一种复方聚乙二醇降解产物的检测方法与流程

本发明涉及物质检测，具体涉及一种复方聚乙二醇降解产物的检测方法。

背景技术：

1、复方聚乙二醇电解质散(儿童型)作为一种儿童便秘治疗药物，主要用于慢性便秘症(器质性疾病引起的便秘除外)，具有较高的市场价值。国家药品监督管理局公布的第五十二批仿制药参比制剂目录中显示该品种为日本上市的进口原研药品，目前市面上所销售的一种复方聚乙二醇电解质散(儿童型)的主要成分为：聚乙二醇4000、氯化钠、氯化钾、碳酸氢钠，为复方制剂。日本独立行政法人药品和医疗器械综合机构(pmda)公布本品的医药品采访表格(简称if文件)中指出：本品中可能会混有聚乙二醇4000的降解产物甲酸、乙醇酸等。另有资料表明聚乙二醇可降解产生乙酸。在美国公共健康与社会福利部国家毒性项目(national toxicity program，ntp)cebs(chemical effects in biological systems，生物系统中的化学效应)数据库检索获得，乙醇酸、甲酸、乙酸的ames试验表明其均无基因毒性。

2、根据在美国官方机构national center for biotechnology information(ncbi)查询的乙醇酸(hazardous substances data bank(hsdb):5227-pubchem(nih.gov))、甲酸(hazardous substances data bank(hsdb):1646-pubchem(nih.gov))、乙酸(hazardoussubstances data bank(hsdb):40-pubchem(nih.gov))的毒理学内容，口服摄入相关毒理学数据汇总见下表1。

3、表1乙醇酸、甲酸、乙酸动物口服给药毒理学研究数据汇总

4、

5、

6、注：1*rat为大鼠；2*oral为口服；3*guinea pig为荷兰鼠，国外口语中的小白鼠；4*mice为小白鼠；5*dog为狗；6*mouse为小白鼠；7*rabbit为兔子。

7、其中，乙醇酸的摄入可能导致粘膜腐蚀，伴有胃部不适、恶心和虚脱。严重过度暴露可能导致肾脏损伤或死亡。摄入200ml的80％的乙酸溶液会导致心肌梗死引起的反复休克和大量肠道出血，从而导致器质性脑精神综合征。munley(munley smetal，drug chemtoxicol.1999nov；22(4):569-82.)等通过对妊娠第7-21天的大鼠口服乙醇酸的水溶液，以评估乙醇酸的发育毒性试验中，获得乙醇酸的母体和发育无观测效应水平(noel)为150mg/kg/天。california environmental protection agency(epa)(加利福尼亚环保局)对乙醇酸的发育或生殖毒性试验回顾数据中显示其母体noel为300mg/kg/天，发育noel：300mg/kg/天(california environmental protection agency/department of pesticideregulation；toxicology data review summary for glycolic acid(79-14-1)p.2(october 11,2001))。另一项以大鼠为试验对象，为期13周评价乙醇酸的亚慢性毒性、免疫毒性、神经毒性和生殖毒性研究结果显示，亚慢性noel为150mg/kg/天，免疫毒性、神经毒性和生殖noel为600mg/kg/天[3](california environmental protection agency/department of pesticide regulation；toxicology data review summary forglycolic acid(79-14-1)p.4(october 11,2001))。

8、甲酸摄入后对粘膜的腐蚀性类似无机强酸。bingham(bingham e，etal，patty'stoxicology.volume 1:toxicology issues,inorganic particulates,dusts,productsof biological origin and pathogens.[m].2001.)的专著中利用大鼠和小白鼠进行的一项为期2周的亚慢性或前慢性暴露研究结果表明：未观察到的呼吸道上皮刺激不良反应水平为32ppm，但没有全身毒性的证据。

9、乙酸误服后能引起呕吐、腹泻、循环系统的麻痹，甚至酸中毒、尿毒症和血尿，最终导致死亡。美国epa(环保部)筛选信息数据集显示，反复暴露于乙酸及其盐类后的无不良影响水平范围为210mg/kg/天(2～4个月的乙酸饮用水研究；全身毒性)至3600mg/kg/天(乙酸、钠盐，4周饮食研究；无影响报告)(sids.screening information data set for highproduction volume chemicals.p140.(2006))。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题为：目前没有关于复方聚乙二醇电解质散(儿童型)中有关物质(甲酸、乙醇酸以及乙酸)的检测手段，不能够对复方聚乙二醇电解质散(儿童型)的安全性和有效性进行把控。

2、本发明提供一种复方聚乙二醇降解产物的检测方法，所述检测方法包括：采用高效液相色谱法对复方聚乙二醇电解质药品的有关物质进行分离和检测；

3、其中，有关物质包括甲酸、乙醇酸以及乙酸；高效液相色谱法的色谱柱为阳离子交换色谱柱；

4、高效液相色谱法的流动相为无机酸水溶液，流动相的ph为1.0～3.73.7；高效液相色谱法采用等度或梯度洗脱。

5、作为一种可能的设计，所述复方聚乙二醇电解质药品为聚乙二醇原料药、复方聚乙二醇电解质散或复方聚乙二醇电解质制剂，或进样前以聚乙二醇溶液形式存在。

6、作为一种可能的设计，所述阳离子交换色谱柱的阳离子交换树脂是磺化以苯乙烯-二乙烯基共聚物为骨架，所述骨架上键合有磺酸基。

7、作为一种可能的设计，所述色谱柱为氢型或钙型。

8、作为一种可能的设计，所述无机酸水溶液为磷酸水溶液。

9、作为一种可能的设计，复方聚乙二醇电解质散包括聚乙二醇、适宜的药用溶剂、味道增强剂/味道掩蔽剂以及人体离子平衡调节剂；所述人体离子平衡调节剂包括氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钙、硫酸钙以及硫酸镁中至少一种。

10、作为一种可能的设计，所述高效液相色谱法的柱温为25～80℃，优选50℃；所述高效液相色谱法的流动相的流速为0.2～1.5ml/min；所述高效液相色谱法的进样量为1μl～100μl；所述高效液相色谱法的检测波长为190～250nm，优选235nm。

11、作为一种可能的设计，所述高效液相色谱法的检测器为紫外吸收检测器。

12、作为一种可能的设计，所述高效液相色谱法的柱温为50℃；所述高效液相色谱法的流动相的流速为0.8ml/min；所述高效液相色谱法的进样量为100ul；所述高效液相色谱法的检测波长为235nm。

13、本发明的有益效果为：

14、本发明能够有效检测出复方聚乙二醇电解质药品中有关物质(甲酸、乙醇酸以及乙酸)，有利于复方聚乙二醇电解质散(儿童型)的质量控制，保证复方聚乙二醇电解质散(儿童型)的安全性和有效性。本发明公开的复方聚乙二醇降解产物的检测方法具有专属性强、操作简单快速且灵敏度高的特点，值得推广应用于实际生产中，对复方聚乙二醇电解质药品的质量进行把控，确保产品合格。