HDAC4与Ac-H4K12联合使用在脑胶质瘤诊断和等级分级中的用途

本发明涉及hdac4与ac-h4k12联合使用在脑胶质瘤诊断和等级分级中的用途。

背景技术：

1、脑胶质瘤是指起源于脑神经胶质细胞的肿瘤，是最常见的原发性颅内肿瘤，是一组具有胶质细胞表型特征的神经上皮肿瘤的总称。根据胶质瘤细胞增殖能力、组织血管坏死、增生能力、转移和侵袭能力，世界卫生组织(who)中枢神经系统肿瘤分类将脑胶质瘤分为i～iv级，i、ii级为低级别脑胶质瘤，iii、iv级为高级别脑胶质瘤。级别越高，胶质瘤恶性程度也越高。根据胶质瘤的组织形态学差异将胶质瘤分为四类：星形细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、少突胶质母细胞瘤和混合性胶质瘤。超过70％的胶质瘤都为胶质母细胞瘤，属于iv级胶质瘤，迄今没有治愈的方法，中位生存期不超过2年，预后差。我国脑胶质瘤年发病率为5～8/10万，5年病死率在全身肿瘤中仅次于胰腺癌和肺癌。

2、胶质瘤诊断主要包括影像学、神经病理学与分子病理学等。影像学主要依靠ct及mri等诊断，这两种成像方法可以相对清晰精确地显示脑解剖结构特征及脑肿瘤病变形态学特征，如部位、大小、周边水肿状态、病变区域内组织均匀性、占位效应、血脑屏障破坏程度及病变造成的其他合并征象等。脑胶质瘤确诊需要通过肿瘤切除手术或活检手术获取标本，进行组织病理和分子病理整合诊断，确定病理分级和分子亚型。随着病理学的发展与病理检测技术的进步，胶质瘤的遗传背景和发生发展机制逐渐清晰。越来越多的分子标志物被证明在胶质瘤的分类、分型、分级、预后和治疗方面发挥着重要作用。目前，常见的分子标志物有idh、h3k27、h3g34、atrx、tp53等。以上检测方法都是用来检测特定的脑胶质瘤类型的，而没有对所有类型的脑胶质瘤进行检测。例如，异柠檬酸脱氢酶(isocitratedehydrogenase，idh)突变是成人型弥漫性胶质瘤重要的诊断标志物。儿童型弥漫性高级别胶质瘤则以组蛋白h3变异为主要分子特征等等。另外，上述检测方法并不能对脑胶质瘤进行等级分类，对于脑胶质瘤的严重程度并不能进行检测。而脑胶质瘤的严重程度与复发率与存活率密切相关。由于脑胶质瘤具有浸润性生长的特性，等级越高，病人的复发率越大，存活率也相应越小。

技术实现思路

1、针对现有用于脑胶质瘤诊断标志物的局限性、以及难以区分脑胶质瘤等级的问题，本发明提供了hdac4与ac-h4k12组合使用作为脑胶质瘤的标志物的用途，尤其用于划分脑胶质瘤的等级的用途。

2、为实现上述目的，所采取的技术方案：

3、本发明提供了hdac4与ac-h4k12联合使用在制备脑胶质瘤诊断试剂、试剂盒或系统中的用途。

4、本发明提供了hdac4与ac-h4k12联合使用在制备脑胶质瘤等级分级试剂、试剂盒或系统中的用途。

5、本发明提供了检测hdac4的试剂与检测ac-h4k12的试剂在制备脑胶质瘤诊断试剂盒或系统中的用途。

6、本发明提供了检测hdac4的试剂与检测ac-h4k12的试剂在制备脑胶质瘤等级分级试剂盒或系统中的用途。

7、优选地，所述检测hdac4的试剂包括检测hdac4的免疫组化试剂，所述检测ac-h4k12的试剂包括检测hdac4的免疫组化试剂。

8、本发明提供了一种用于诊断脑胶质瘤的系统，包括：

9、数据输入模块，用于将患者的乙酰化的h4k12蛋白的免疫组化检测结果和hdac4蛋白的免疫组化检测结果输入模型计算模块；所述乙酰化的h4k12蛋白的免疫组化检测结果包括乙酰化的h4k12蛋白染色程度分级结果和乙酰化的h4k12蛋白染色阳性细胞百分比结果；所述hdac4蛋白的免疫组化检测结果包括hdac4蛋白染色程度分级结果和hdac4蛋白染色阳性细胞百分比结果；

10、模型计算模块，包括患者评分模型，用于根据患者的乙酰化的h4k12蛋白的免疫组化检测结果和hdac4蛋白的免疫组化检测结果以及患者评分模型计算患者评分结果；

11、所述患者评分模型包括hdac4的评分公式和ac-h4k12的评分公式，hdac4的评分＝hdac4蛋白染色程度分级得分结果*hdac4蛋白染色阳性细胞百分比得分结果；ac-h4k12的评分＝ac-h4k12蛋白染色程度分级得分结果*ac-h4k12蛋白染色阳性细胞百分比得分结果；hdac4、ac-h4k12染色程度分级得分规则：基本不着色为0分，着色呈淡黄色为1分，着色呈黄色为2分，着色呈棕褐色为3分；hdac4、ac-h4k12染色阳性细胞百分比得分规则：染色阳性细胞百分比＝染色阳性肿瘤细胞占计数总肿瘤细胞的比例，其中，染色阳性肿瘤细胞占计数总肿瘤细胞＜5％为0分，5％-25％为1分，＞25％-50％为2分，50％-75％为3分，＞75％为4分；

12、结果输出模块，用于根据患者评分结果来判定患者是否为胶质瘤患者；当患者hdac4评分结果≥4时判定为阳性，＜4时判定为阴性；当患者ac-h4k12评分结果≤9时判定为阳性，＞9时判定为阴性；若患者hdac4得分结果、患者ac-h4k12评分结果均为阴性，则判定该患者不是脑胶质瘤；若患者hdac4评分结果、患者ac-h4k12评分结果均为双阳，则判定该患者是脑胶质瘤；若患者hdac4评分结果、患者ac-h4k12评分结果出现一阴一阳则需复检。

13、本发明提供了一种用于脑胶质瘤等级分级的系统，包括：

14、数据输入模块，用于将脑胶质瘤患者的乙酰化的h4k12蛋白的免疫组化检测结果和hdac4蛋白的免疫组化检测结果输入模型计算模块；所述乙酰化的h4k12蛋白的免疫组化检测结果包括乙酰化的h4k12蛋白染色程度分级结果和乙酰化的h4k12蛋白染色阳性细胞百分比结果；所述hdac4蛋白的免疫组化检测结果包括hdac4蛋白染色程度分级结果和hdac4蛋白染色阳性细胞百分比结果；

15、模型计算模块，包括脑胶质瘤患者评分模型，用于根据脑胶质瘤患者的乙酰化的h4k12蛋白的免疫组化检测结果和hdac4蛋白的免疫组化检测结果以及脑胶质瘤患者评分模型计算脑胶质瘤患者评分结果；

16、所述脑胶质瘤患者评分模型包括hdac4的评分公式和ac-h4k12的评分公式，hdac4的评分＝hdac4蛋白染色程度分级得分结果*hdac4蛋白染色阳性细胞百分比得分结果；ac-h4k12的评分＝ac-h4k12蛋白染色程度分级得分结果*ac-h4k12蛋白染色阳性细胞百分比得分结果；hdac4、ac-h4k12染色程度分级得分规则：基本不着色为0分，着色呈淡黄色为1分，着色呈黄色为2分，着色呈棕褐色为3分；hdac4、ac-h4k12染色阳性细胞百分比得分规则：染色阳性细胞百分比＝染色阳性肿瘤细胞占计数总肿瘤细胞的比例，其中，染色阳性肿瘤细胞占计数总肿瘤细胞＜5％为0分，5％-25％为1分，＞25％-50％为2分，50％-75％为3分，＞75％为4分；

17、结果输出模块，用于根据脑胶质瘤患者评分结果来判定患者的胶质瘤分级情况；当脑胶质瘤患者hdac4评分结果≥6，ac-h4k12评分结果＜6时，判定为高级别脑胶质瘤；当脑胶质瘤患者hdac4评分结果＜6，ac-h4k12评分结果≥6时，判定为低级别脑胶质瘤；若脑胶质瘤患者hdac4评分结果、ac-h4k12评分结果同时≥6或同时≤6，则需复检。所述高级别脑胶质瘤是指iii级及以上脑胶质瘤，所述低级别脑胶质瘤是指ii级及以下脑胶质瘤。

18、本发明提供了一种脑胶质瘤诊断试剂盒，所述试剂盒包括检测hdac4的免疫组化试剂和检测hdac4的免疫组化试剂。

19、本发明提供了一种脑胶质瘤等级分级试剂盒，所述试剂盒包括检测hdac4的免疫组化试剂和检测hdac4的免疫组化试剂。

20、有益效果：

21、本发明首次发现，与瘤旁组织相比，hdac4与ac-h4k12在所有类型的脑胶质瘤中均可以被检测出来，而且随着脑胶质瘤的等级升高，hdac4在细胞核中的表达越多，ac-h4k12的在细胞核中的表达越少，hdac4与ac-h4k12的在细胞核中的表达呈现负相关，较之前的诊断标志物，这组蛋白在脑胶质瘤中的表达具有普遍性。hdac4与ac-h4k12的联合检测对脑胶质瘤的诊断以及高级别与低级别脑胶质瘤的诊断都具有很好的区分效果。