一种西洋参UPLC特征图谱构建方法及鉴别方法与流程

一种西洋参uplc特征图谱构建方法及鉴别方法
技术领域
1.本发明涉及液相图谱构建技术领域，具体涉及一种西洋参uplc特征图谱构建方法及鉴别方法。


背景技术：

2.西洋参是五加科、人参属多年生草本植物。根为肉质，其形状有椭圆形和纺锤形，外皮表面呈浅黄色，较细致光滑，生长茂盛，断面的纹理具有菊花状；茎为直立圆柱形，光滑无毛，绿色或暗紫绿色，茎的高矮随参龄不同而不一样；叶一般为由5片小叶组成的掌状复叶，小叶片为倒卵形或卵形，叶较薄，边缘有不规则的粗锯齿，一般一年生西洋参植株只有1枚3片小叶的复叶，二年生的有1枚或2枚对生的5片小叶的复叶，3-5年生的有3-5枚轮生5片小叶的复叶；花从茎顶中心抽出花薹，由许多小花组成伞形花序；浆果形状为扁圆形，呈对状分布，成熟后的颜色为鲜红;花期、果实成熟期分别为7月、9月。
3.现有的西洋参特征图谱构建中，需要对西洋参提取，现有的提取工艺简单，提取效率差，易影响检测和构建效率，降低了使用范围。


技术实现要素：

4.针对现有技术的缺陷，本发明的目的是提供一种西洋参uplc特征图谱构建方法及鉴别方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
5.本发明解决技术问题采用如下技术方案：本发明提供了一种西洋参uplc特征图谱构建方法，包括以下步骤：步骤一：将西洋参先捣碎，然后与西洋参总重量5-10%的蒙脱土改性剂混合均匀，加入西洋参总重量5-10重量倍的乙醇，搅拌充分；步骤二：加入西洋参总重量5-10%的纤维素酶，酶解处理；步骤三：先灭酶处理，然后加入步骤二的西洋参总重量5-10%的复配调节剂，搅拌充分；步骤四：先煮沸处理，煮沸时间10-15min，然后文火继续煮沸1-2h，煮沸结束，过滤、得到西洋参提取液，通过西洋参提取液构建西洋参的uplc特征图谱。
6.优选地，所述蒙脱土改性剂的制备方法为：s01：将蒙脱土按照重量比1:5加入到盐酸溶液中，搅拌分散均匀；s02：将1-3重量份硅烷偶联剂、0.2-0.5重量份壳聚糖加入到5-10重量份去离子水中，随后加入0.2-0.5重量份硫酸镧，搅拌充分，得到添加剂；s03：将添加剂加入到2-3重量倍的s01蒙脱土中，搅拌充分，水洗、干燥；s04：随后于310-320℃下煅烧10-20min，然后喷涂2-3重量倍重量的处理液，再以2-5℃/min的速率降至室温，即可。
7.优选地，所述处理液为纳米二氧化硅、水、磷酸缓冲溶液按照重量比1:5:1混合。
8.优选地，所述磷酸缓冲溶液的ph值为4.5。
9.优选地，所述硅烷偶联剂为硅烷偶联剂kh560。
10.优选地，所述盐酸溶液的质量分数为5-10%。
11.优选地，所述复配调节剂的制备方法为：将10-20重量份海藻酸钠溶液中加入1-5重量份纳米羟基磷灰石，搅拌均匀，然后加入0.2-0.4重量份羟基氨基酸、0.1-0.3重量份促溶解剂，搅拌充分，得到复配调节剂。
12.优选地，所述纳米羟基磷灰石的粒径为10-20nm。
13.优选地，所述促溶解剂为草酸钠。
14.一种西洋参uplc特征图谱构建方法的液相图谱鉴别处理。
15.与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：本发明对西洋参uplc特征图谱构建，通过蒙脱土改性剂在酶解中进行促进酶解，同时配合水提取，增强提取效率，通过复配调节剂促进蒙脱土改性剂对提取增效，进而增强化合物的提取效率，通过本发明的图谱构建方法，能够更充分的反映西洋参图谱中的化学成分信息。
具体实施方式
16.下面结合具体实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
17.本实施例的一种西洋参uplc特征图谱构建方法，包括以下步骤：步骤一：将西洋参先捣碎，然后与西洋参总重量5-10%的蒙脱土改性剂混合均匀，加入西洋参总重量5-10重量倍的乙醇，搅拌充分；步骤二：加入西洋参总重量5-10%的纤维素酶，酶解处理；步骤三：先灭酶处理，然后加入步骤二的西洋参总重量5-10%的复配调节剂，搅拌充分；步骤四：先煮沸处理，煮沸时间10-15min，然后文火继续煮沸1-2h，煮沸结束，过滤、得到西洋参提取液，通过西洋参提取液构建西洋参的uplc特征图谱。
18.本实施例的蒙脱土改性剂的制备方法为：s01：将蒙脱土按照重量比1:5加入到盐酸溶液中，搅拌分散均匀；s02：将1-3重量份硅烷偶联剂、0.2-0.5重量份壳聚糖加入到5-10重量份去离子水中，随后加入0.2-0.5重量份硫酸镧，搅拌充分，得到添加剂；s03：将添加剂加入到2-3重量倍的s01蒙脱土中，搅拌充分，水洗、干燥；s04：随后于310-320℃下煅烧10-20min，然后喷涂2-3重量倍重量的处理液，再以2-5℃/min的速率降至室温，即可。
19.本实施例的处理液为纳米二氧化硅、水、磷酸缓冲溶液按照重量比1:5:1混合。
20.本实施例的磷酸缓冲溶液的ph值为4.5。
21.本实施例的硅烷偶联剂为硅烷偶联剂kh560。
22.本实施例的盐酸溶液的质量分数为5-10%。
23.本实施例的复配调节剂的制备方法为：
将10-20重量份海藻酸钠溶液中加入1-5重量份纳米羟基磷灰石，搅拌均匀，然后加入0.2-0.4重量份羟基氨基酸、0.1-0.3重量份促溶解剂，搅拌充分，得到复配调节剂。
24.本实施例的纳米羟基磷灰石的粒径为10-20nm。
25.本实施例的促溶解剂为草酸钠。
26.本实施例的一种西洋参uplc特征图谱构建方法的液相图谱鉴别处理。
27.实施例1.本实施例的一种西洋参uplc特征图谱构建方法，包括以下步骤：步骤一：将西洋参先捣碎，然后与西洋参总重量5%的蒙脱土改性剂混合均匀，加入西洋参总重量5重量倍的乙醇，搅拌充分；步骤二：加入西洋参总重量5%的纤维素酶，酶解处理；步骤三：先灭酶处理，然后加入步骤二的西洋参总重量5%的复配调节剂，搅拌充分；步骤四：先煮沸处理，煮沸时间10min，然后文火继续煮沸1h，煮沸结束，过滤、得到西洋参提取液，通过西洋参提取液构建西洋参的uplc特征图谱。
28.本实施例的蒙脱土改性剂的制备方法为：s01：将蒙脱土按照重量比1:5加入到盐酸溶液中，搅拌分散均匀；s02：将1重量份硅烷偶联剂、0.2-0.5重量份壳聚糖加入到5-10重量份去离子水中，随后加入0.2-0.5重量份硫酸镧，搅拌充分，得到添加剂；s03：将添加剂加入到2-3重量倍的s01蒙脱土中，搅拌充分，水洗、干燥；s04：随后于310-320℃下煅烧10-20min，然后喷涂2-3重量倍重量的处理液，再以2℃/min的速率降至室温，即可。
29.本实施例的处理液为纳米二氧化硅、水、磷酸缓冲溶液按照重量比1:5:1混合。
30.本实施例的磷酸缓冲溶液的ph值为4.5。
31.本实施例的硅烷偶联剂为硅烷偶联剂kh560。
32.本实施例的盐酸溶液的质量分数为5%。
33.本实施例的复配调节剂的制备方法为：将10重量份海藻酸钠溶液中加入1重量份纳米羟基磷灰石，搅拌均匀，然后加入0.2重量份羟基氨基酸、0.1重量份促溶解剂，搅拌充分，得到复配调节剂。
34.本实施例的纳米羟基磷灰石的粒径为10nm。
35.本实施例的促溶解剂为草酸钠。
36.本实施例的一种西洋参uplc特征图谱构建方法的液相图谱鉴别处理。
37.实施例2.本实施例的一种西洋参uplc特征图谱构建方法，包括以下步骤：步骤一：将西洋参先捣碎，然后与西洋参总重量5%的蒙脱土改性剂混合均匀，加入西洋参总重量5重量倍的乙醇，搅拌充分；步骤二：加入西洋参总重量5%的纤维素酶，酶解处理；步骤三：先灭酶处理，然后加入步骤二的西洋参总重量10%的复配调节剂，搅拌充分；步骤四：先煮沸处理，煮沸时间10min，然后文火继续煮沸2h，煮沸结束，过滤、得到
西洋参提取液，通过西洋参提取液构建西洋参的uplc特征图谱。
38.本实施例的蒙脱土改性剂的制备方法为：s01：将蒙脱土按照重量比1:5加入到盐酸溶液中，搅拌分散均匀；s02：将3重量份硅烷偶联剂、0.5重量份壳聚糖加入到10重量份去离子水中，随后加入0.5重量份硫酸镧，搅拌充分，得到添加剂；s03：将添加剂加入到3重量倍的s01蒙脱土中，搅拌充分，水洗、干燥；s04：随后于320℃下煅烧20min，然后喷涂3重量倍重量的处理液，再以5℃/min的速率降至室温，即可。
39.本实施例的处理液为纳米二氧化硅、水、磷酸缓冲溶液按照重量比1:5:1混合。
40.本实施例的磷酸缓冲溶液的ph值为4.5。
41.本实施例的硅烷偶联剂为硅烷偶联剂kh560。
42.本实施例的盐酸溶液的质量分数为10%。
43.本实施例的复配调节剂的制备方法为：将20重量份海藻酸钠溶液中加入5重量份纳米羟基磷灰石，搅拌均匀，然后加入0.4重量份羟基氨基酸、0.3重量份促溶解剂，搅拌充分，得到复配调节剂。
44.本实施例的纳米羟基磷灰石的粒径为20nm。
45.本实施例的促溶解剂为草酸钠。
46.本实施例的一种西洋参uplc特征图谱构建方法的液相图谱鉴别处理。
47.实施例3.本实施例的一种西洋参uplc特征图谱构建方法，包括以下步骤：步骤一：将西洋参先捣碎，然后与西洋参总重量7.5%的蒙脱土改性剂混合均匀，加入西洋参总重量7.5重量倍的乙醇，搅拌充分；步骤二：加入西洋参总重量7.5%的纤维素酶，酶解处理；步骤三：先灭酶处理，然后加入步骤二的西洋参总重量7.5%的复配调节剂，搅拌充分；步骤四：先煮沸处理，煮沸时间12.5min，然后文火继续煮沸1.5h，煮沸结束，过滤、得到西洋参提取液，通过西洋参提取液构建西洋参的uplc特征图谱。
48.本实施例的蒙脱土改性剂的制备方法为：s01：将蒙脱土按照重量比1:5加入到盐酸溶液中，搅拌分散均匀；s02：将2重量份硅烷偶联剂、0.35重量份壳聚糖加入到7.5重量份去离子水中，随后加入0.35重量份硫酸镧，搅拌充分，得到添加剂；s03：将添加剂加入到2.5重量倍的s01蒙脱土中，搅拌充分，水洗、干燥；s04：随后于315℃下煅烧15min，然后喷涂2.5重量倍重量的处理液，再以3.5℃/min的速率降至室温，即可。
49.本实施例的处理液为纳米二氧化硅、水、磷酸缓冲溶液按照重量比1:5:1混合。
50.本实施例的磷酸缓冲溶液的ph值为4.5。
51.本实施例的硅烷偶联剂为硅烷偶联剂kh560。
52.本实施例的盐酸溶液的质量分数为7.5%。
53.本实施例的复配调节剂的制备方法为：
将15重量份海藻酸钠溶液中加入3重量份纳米羟基磷灰石，搅拌均匀，然后加入0.3重量份羟基氨基酸、0.2重量份促溶解剂，搅拌充分，得到复配调节剂。
54.本实施例的纳米羟基磷灰石的粒径为15nm。
55.本实施例的促溶解剂为草酸钠。
56.本实施例的一种西洋参uplc特征图谱构建方法的液相图谱鉴别处理。
57.实施例4.本实施例的一种西洋参uplc特征图谱构建方法，包括以下步骤：步骤一：将西洋参先捣碎，然后与西洋参总6%的蒙脱土改性剂混合均匀，加入西洋参总重量6重量倍的乙醇，搅拌充分；步骤二：加入西洋参总重量6%的纤维素酶，酶解处理；步骤三：先灭酶处理，然后加入步骤二的西洋参总重量6%的复配调节剂，搅拌充分；步骤四：先煮沸处理，煮沸时间11min，然后文火继续煮1.1h，煮沸结束，过滤、得到西洋参提取液，通过西洋参提取液构建西洋参的uplc特征图谱。
58.本实施例的蒙脱土改性剂的制备方法为：s01：将蒙脱土按照重量比1:5加入到盐酸溶液中，搅拌分散均匀；s02：将1.2重量份硅烷偶联剂、0.3重量份壳聚糖加入到6重量份去离子水中，随后加入0.3重量份硫酸镧，搅拌充分，得到添加剂；s03：将添加剂加入到2.2重量倍的s01蒙脱土中，搅拌充分，水洗、干燥；s04：随后于312℃下煅烧12min，然后喷涂2.2重量倍重量的处理液，再以3℃/min的速率降至室温，即可。
59.本实施例的处理液为纳米二氧化硅、水、磷酸缓冲溶液按照重量比1:5:1混合。
60.本实施例的磷酸缓冲溶液的ph值为4.5。
61.本实施例的硅烷偶联剂为硅烷偶联剂kh560。
62.本实施例的盐酸溶液的质量分数为6%。
63.本实施例的复配调节剂的制备方法为：将12重量份海藻酸钠溶液中加入2重量份纳米羟基磷灰石，搅拌均匀，然后加入0.3重量份羟基氨基酸、0.2重量份促溶解剂，搅拌充分，得到复配调节剂。
64.本实施例的纳米羟基磷灰石的粒径为12nm。
65.本实施例的促溶解剂为草酸钠。
66.本实施例的一种西洋参uplc特征图谱构建方法的液相图谱鉴别处理。
67.实施例5.本实施例的一种西洋参uplc特征图谱构建方法，包括以下步骤：步骤一：将西洋参先捣碎，然后与西洋参总重量8%的蒙脱土改性剂混合均匀，加入西洋参总重量8重量倍的乙醇，搅拌充分；步骤二：加入西洋参总重量8%的纤维素酶，酶解处理；步骤三：先灭酶处理，然后加入步骤二的西洋参总重量8%的复配调节剂，搅拌充分；步骤四：先煮沸处理，煮沸时间12min，然后文火继续煮沸1.8h，煮沸结束，过滤、得
到西洋参提取液，通过西洋参提取液构建西洋参的uplc特征图谱。
68.本实施例的蒙脱土改性剂的制备方法为：s01：将蒙脱土按照重量比1:5加入到盐酸溶液中，搅拌分散均匀；s02：将2重量份硅烷偶联剂、0.45重量份壳聚糖加入到8重量份去离子水中，随后加入0.4重量份硫酸镧，搅拌充分，得到添加剂；s03：将添加剂加入到2.8重量倍的s01蒙脱土中，搅拌充分，水洗、干燥；s04：随后于318℃下煅烧18min，然后喷涂2.8重量倍重量的处理液，再以4℃/min的速率降至室温，即可。
69.本实施例的处理液为纳米二氧化硅、水、磷酸缓冲溶液按照重量比1:5:1混合。
70.本实施例的磷酸缓冲溶液的ph值为4.5。
71.本实施例的硅烷偶联剂为硅烷偶联剂kh560。
72.本实施例的盐酸溶液的质量分数为8%。
73.本实施例的复配调节剂的制备方法为：将18重量份海藻酸钠溶液中加入4重量份纳米羟基磷灰石，搅拌均匀，然后加入0.35重量份羟基氨基酸、0.25重量份促溶解剂，搅拌充分，得到复配调节剂。
74.本实施例的纳米羟基磷灰石的粒径为15nm。
75.本实施例的促溶解剂为草酸钠。
76.本实施例的一种西洋参uplc特征图谱构建方法的液相图谱鉴别处理。
77.对比例1.与实施例3不同是未添加蒙脱土改性剂。
78.对比例2.与实施例3不同是蒙脱土改性剂采用蒙脱石代替。
79.对比例3.与实施例3不同是蒙脱土改性剂的制备方法中未采用添加剂处理。
80.对比例4.与实施例3不同是未加入复配调节剂。
81.对比例5.与实施例3不同是复配调节剂制备中未加入纳米羟基磷灰石。
82.通过实施例1-5及对比例1-5中的测试看出，采用本发明的实施例数据可增加提取物的分离程度，获得的液相图谱化合物的分离程度好，化合物数量多。
83.对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
84.此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。