916.7，2015)已有报道，但这些主要针对的是6s-5-甲基四氢叶酸钙的制备以及补充剂等方面进行的研究。而6s-5-甲基四氢叶酸钙作为一种食品营养强化剂新品种，其在乳粉中的添加量国家明进行了明确的规定和限制，为了有效地控制含6s-5-甲基四氢叶酸钙成分的产品质量、工艺设计改进和新品上市宣称，开发一种检测方法满足乳与乳制品中6s-5-甲基四氢叶酸钙含量的检测是很有必要和意义的。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种乳制品中6s-5-甲基四氢叶酸钙的检测方法。该检测方法操作简便快速、准确性可靠、实用性强。

2、为达到上述目的，本发明提供了一种乳制品中6s-5-甲基四氢叶酸钙的检测方法，包括以下步骤：(1)向含6s-5-甲基四氢叶酸钙的待检试样中依次加入抗氧化剂和沉淀剂，得第一中间产物；(2)提取所述第一中间产物的上清液，并测定所述上清液中的6s-5-甲基四氢叶酸钙含量。

3、根据本发明的一些具体实施方案，所述抗氧化剂为抗坏血酸。

4、根据本发明的一些具体实施方案，所述抗氧化剂的质量浓度为0.1-0.5％，每克待检试样中加入抗氧化剂15-17ml。

5、根据本发明的一些具体实施方案，所述沉淀剂为三氯乙酸。使用一定浓度的三氯乙酸溶液，作为沉淀剂沉淀乳与乳制品基质中的蛋白，降低了杂质对目标物的干扰和影响。

6、根据本发明的一些具体实施方案，所述沉淀剂的质量浓度为0.8-1.2％，每克待检试样中加入沉淀剂1-5ml。

7、根据本发明的一些具体实施方案，在步骤(1)和步骤(2)之间，还依次包括恒温振摇和冷却操作。

8、根据本发明的一些具体实施方案，所述恒温振摇的温度为90-100℃，所述恒温振摇的时间为30-60min，振摇的频率为每8-12min振摇一次，通过水浴摇床进行振摇。

9、根据本发明的一些具体实施方案，所述冷却的温度为20-25℃。

10、根据本发明的一些具体实施方案，测定所述上清液中的6s-5-甲基四氢叶酸钙含量之前将所述第一中间产物的上清液过滤，采用过滤膜进行过滤，所述过滤膜的直径为0.2-0.45μm。

11、根据本发明的一些具体实施方案，通过液相色谱测定所述上清液中的6s-5-甲基四氢叶酸钙含量。

12、本发明提供的乳制品中6s-5-甲基四氢叶酸钙的检测方法通过采用抗坏血酸作为抗氧化剂，从而保证目标物的稳定性并加速蛋白质的沉淀，采用三氯乙酸作为沉淀剂降低杂质对目标物的干扰和影响，进一步通过恒温水浴使得样品充分溶解，三者手段结合使用使测定结果准确性好、重复性和稳定性好；进一步通过特定的液相色谱测定条件保证了目标物和干扰物的分离。该检测方法方便快速、准确性可靠和实用性强，使得乳制品中6s-5-甲基四氢叶酸钙含量的检测有据可依，实现添加6s-5-甲基四氢叶酸钙的乳与乳制品产品质量可控。

技术特征：

1.一种乳制品中6s-5-甲基四氢叶酸钙的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述抗氧化剂为抗坏血酸。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述抗氧化剂的质量浓度为0.1-0.5％，每克待检试样中加入抗氧化剂15-17ml。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述沉淀剂为三氯乙酸。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述沉淀剂的质量浓度为0.8-1.2％，每克待检试样中加入沉淀剂1-5ml。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在步骤(1)和步骤(2)之间，还依次包括恒温振摇和冷却操作。

7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述恒温振摇的温度为90-100℃，所述恒温振摇的时间为30-60min，振摇的频率为每8-12min振摇一次。

8.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述冷却的温度为20-25℃。

9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，测定所述上清液中的6s-5-甲基四氢叶酸钙含量之前将所述第一中间产物的上清液过滤，采用过滤膜进行过滤，所述过滤膜的直径为0.2-0.45μm。

10.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，通过液相色谱测定所述上清液中的6s-5-甲基四氢叶酸钙含量。

技术总结
本发明提供了一种乳制品中6S‑5‑甲基四氢叶酸钙的检测方法。该检测方法包括以下步骤：(1)将含6S‑5‑甲基四氢叶酸钙的待检试样中依次加入抗氧化剂和沉淀剂，得第一中间产物；(2)提取所述第一中间产物的上清液，并测定所述上清液中的6S‑5‑甲基四氢叶酸钙含量。该检测方法操作简便快速、准确性可靠、实用性强。

技术研发人员：陈静,段国霞,刘丽君,宫慧丽,唐烁,李翠枝
受保护的技术使用者：内蒙古伊利实业集团股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/4