一种金松止痒组合物的指纹图谱质量控制方法与流程

本发明涉及中药质量控制领域，具体涉及一种金松止痒组合物的指纹图谱质量控制方法。

背景技术：

1、金松止痒洗液(国药准字b20020210)由白鲜皮、千里光等9味中药组成，具有清热祛湿、杀虫止痒之功效，用于治疗成年女性外阴炎、湿热带下、外阴及皮肤瘙痒等症。指纹图谱技术是全球公认的控制复杂系统质量的最有效手段，在中药或天然药物质量的成分测定和真实性鉴别中具有重要意义。人们已经逐步认识到，只针对某一化学成分而形成的质量控制方法，已不能恰当地反映产品内在质量，而要解决这一难题的有效手段就是建立创新质量控制方法和标准制剂的特征指纹图谱控制模式，加强中药质量评价的科学化与标准化。因此，构建金松止痒洗液多维指纹图谱(高效液相指纹图谱、uv指纹图谱、傅里叶红外指纹图谱、电化学指纹图谱和dsc指纹图谱)并采用标准制剂的五种标准指纹图谱评价模式对金松止痒洗液进行多维质量控制就显得尤为重要。

2、因为中药具有复杂性，所以发明人在克服相关技术难题后，研发出了金松止痒洗液标准制剂的五种特征指纹图谱和质量一致性评价方法。它是建立在对极性大成分、中等极性和低极性成分等全部组分基础上的整体质量控制。

技术实现思路

1、本发明的目的在于，提供一种金松止痒组合物的指纹图谱质量控制方法。本发明提供了金松止痒洗液标准制剂的五种特征指纹图谱和质量一致性评价方法，本发明使用了宏定量相似度来控制金松止痒洗液制剂的总药效物质的幅度范围和质量一致性。

2、本发明的技术内容如下：

3、所述的金松止痒组合物的指纹图谱质量控制方法，包括高效液相色谱仪进行梯度洗脱并测定；

4、所述的高效液相色谱条件为：

5、色谱柱：c18色谱柱；

6、检测波长：220nm、234nm、250nm、280nm、344nm；

7、流动相：流动相a为含有0.005mol/l庚烷磺酸钠的0.2％磷酸的水溶液，流动相b为体积比为9：1的乙腈-甲醇溶液，采用梯度洗脱，洗脱程序如下：

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10、所述的c18色谱柱为cosmosil 5c18-ms-ii填充柱，规格为：5μm，250mm×4.6mm；色谱柱温度为30-40℃；所述的流动相流速为0.8-1.5ml/min。

11、所述组合物由以下药材制成：千里光、白鲜皮、大叶桉叶、金银花、黄芩、土茯苓、蛇床子、松叶、甘草。

12、所述组合物制备成金松止痒洗液时，其特征在于，供试品溶液的制备方法包括以下步骤：

13、取金松止痒洗液直接过0.45μm滤膜，取续滤液，得供试品溶液。

14、对照品溶液制备方法包括以下步骤：

15、分别取没食子酸对照品，绿原酸对照品，异绿原酸c对照品，黄芩苷对照品，汉黄芩苷对照品，梣酮对照品，蛇床子素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含100-150μg没食子酸，40-60μg绿原酸，4-6μg异绿原酸c，200-250μg黄芩苷，20-40μg汉黄芩苷，50-90μg梣酮，30-50μg蛇床子素的混合对照品溶液，摇匀，即得。

16、指纹图谱建立过程如下：

17、分取参照物溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，确定供试品色谱图中的没食子酸，绿原酸，异绿原酸c，黄芩苷，汉黄芩苷，梣酮，蛇床子素，以黄芩苷为参照物峰；在220nm，234nm，250nm，280nm，344nm下检测，分别得到17、30、17、16和10个特征峰，供试品特征图谱与对照品溶液的标准特征图谱的宏定性相似度不得低于0.90，宏定量相似度应在80％到120％之间。

18、所述的220nm检测的标准制剂指纹图谱特征峰如下：

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21、所述的234nm检测的标准制剂指纹图谱特征峰如下：

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23、所述的250nm检测的标准制剂指纹图谱特征峰如下：

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26、所述的280nm检测的标准制剂指纹图谱特征峰如下：

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28、所述的344nm检测的标准制剂指纹图特征峰如下：

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30、所述的金松止痒组合物的指纹图谱质量控制方法，还包括针对金松止痒洗液的uv检测方法，包括如下步骤：

31、a、供试品溶液制备

32、取金松止痒洗液样品稀释10倍，过0.45μm滤膜，取续滤液，得供试品溶液；

33、b、uv色谱条件

34、以空心聚醚醚酮管5000mm×0.12mm代替色谱柱；流动相a为含有0.005mol/l庚烷磺酸钠的0.2％磷酸的水溶液，流动相b为体积比为9：1的乙腈-甲醇溶液，流动相a和b以比例1：1进行梯度洗脱；检测波长为220nm，234nm，250nm，280nm，344nm，柱温为40-50℃，流速为每分钟0.4-0.6ml；

35、c、uv指纹图谱检查方法

36、取参照物溶液与供试品溶液各2μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图及光谱图，供试品uv特征图谱与uv对照品溶液的标准特征图谱的宏定性相似度不得低于0.90，宏定量相似度应在80％到120％之间。

37、所述的金松止痒组合物的指纹图谱质量控制方法，还包括针对金松止痒洗液的ft-ir指纹图谱检测方法，包括如下步骤：

38、a、制备供试品

39、将金松止痒洗液烘干为粉末，将粉末在100℃的鼓风干燥箱中干燥30min，取出置于含有五氧化二磷干燥剂的玻璃干燥器中储存；将样品以1/12的重量比例与kbr共置于玛瑙研钵中，沿同一方向研磨，混合均匀，然后将混合物在15mpa压力下压缩3min，形成一个均匀透明晶片，取出，即得；

40、b、制备空白样品

41、不加入金松止痒洗液样品，只取用kbr，其余步骤平行制备，在15mpa压力下压3min，形成一个均匀的薄的透明溴化钾晶片，取出，即得；

42、c、实验条件

43、分别取金松止痒洗液供试品晶片与空白kbr晶片放入ican9傅里叶变换红外光谱仪测定，记录混合物在4000-400cm-1波数范围的红外吸收光谱，供试品ft-ir特征图谱与fr-ir对照品溶液的标准特征图谱的宏定性相似度不得低于0.90，宏定量相似度应在80％到120％之间。

44、所述的金松止痒组合物的指纹图谱质量控制方法，还包括针对金松止痒洗液的电化学指纹图谱检测方法，包括如下步骤：

45、a、化学振荡体系溶液的准备：

46、配置出3mol/l硫酸溶液、0.2mol/l硫酸溶液、0.4mol/l丙二酸溶液、0.02mol/l硫酸铈铵溶液、0.3mol/l溴酸钾溶液，备用；

47、b、供试品的制备

48、精密量取金松止痒洗液样品1.0ml置于10ml容量瓶中，加入纯净水定容至刻度，摇匀，使之充分混合，作供试品；

49、c、实验条件

50、以hg/hg2cl2/kcl为参比电极，以铂电极为工作电极，df-101s集热式恒温加热磁力搅拌器的转速为400转/分，水浴温度为37℃，化学振荡体系中各溶液的加入量按下表；

51、 溶液 3mol/l硫酸 0.4mol/l丙二酸 0.02mol/l硫酸铈铵 0.3mol/l溴酸钾 样品/ml 加入(ml) 12.0 6.0 3.0 3.0 1.5

52、d、电化学指纹图谱检查方法

53、取金松止痒洗液供试品溶液1.5ml，测定电化学指纹图谱，记录指纹图谱,供试品电化学特征指纹图谱与电化学标准特征指纹图谱的宏定性相似度不得低于0.90，宏定量相似度应在80％～120％之间。

54、所述的金松止痒组合物的指纹图谱质量控制方法，还包括针对金松止痒洗液的dsc指纹图谱检测方法，包括如下步骤：

55、a、检测条件

56、采用梯度升温程序：40-500℃为15℃/min，500℃恒温5min。气氛为空气；

57、b、dsc指纹图谱检查方法

58、将金松止痒洗液烘干为粉末,精密称取6mg金松止痒洗液干燥粉末于铝制坩埚中，放入热天平测定，记录热流率变化，供试品dsc特征图谱与dsc对照品溶液的标准特征图谱的宏定性相似度不得低于0.90，宏定量相似度应在80％到120％之间。

59、本发明的有益效果：

60、本发明实现了金松止痒组合物，尤其是其洗液制剂整体质量控制模式与控制方法，建立了金松止痒洗液的标准制剂的五种特征指纹图谱控制模式。金松止痒洗液质量最终以五种指纹图谱的宏定性相似度的均值应大于0.90，其五种指纹图谱的宏定量相似度的均值应在80％到120％之间。

61、本发明建立基于多指标成分的非挥发性物质质量标准，可精确控制与评价金松止痒洗液的质量，弥补了现行质量控制方法的不足。

62、本发明的方法具有良好的可行性、稳定性和重现性。