一种替普瑞酮异构体的检测方法与流程

本发明属于药物检测，具体涉及一种替普瑞酮异构体的检测方法。

背景技术：

1、替普瑞酮(teprenone)是消化系统药物制酸及胃粘膜保护药物，化学名为6,10,14,18-四甲基-5,9,13,17-十九碳四烯-2-酮；替普瑞酮实际为单顺式(5z,9e,13e)和全反式(5e,9e,13e)几何异构体的混合物，化学结构信息如下：

2、

3、有资料表明替普瑞酮混合物中起主要药效作用的是全反式结构，即teprenone全反式(5e,9e,13e)，cas 6809-52-5。因此，开发能有效分离检测替普瑞酮单顺式(5z,9e,13e)和全反式(5e,9e,13e)两种异构体的简单实用的方法，对于开展全反式替普瑞酮合成研究以及生产质量控制研究具有重要意义。

4、目前文献报道的替普瑞酮含量测定方法，测定的是该两个同分异构体的总量，由于两个同分异构体的出峰时间重合，并不能有效地分离单顺式(5z,9e,13e)和全反式(5e,9e,13e)几何异构体并进行有效的含量测定。日本药典报道的异构体测定方法采用气相色谱法，操作复杂，检测耗时长，可操作性和普及性不强。

5、因此，需要开发一种能有效分离检测替普瑞酮单顺式(5z,9e,13e)和全反式(5e,9e,13e)几何异构体的、操作普及性更强的高效液相色谱含量测定方法，用于替普瑞酮原料药同分异构体的合成研究与质量控制研究。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明公开了一种替普瑞酮异构体的检测方法：

2、采用高效液相色谱法对替普瑞酮单顺式(5z,9e,13e)和全反式(5e,9e,13e)两种异构体进行检测，配制系统适用性溶液、供试品溶液，将稀释液、系统适用性溶液、供试品溶液分别注入高效液相色谱仪，采用峰面积归一化法计算含量；

3、高效液相色谱法条件：色谱柱为手性柱大赛璐chiralpak ib；流速为0.7～0.9ml/min；柱温为20～30℃；流动相为正己烷：正丁醇：无水乙醇＝(75～82)：(20～13)：5；洗脱程序为等度洗脱；

4、替普瑞酮单顺式(5z,9e,13e)和全反式(5e,9e,13e)两种异构体的结构式如下：

5、

6、其中a为全反式(5e,9e,13e)、b为单顺式(5z,9e,13e)。

7、优选的，色谱柱为手性柱大赛璐chiralpak ib(4.6*250mm，5μm)。

8、进一步地，检测波长为210～220nm；进样体积为10～50μl；稀释液为正己烷：正丁醇＝(40～60)：(60～40)。

9、优选的，

10、检测波长为215nm；进样体积为20μl；

11、稀释液为正己烷：正丁醇＝50：50；

12、流速：0.8ml/min；柱温：25℃。

13、进一步地，流动相为正己烷：正丁醇：无水乙醇＝(82～78)：(13～17)：5。

14、优选的，流动相为正己烷：正丁醇：无水乙醇＝80：15：5；

15、以上所述的检测方法，应用于替普瑞酮原料药或替普瑞酮胶囊中替普瑞酮单顺式(5z,9e,13e)和全反式(5e,9e,13e)两种异构体的分离与含量测定。

16、本发明采用高效液相色谱法对替普瑞酮两种异构体进行分离与含量测定，替普瑞酮全反式和单顺式两个异构体出峰时间分别为8.270min和9.113min，分离度2.68，基线平稳，供试品溶液中的主峰峰形良好，实现了10min内对替普瑞酮全反式和单顺式两个异构体的有效分离与含量测定，且检测限低至2.5ng/ml；本发明采用面积归一化法替代对照品外标法，能有效节省昂贵的异构体对照品的使用，极大的节约了检测成本，还减少了异构体对照品溶液配置与稀释的繁杂工序，避免因对照品溶液配置与稀释过程产生的误差导致的测得值偏差；本发明的色谱条件简单，普通紫外检测器或dad检测器均可使用，流动相洗脱程序为等度洗脱，可适用于单泵的高效液相色谱仪。通过方法学验证，该方法可应用于替普瑞酮原料药或替普瑞酮胶囊中替普瑞酮单顺式和全反式两种异构体的分离与含量测定，且检测方便、实用、检测成本低、操作简单，对于开展全反式替普瑞酮合成研究以及生产质量控制研究具有重要的应用价值。

技术特征：

1.一种替普瑞酮异构体的检测方法，其特征在于：

2.根据权利要求1所述的一种替普瑞酮异构体的检测方法，其特征在于：色谱柱为手性柱大赛璐chiralpak ib(4.6*250mm，5μm)。

3.根据权利要求1所述的一种替普瑞酮异构体的检测方法，其特征在于：检测波长为210～220nm；进样体积为10～50μl；稀释液为正己烷：正丁醇＝(40～60)：(60～40)。

4.根据权利要求3所述的一种替普瑞酮异构体的检测方法，其特征在于：检测波长为215nm。

5.根据权利要求3所述的一种替普瑞酮异构体的检测方法，其特征在于：进样体积为20μl；稀释液为正己烷：正丁醇＝50：50。

6.根据权利要求1所述的一种替普瑞酮异构体的检测方法，其特征在于：流速：0.8ml/min；柱温：25℃。

7.根据权利要求1所述的一种替普瑞酮异构体的检测方法，其特征在于：流动相为正己烷：正丁醇：无水乙醇＝(82～78)：(13～17)：5。

8.根据权利要求7所述的一种替普瑞酮异构体的检测方法，其特征在于：流动相为正己烷：正丁醇：无水乙醇＝80：15：5。

9.权利要求1-8所述的检测方法，应用于替普瑞酮原料药中替普瑞酮单顺式(5z,9e,13e)和全反式(5e,9e,13e)两种异构体的分离与含量测定。

10.权利要求1-8所述的检测方法，应用于替普瑞酮胶囊中替普瑞酮单顺式(5z,9e,13e)和全反式(5e,9e,13e)两种异构体的分离与含量测定。

技术总结
本发明属于化学检测技术领域，具体涉及一种替普瑞酮异构体的检测方法。替普瑞酮(teprenone)是消化系统药物制酸及胃粘膜保护药物，为异构体混合物，起主要药效作用的是全反式结构；因此，开发能有效分离检测替普瑞酮单顺式(5Z,9E,13E)和全反式(5E,9E,13E)两种异构体的简单实用的方法，对开展全反式替普瑞酮合成研究以及生产质量控制研究具有重要意义。本发明公开了一种替普瑞酮异构体的检测方法，采用高效液相色谱法对替普瑞酮两种异构体进行检测，色谱柱为手性柱大赛璐CHIRALPAK IB(4.6*250mm，5μm)；流速为0.7～0.9mL/min；柱温为20～30℃；进样体积为10～50μL；波长为210～220nm；流动相为正己烷：正丁醇：无水乙醇＝(80～75)：(15～20):5；洗脱程序为等度洗脱；替普瑞酮全反式和单顺式两个异构体出峰时间分别为8.270min和9.113min，分离度2.68，基线平稳，供试品溶液中的主峰峰形较好。通过方法学验证，该方法可应用于替普瑞酮原料药或替普瑞酮胶囊中替普瑞酮单顺式和全反式两种异构体的分离与含量测定。

技术研发人员：石笑弋,郑金凤,李昭,易必新,廖彬,李晓燕,刘轶,马晓宁,刘雁鸣,韩曦羽
受保护的技术使用者：湖南省药品检验检测研究院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16