CD74highCD63low中性粒细胞在制备用于预测非小细胞肺癌疗效产品中的应用

本发明涉及生物医学检测，特别涉及cd74highcd63low中性粒细胞作为分子标志物在制备用于预测非小细胞肺癌的治疗疗效的产品中的应用。

背景技术：

1、肺癌是全球最常见的癌症，死亡率很高，根据具体的生物学特征被分为两大类：非小细胞肺癌(nsclc)和小细胞肺癌(sclc)。其中，nsclc占所有肺癌病例的85％以上，且其中一半在诊断时就已确诊为晚期。免疫检查点阻断(immune checkpoint blockade,icb)是一种广泛用于晚期癌症治疗的方法。目前，针对晚期肺癌的一线治疗方式为anti-pd-1或anti-pd-l1为代表的icb疗法。然而，临床研究表明，对icb治疗表现出持续响应的晚期nsclc患者的比例只有不到20％。为增强icb介导的抗肿瘤免疫反应，化疗试剂、细胞因子以及靶向药物联合anti-pd-1/pd-l1的治疗方式已被批准或正在临床试验中用于晚期nsclc患者的治疗。然而，尽管这些联合疗法(如icb联合化疗的新辅助治疗)展现出良好的治疗效果，但仍有一半对治疗响应的患者在一年内便出现耐药性，并且这种获得性耐药的机制及相关的生物标志物并不清楚。

2、中性粒细胞是人体血液中含量最丰富的白细胞，占白细胞总数的50％-70％，在骨髓中发育成熟，经血液循环在稳态或病理条件下浸润到多种组织器官中发挥功能。据报道，中性粒细胞在包括nsclc在内的多种实体瘤的肿瘤微环境中迅速积累,表现出极大的可塑性与高度异质性，发挥促肿瘤或抗肿瘤作用。人体血液中的中性粒细胞含量极为丰富，极具作为icb或基于icb的新辅助治疗的细胞标志物或靶标的潜力。在人类早期nsclc的肿瘤微环境中存在具有抗原呈递表型的未成熟中性粒细胞亚群，它们表达高水平的hla、cd15和cd86，展现出较强的激活t细胞的能力。但这些中性粒细胞在外周血或晚期nsclc患者的肿瘤微环境中并不存在，进一步寻找外周血或肿瘤微环境中具有抗肿瘤功能表型的中性粒细胞意义重大。

3、因此，为了预测非小细胞肺癌的治疗疗效，有必要开发一种新的中性粒细胞标志物。

技术实现思路

1、本发明目的是提供cd74highcd63low中性粒细胞作为分子标志物在制备用于预测非小细胞肺癌的治疗疗效的产品中的应用，cd74highcd63low中性粒细胞表达高水平的hla、cd15和cd86，展现出较强的激活t细胞的能力，检测cd74highcd63low中性粒细胞的占中性粒细胞的比例，从而预测非小细胞肺癌的治疗疗效。

2、为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、在本发明的第一方面，提供了cd74highcd63low中性粒细胞作为分子标志物在制备用于预测非小细胞肺癌的治疗疗效的产品中的应用，所述cd74highcd63low中性粒细胞为将待测样品的中性粒细胞通过流式分析技术获得的具有cd63低表达与cd74高表达的特征的中性粒细胞亚群。

4、进一步地，所述用于预测非小细胞肺癌的治疗疗效的产品包括cd74highcd63low中性粒细胞的检测试剂。

5、进一步地，所述检测试剂包括流式分析技术所用的试剂和仪器。

6、进一步地，所述流式分析技术所用的试剂具体包括盐离子缓冲液(pbs)，fc受体封闭液及对应蛋白流式抗体(cd11b,cd66b,cd74与cd63)等。

7、进一步地，使用步骤包括：获得待测样品的外周血，将所述外周血采用用红细胞裂解缓冲液裂解其中的红细胞，将所得的免疫细胞使用fc受体封闭液处理15分钟，随后用流式抗体(cd11b,cd66b,cd74与cd63)对免疫细胞进行染色，最后在流式分析仪(lsrfortessax20)上分析所述待测样本，获得流式分析图及所述cd74highcd63low中性粒细胞在血液中总中性粒细胞中的个数占比。

8、进一步地，所述cd74highcd63low中性粒细胞中占血液中总中性粒细胞的比例为30％～75％。在本发明的第二方面，提供了一种非小细胞肺癌的治疗疗效的预测系统，所述系统包括：

9、处理器和存储器，所述存储器耦接到所述处理器，所述存储器存储指令，当所述指令由所述处理器执行时使用以下步骤：

10、输入cd74highcd63low中性粒细胞占待测外周血样品中总的中性粒细胞的比例a，

11、当所述比例a满足：30％≤a≤75％，则判定非小细胞肺癌的治疗效果好；

12、当所述比例a＜30％，则判定非小细胞肺癌的治疗效果差。

13、在本发明的第三方面，提供了一种计算机可读存储介质，其上存储有计算机程序，所述计算机程序被处理器执行时使用所述的步骤。

14、在本发明的第四方面，提供了一种所述的非小细胞肺癌的治疗疗效的预测系统或所述的计算机可读存储介质在制备用于诊断膀胱癌的产品中的应用。

15、本发明实施例中的一个或多个技术方案，至少具有如下技术效果或优点：

16、本发明提供的cd74highcd63low中性粒细胞作为分子标志物在制备用于预测非小细胞肺癌的治疗疗效的产品中的应用，将cd74highcd63low中性粒细胞作为一种有效的非小细胞肺癌的治疗疗效的分子标志物，与治疗疗效不好的患者(治疗后肺部肿瘤显著增大)相比，疗效较好的患者(治疗后肺部肿瘤显著缩小)血液中所述标志物cd74highcd63low中性粒细胞的比例升高，提示cd74highcd63low中性粒细胞可作为血液中的免疫标志物预测治疗非小细胞肺癌患者的疗效。

技术特征：

1.cd74highcd63low中性粒细胞作为分子标志物在制备用于预测非小细胞肺癌的治疗疗效的产品中的应用，其特征在于，所述cd74highcd63low中性粒细胞为将待测样品的中性粒细胞通过流式分析技术获得的具有cd63低表达与cd74高表达的特征的中性粒细胞亚群。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述用于预测非小细胞肺癌的治疗疗效的产品包括cd74highcd63low中性粒细胞的检测试剂。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述检测试剂包括流式分析技术所用的试剂和仪器。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述流式分析技术所用的试剂具体包括：红细胞裂解缓冲液，盐离子缓冲液，fc受体封闭液及对应特征蛋白流式抗体。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述cd74highcd63low中性粒细胞占血液中总中性粒细胞的个数比例高于30％。

6.一种非小细胞肺癌的治疗疗效的预测系统，其特征在于，所述系统包括：

7.一种计算机可读存储介质，其上存储有计算机程序，其特征在于，所述计算机程序被处理器执行时使用权利要求5所述的步骤。

8.权利要求6所述的非小细胞肺癌的治疗疗效的预测系统或权利要求7所述的计算机可读存储介质在制备用于诊断膀胱癌的产品中的应用。

9.cd74配体激动剂5a与anti-pd-1的组合物在制备用于治疗非小细胞肺癌的药物中的应用。

技术总结
本发明提供了CD74<supgt;high</supgt;CD63<supgt;low</supgt;中性粒细胞作为分子标志物在制备用于预测非小细胞肺癌的治疗疗效的产品中的应用，CD74<supgt;high</supgt;CD63<supgt;low</supgt;中性粒细胞具有抗原递呈与活化T细胞的潜力，且其比例在基于ICB的新辅助治疗后持续响应的非小细胞肺癌患者的外周血中显著升高，与非小细胞肺癌患者的良好预后呈正相关关系，可作为预测与治疗非小细胞肺癌的生物标志物或治疗靶标。

技术研发人员：钟波,林丹丹,谢丛华,唐震,胡静,帅欣
受保护的技术使用者：武汉大学
技术研发日：
技术公布日：2024/5/16