一种WesternBlo制胶器的制作方法

本发明涉及凝胶制备，特别是涉及一种westernblo制胶器。

背景技术：

1、western blot也是蛋白质印迹法，它是分子生物学、生物化学以及免疫遗传学中常用的方法。其基本原理是细胞或生物组织样品经凝胶电泳处理后，采用特异性的抗体对其进行着色。通过分析着色的位置和着色深度从而确定特定的蛋白质在该样品中的表达情况。

2、在实际应用中，首先要根据蛋白混合样品的分子量大小范围，以及最终要检测的目的蛋白分子量来确定所需要制备的sds-page凝胶参数，制备好sds-page凝胶后，将蛋白混合样品经该凝胶电泳分离，之后通过蛋白质电印记法将凝胶中的蛋白转移至化学惰性的高分子膜上，再通过需要检测的目的蛋白的抗体(一抗)与膜上目的蛋白免疫结合，后经标记的(如hrp)二级抗体与一抗结合，通过对二抗的标记物检测来明确目的蛋白的存在和丰度。

3、常规的sds-page胶的配制一般用到8种试剂：去离子水、丙烯酰胺(acr)、甲叉双丙烯酰胺(bis)、tris碱、hcl、过硫酸铵(ap)、temed。提前配制成4种试剂，分别为：30％丙烯酰胺溶液(丙烯酰胺：甲叉双丙烯酰胺质量比为29：1)，ph8.8的分离胶缓冲液，ph6.8的浓缩胶缓冲液以及10％的(m/v)的过硫酸铵溶液。temed一般为商品化试剂。

4、常规制备sds-page凝胶配制包含三个阶段：1)根据需要分离的目的蛋白的分子量区间，选择相应的sds-page体系，如10％，12％，15％等不同浓度的分离胶；2)按所选体系配制相应浓度的分离胶，在temed加入后快速混匀，沿制胶板侧边灌注分离胶溶液，至第二玻板上缘1.5cm处。后将异丙醇(或者去离子水)覆盖在分离胶液上，约30-60min后分离胶和异丙醇层交界面会有清晰直线，表明分离胶聚合充分。此时将制胶板倾斜，用滤纸吸净残留液体；3)按所选体系配制相应浓度的浓缩胶，在temed加入后快速混匀，沿制胶板侧边灌注浓缩胶溶液至短玻板顶部，尽快插入样品梳。约15-30min后制胶完成，可进行电泳。

5、由于在实际的操作中，由于跑的样品多，常常需要同时配制很多sds-page凝胶，一般由纯手工操作，但由此带来两个问题：一是由于配胶板口较窄，灌注量小，操作慢，由此造成灌注时间过长而使得胶液还未灌注完就凝固的情况。尤其是灌注浓缩胶时，未及插样品梳浓缩胶就已凝固的情况屡见不鲜。二是手工灌注很多块胶，常常有分离胶高度不一致的问题，尤其是使用时间长的制胶模具，漏胶不可避免。不同高度的分离胶会导致目的蛋白停留的位置不同，影响后续条带分析。因此，急需一种能高效简单、省时省力的制胶装置，能满足同时多块制胶的需要。

6、申请号cn 111545138a的专利给出一套自动化的制胶系统，但过于复杂，不便于操作；申请号cn 217910206u的专利在cn 111545138a的专利的基础上进行了优化，但还是很繁琐，而且整个制胶体系统太过庞大，占空间且不易清理；申请号cn 211785304u的专利主要针对漏胶现象做的改进，仅限于制备单块sds-page凝胶；申请号cn 103013982a仅提供一种新的sds-page凝胶配制方案，不涉及制胶装置。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种高效简单、省时省力的westernblo制胶器，既能满足同时多块制胶的需要，又保证操作简便，易于清理还不占空间。

2、为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

3、本发明提供了一种western blo制胶器，包括制胶底座、灌注插件和若干制胶板，所述制胶底座设置有第一加液槽，若干所述制胶板位于所述制胶底座中，且所述第一加液槽与各所述制胶板的内部空间连通，所述制胶板的两端分别设置有一所述灌注插件，所述灌注插件包括加液结构和若干样品梳，所述加液结构设置有第二加液槽，所述第二加液槽与各所述制胶板的内部空间连通，所述样品梳与所述加液结构能够拆卸地连接，各所述样品梳能够插入相应的所述制胶板的内部空间中。

4、优选地，所述制胶底座还包括底座和横向收紧门，所述横向收紧门铰接在所述底座的一侧，所述底座的一端设置有所述第一加液槽，所述底座内设置有若干底部胶条，相邻的所述底部胶条、最外侧的所述底部胶条与所述横向收紧门之间均形成胶板槽，所述制胶板的底部设置在所述胶板槽中，各所述第一加液槽的底部与所述胶板槽、所述制胶板的内部空间连通，所述横向收紧门用于将各所述制胶板与所述底部胶条紧密接触。

5、优选地，所述底座的内部设置有若干固定卡口，所述制胶板与所述固定卡口滑动连接。

6、优选地，各所述灌注插件还包括若干出液口，若干所述出液口位于所述灌注插件的底部，若干所述出液口分别与所述第二加液槽连通，各所述出液口与各所述制胶板的内部空间一一对应且连通。

7、优选地，所述灌注插件还包括支架，各所述加液结构还包括横板，各所述横板位于所述第二加液槽的内侧，所述横板与所述支架能够拆卸地连接，所述支架与各所述样品梳能够拆卸地连接，各所述第二加液槽的外侧设置有若干竖向凹槽，所述支架与所述竖向凹槽滑动连接。

8、优选地，所述制胶板包括第一玻板和第二玻板，所述第一玻板设置在所述第二玻板的一侧，所述第一玻板和所述第二玻板的下端平齐，所述第二玻板的上端低于所述第一玻板的上端，所述第一玻板的两端向所述第二玻板方向延伸有凸起，所述凸起与所述第二玻板连接，所述第一玻板、所述第二玻板和所述凸起使得所述制胶板形成内部空间。

9、优选地，各所述胶板槽中均设置有第一基座和第二基座，所述第一基座与所述第一玻板的底部接触，所述第二基座与所述第二玻板的底部接触。

10、优选地，各所述凸起的上部的内侧设置有斜坡，所述灌注插件的所述出液口具有斜面，所述灌注插件的所述出液口的斜面与所述凸起的斜坡贴合。

11、优选地，所述支架包括连接器和若干横杆，各所述横杆通过连接器连接，各所述横杆的两端分别与所述竖向凹槽滑动连接，各所述横杆的上侧设置有磁吸，所述横板与所述磁吸对应的位置设置有第一铁片，各所述样品梳分别设置在一所述横杆的下方并与所述横杆能够拆卸地连接。

12、本发明相对于现有技术取得了以下技术效果：

13、本发明的底座和固定板将制胶板固定竖立在容器腔内，并通过胶条逐一分开制胶板；第一加液槽与底座相连组成连通器样结构，灌注时所有制胶板中的分离胶高度一致，极大保证sds-page凝胶的均一性；灌注插件除了将浓缩胶液引流至制胶板，还能给每块胶同时插入样品梳，保证所制胶的均一性，大大简化操作步骤，节约操作时间。综上所述，本发明装置结构简单，便捷可靠，为实现westernblot同时多块制胶提供方便，解决了同时快速制备多块均一的sds-page凝胶这一问题。

技术特征：

1.一种western blo制胶器，其特征在于：包括制胶底座、灌注插件和若干制胶板，所述制胶底座设置有第一加液槽，若干所述制胶板位于所述制胶底座中，且所述第一加液槽与各所述制胶板的内部空间连通，所述制胶板的两端分别设置有一所述灌注插件，所述灌注插件包括加液结构和若干样品梳，所述加液结构设置有第二加液槽，所述第二加液槽与各所述制胶板的内部空间连通，所述样品梳与所述加液结构能够拆卸地连接，各所述样品梳能够插入相应的所述制胶板的内部空间中。

2.根据权利要求1所述的western blo制胶器，其特征在于：所述制胶底座还包括底座和横向收紧门，所述横向收紧门铰接在所述底座的一侧，所述底座的一端设置有所述第一加液槽，所述底座内设置有若干底部胶条，相邻的所述底部胶条、最外侧的所述底部胶条与所述横向收紧门之间均形成胶板槽，所述制胶板的底部设置在所述胶板槽中，各所述第一加液槽的底部与所述胶板槽、所述制胶板的内部空间连通，所述横向收紧门用于将各所述制胶板与所述底部胶条紧密接触。

3.根据权利要求2所述的western blo制胶器，其特征在于：所述底座的内部设置有若干固定卡口，所述制胶板与所述固定卡口滑动连接。

4.根据权利要求2所述的western blo制胶器，其特征在于：各所述灌注插件还包括若干出液口，若干所述出液口位于所述灌注插件的底部，若干所述出液口分别与所述第二加液槽连通，各所述出液口与各所述制胶板的内部空间一一对应且连通。

5.根据权利要求1所述的western blo制胶器，其特征在于：所述灌注插件还包括支架，各所述加液结构还包括横板，各所述横板位于所述第二加液槽的内侧，所述横板与所述支架能够拆卸地连接，所述支架与各所述样品梳能够拆卸地连接，各所述第二加液槽的外侧设置有若干竖向凹槽，所述支架与所述竖向凹槽滑动连接。

6.根据权利要求4所述的western blo制胶器，其特征在于：所述制胶板包括第一玻板和第二玻板，所述第一玻板设置在所述第二玻板的一侧，所述第一玻板和所述第二玻板的下端平齐，所述第二玻板的上端低于所述第一玻板的上端，所述第一玻板的两端向所述第二玻板方向延伸有凸起，所述凸起与所述第二玻板连接，所述第一玻板、所述第二玻板和所述凸起使得所述制胶板形成内部空间。

7.根据权利要求6所述的western blo制胶器，其特征在于：各所述胶板槽中均设置有第一基座和第二基座，所述第一基座与所述第一玻板的底部接触，所述第二基座与所述第二玻板的底部接触。

8.根据权利要求6所述的western blo制胶器，其特征在于：各所述凸起的上部的内侧设置有斜坡，所述灌注插件的所述出液口具有斜面，所述灌注插件的所述出液口的斜面与所述凸起的斜坡贴合。

9.根据权利要求5所述的western blo制胶器，其特征在于：所述支架包括连接器和若干横杆，各所述横杆通过连接器连接，各所述横杆的两端分别与所述竖向凹槽滑动连接，各所述横杆的上侧设置有磁吸，所述横板与所述磁吸对应的位置设置有第一铁片，各所述样品梳分别设置在一所述横杆的下方并与所述横杆能够拆卸地连接。

技术总结
本发明公开了一种WesternBlo制胶器，涉及凝胶制备技术领域，包括制胶底座、灌注插件和若干制胶板，所述制胶底座设置有第一加液槽，若干所述制胶板位于所述制胶底座中，且所述第一加液槽与各所述制胶板的内部空间连通，所述制胶板的两端分别设置有一所述灌注插件，所述灌注插件包括加液结构和若干样品梳，所述加液结构设置有第二加液槽，所述第二加液槽与各所述制胶板的内部空间连通，所述样品梳与所述加液结构能够拆卸地连接，各所述样品梳能够插入相应的所述制胶板的内部空间中。本发明提供了一种高效简单、省时省力的WesternBlo制胶器，既能满足同时多块制胶的需要，又保证操作简便，易于清理还不占空间。

技术研发人员：冯悦华,邢兆宇,杜玲芳,罗光华,喻妙梅,王斌,张银
受保护的技术使用者：常州市第一人民医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13