一种辅助降血压类保健食品和/或中成药中可能添加的25种化学药物定性定量测定方法与流程

本发明涉及化学药物检测，尤其涉及一种辅助降血压类保健食品和/或中成药中可能添加的25种化学药物定性定量测定方法。

背景技术：

1、高血压(hypertension)是指以体内循环动脉血压(收缩压、舒张压)升高为主要特征，并伴有心、脑、肾等器官的功能或器质性损伤的临床综合征，是继糖尿病又一常见的慢性疾病也是心脑血管疾病的最主要危险因素之一。鉴于治疗高血压的合成化学药物常伴随有副作用，而这些由中药中提取的“纯天然”保健食品却不含有任何化学药物成分，不会对人体造成毒副作用，因此这些宣称具有辅助降血压的保健食品备受消费者的青睐。然而，不法商贩为了牟取暴利，利用消费者对保健食品的信赖，在这类型保健品中随意添加具有降血压作用的化学药物，若被消费者长期服用不但会耽误患者病情还会给其身心带来严重伤害，同时也给保健食品的非法添加监管带来了巨大的挑战。

2、目前临床上降压类药物有很多，按结构和药理作用主要分为：1)利尿剂(氢氯噻嗪、呋噻米)；2)α受体阻断剂(盐酸可乐定、利美尼定)；3)β受体阻断剂(普萘洛尔、阿替洛尔)；4)钙离子拮抗剂(二氢吡啶类：硝苯地平、氨氯地平；非二氢吡啶类：地尔硫卓、维拉帕米)；5)肾素血管紧张素-醛固酮系统抑制剂(血管紧张素ⅱ受体拮抗剂：坎地沙坦、阿利沙坦)；血管紧张素转换酶抑制剂(卡托普利、依那普利)。查询文献得知，检测此类保健食品中非法添加物涉及到的检测方法有薄层色谱法、表面增强拉曼光谱法、高效液相色谱法、超/高效液相-质谱法等。而这些方法效率低、方法复杂，不足以满足检测需求。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种辅助降血压类保健食品和/或中成药中可能添加的25种化学药物定性定量测定方法，建立了一种高效、准确、高通量检测保健食品中非法添加25种化学药物的高效液相-四极杆/轨道阱高分辨质谱检测方法。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

3、本发明提供了一种辅助降血压类保健食品和/或中成药中可能添加的25种化学药物定性定量测定方法，包括以下步骤：

4、(1)分别配制25种化学药品的单品标准储备溶液；

5、(2)将25种化学药品的单品标准储备溶液分别与甲酸混合溶液配制每种化学药物的系列浓度标准工作液，进行高效液相-四极杆/轨道阱高分辨质谱仪测定，以质量浓度为横坐标，对应的定量离子峰面积为为纵坐标，分别绘制上述25种化学药品的线性方程；

6、(3)供试品与甲醇混合，超声，取上清，滤膜过滤，取滤液高效液相-四极杆/轨道阱高分辨质谱仪测定；记录供试品中各化合物的色谱保留时间及一级、二级质谱图，若与标准品色谱图的保留时间一致，且与标准品的母离子精确分子量误差不超过5×10-6，二级离子碎片丰度比与标准品一致，即可判定该样品中检出相应的目标化合物，将供试品定量离子峰面积带入线性方程计算含量。

7、作为优选，步骤(1)中所述25种化学药品为阿替洛尔、盐酸可乐定、氢氯噻嗪、卡托普利、盐酸哌唑嗪、利血平、硝苯地平、苯磺酸氨氯地平、尼群地平、尼莫地平、尼索地平、非洛地平、坎地沙坦酯、奥美沙坦酯、阿利沙坦酯、替米沙坦酯、厄贝沙坦酯、氯沙坦钾、缬沙坦、他索沙坦、非马沙坦、阿奇沙坦、阿奇沙坦酯、依普罗沙坦、美托拉宗。

8、作为优选，步骤(1)中所述配制25种化学药品的单品标准储备溶液包括以下步骤：

9、25种化学药品分别与甲醇按照1mg～10mg：1ml～10ml的比例混合，240～260w，36～40khz超声处理8～12min，即得25种化学药品的1mg/ml的单品标准储备溶液。

10、作为优选，步骤(1)中所述25种化学药品的单品标准储备溶液稀释至100ng/ml。

11、作为优选，步骤(2)中所述甲酸混合溶液为甲酸水溶液与甲酸乙腈溶液按照体积比8.5～9.5:1混合。

12、作为优选，步骤(2)中所述甲酸水溶液中甲酸的体积分数为0.08～0.12％，甲酸乙腈溶液中甲酸的体积分数为0.08～0.12％。

13、作为优选，步骤(3)中所述供试品与甲醇混合的比例为供试品单次服用量与50ml甲醇混合；所述超声功率为240～260w，所述超声的频率为36～40khz，所述超声的时间为13～17min。

14、作为优选，步骤(3)中所述上清通过离心获得，所述离心的转速为7000～9000r/min，所述离心的时间为3～7min。

15、作为优选，步骤(3)中所述滤膜的孔径为0.20～0.24μm。

16、作为优选，步骤(3)中高效液相-四极杆/轨道阱高分辨质谱仪测定的色谱条件为：

17、色谱柱：thermosyncronisc18色谱柱(100mm×2.1mm，1.7μm)；

18、柱温：25℃；

19、流动相：0.1％甲酸水溶液(a)、0.1％甲酸乙腈溶液(b)；

20、进样量：5μl；

21、体积流量：0.3ml/min；

22、梯度洗脱程序：共20min；0～1min，90％a；1～3min，90％～35％a；3～5min，35％a；5～5.1min，35％～10％a；5.1～8min，10％a；8～8.1min，90％～10％a；8.1～20min，10％a；

23、质谱条件为：

24、离子源：电喷雾电离离子源(esi)；扫描方式：正负离子扫描；全扫描分辨率140000(一级35000；二级17500)；检测方式：平行反应监测(prm)；喷雾电压：正离子3500v，负离子3000v；离子源温度：320℃；离子传输管温度：350℃；鞘气流速：30l/hr；辅助气流速：8l/hr；自动增益控制2×105；离子驻留时间100ms；隔离窗2.0m/z；25种降压类化合物的其它质谱采集参数如下表：

25、

26、

27、

28、*为定量离子。

29、本发明提供了一种辅助降血压类保健食品和/或中成药中可能添加的25种化学药物定性定量测定方法，涉及化学药物检测技术领域，包括以下步骤：(1)分别配制25种化学药品的单品标准储备溶液，稀释，混合，制备得混合标准溶液；(2)将25种化学药品的单品标准储备溶液分别与甲酸混合溶液配制每种化学药物的系列浓度标准工作液，进行高效液相-四极杆/轨道阱高分辨质谱仪测定，分别绘制上述25种化学药品的线性方程；(3)供试品与甲醇混合，超声，取上清，滤膜过滤，取滤液高效液相-四极杆/轨道阱高分辨质谱仪测定。根据保留时间、一级及二级质谱定性，峰面积带入线性方程定量。本发明建立了一种高效、准确、高通量检测保健食品中添加25种化学药物的高效液相-四极杆/轨道阱高分辨质谱检测方法。

技术特征：

1.一种辅助降血压类保健食品和/或中成药中可能添加的25种化学药物定性定量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述25种化学药品为阿替洛尔、盐酸可乐定、氢氯噻嗪、卡托普利、盐酸哌唑嗪、利血平、硝苯地平、苯磺酸氨氯地平、尼群地平、尼莫地平、尼索地平、非洛地平、坎地沙坦酯、奥美沙坦酯、阿利沙坦酯、替米沙坦酯、厄贝沙坦酯、氯沙坦钾、缬沙坦、他索沙坦、非马沙坦、阿奇沙坦、阿奇沙坦酯、依普罗沙坦、美托拉宗。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述配制25种化学药品的单品标准储备溶液包括以下步骤：

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述25种化学药品的单品标准储备溶液稀释至100ng/ml。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述甲酸混合溶液为甲酸水溶液与甲酸乙腈溶液按照体积比8.5～9.5:1混合。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述甲酸水溶液中甲酸的体积分数为0.08～0.12％，甲酸乙腈溶液中甲酸的体积分数为0.08～0.12％。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述供试品与甲醇混合的比例为供试品单次服用量与50ml甲醇混合；所述超声功率为240～260w，所述超声的频率为36～40khz，所述超声的时间为13～17min。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述上清通过离心获得，所述离心的转速为7000～9000r/min，所述离心的时间为3～7min。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述滤膜的孔径为0.20～0.24μm。

10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中高效液相-四极杆/轨道阱高分辨质谱仪测定的色谱条件为：

技术总结
本发明提供了一种辅助降血压类保健食品和/或中成药中可能添加的25种化学药物定性定量测定方法，涉及化学药物检测技术领域，包括以下步骤：(1)分别配制25种化学药品的单品标准储备溶液，稀释，混合，制备得混合标准溶液；(2)将25种化学药品的单品标准储备溶液分别与甲酸混合溶液配制每种化学药物的系列浓度标准工作液，进行高效液相‑四极杆/轨道阱高分辨质谱仪测定，分别绘制上述25种化学药品的线性方程；(3)供试品与甲醇混合，超声，取上清，滤膜过滤，取滤液高效液相‑四极杆/轨道阱高分辨质谱仪测定。本发明建立了一种高效、准确、高通量检测保健食品中添加25种化学药物的高效液相‑四极杆/轨道阱高分辨质谱检测方法。

技术研发人员：董培智,刘晓普,张禄,赵丽红,申国华,任静
受保护的技术使用者：山西省检验检测中心（山西省标准计量技术研究院）
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15