一种白介素6质控品及其制备方法与流程

本发明涉及白介素6检测，具体的涉及一种白介素6质控品制备方法。

背景技术：

1、白介素6(il-6)是一种由多种不同细胞所分泌的蛋白质，包括纤维母细胞、单核巨噬细胞、t淋巴细胞、b淋巴细胞、上皮细胞、角质细胞、以及多种瘤细胞等。il-6是急性炎症的早期标志物，在发生外伤、创伤、应激、感染、脑死亡及其它情况的急性炎症反应感染和炎症后，il-6率先生成且水平迅速升高，与炎症严重程度呈正相关，对炎症感染性疾病的早期预警、预测评估及疗效观察均具有重要的临床价值。因此，对il-6进行检测显得尤为重要。

2、目前，已有相关技术公开了用于il-6检测的质控品，例如公开号为cn112485451b的中国专利公开了一种白介素6冻干校准品及其制备方法与冻干保护液，具体公开了一种冻干保护液，其包括以下组分：缓冲液、海藻糖、γ-环糊精、甘露醇、胶原蛋白保护剂、表面活性剂和防腐剂。

3、但是，此类质控品均为冻干品，在使用时需要手动添加液体进行复溶，采用冻干品的形式导致生产工艺更为复杂，检测步骤也相应繁琐，冷冻干燥技术的投资费用和运转费用都比较高，造成质控品的成本也提高。此外冻干过程也对抗原有所损伤，复溶后影响稳定，不利于长期保存。

技术实现思路

1、本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供了一种白介素6质控品制备方法。

2、为了实现以上目的及其他目的，本发明是通过以下技术方案实现的：

3、首先，本发明提供了一种白介素6质控品，包括白介素6抗原和质控品保护液，所述质控品保护液包括磷酸盐缓冲液、无机盐、防腐剂、表面活性剂、糖类稳定剂以及蛋白保护剂；

4、所述蛋白保护剂包括辛酸钠、酪蛋白以及丙三醇。

5、本发明采用辛酸钠、酪蛋白以及丙三醇作为蛋白保护剂，其中丙三醇对蛋白质的非极性表面有很好的稳定作用，能保持抗原表面的滋润，使其不至于因失水而失活，还能增加粘稠度，降低分子运动，避免蛋白聚集，并具有减轻壁吸的作用。辛酸钠的羧酸基团可以与蛋白质表面的游离氨基酸残基形成氢键和离子键，从而改变蛋白质分子的结构和构象，进而影响蛋白质的稳定性。

6、在一实施例中，所述白介素6质控品包括高浓度水平质控品和低浓度水平质控品，所述低浓度水平质控品中白介素6抗原的含量为10pg/ml；所述高浓度水平质控品中白介素6抗原的含量为1000pg/ml。

7、在一实施例中，所述缓冲盐是十二水合磷酸氢二钠和二水合磷酸二氢钠中的一种或者两种的组合物。

8、在一实施例中，所述无机盐是氯化钠。

9、在一实施例中，所述防腐剂是proclin300。

10、在一实施例中，所述表面活性剂是曲拉通x-100和月桂基甜菜碱中的一种或者两种的组合物。

11、在一实施例中，所述糖类稳定剂是葡聚糖2万，葡聚糖2万能够在抗原抗体表面形成一种保护膜，使蛋白结构免遭破坏，由于具有疏水性及亲水性双重性质，较适合稳定单分散状态的非均值蛋白质。

12、其次，本发明还提供了一种白介素6质控品的制备方法，用于制备上述任一项所述白介素6质控品，包括如下步骤：

13、步骤s1：配制质控品保护液；

14、以磷酸盐缓冲液为基质液，按比例向基质液中加入无机盐、防腐剂、表面活性剂、糖类稳定剂以及蛋白保护剂，混合均匀后0.22μm的滤膜过滤，制备获得质控品保护液；

15、步骤s2：制备白介素6质控品；

16、向所述质控保护液中添加白介素6抗原，当白介素6含量为8～12pg/ml时，制备获得低浓度水平质控品；当白介素6含量为900～1100pg/ml时，制备获得高浓度水平质控品。

17、在配制过程中，若检测结果不符合标准要求，可以通过添加保护液稀释或继续添加白介素6抗原进行浓度调整，直至符合浓度标准。

18、综上所述，本发明具有以下有益效果：

19、通过向保护液中添加糖类稳定剂葡聚糖2万以及蛋白保护剂辛酸钠、丙三醇和酪蛋白，使白介素6质控品在水溶液中以稳定状态存在，增加了白介素6质控品的使用便携性。并且本发明质控品制备工艺简单成本低，制备得到的质控品均匀性好，具有良好的稳定性，能够长时间保存，满足临床使用需求。

技术特征：

1.一种白介素6质控品，其特征在于，包括白介素6抗原和质控品保护液，所述质控品保护液包括磷酸盐缓冲液、无机盐、防腐剂、表面活性剂、糖类稳定剂以及蛋白保护剂；

2.根据权利要求1所述的一种白介素6质控品，其特征在于，所述白介素6质控品包括高浓度水平质控品和低浓度水平质控品，所述低浓度水平质控品中白介素6抗原的含量为10pg/ml；所述高浓度水平质控品中白介素6抗原的含量为1000pg/ml。

3.根据权利要求2所述的一种白介素6质控品，其特征在于，所述缓冲盐是十二水合磷酸氢二钠和二水合磷酸二氢钠中的一种或者两种的组合物。

4.根据权利要求3所述的一种白介素6质控品，其特征在于，所述无机盐是氯化钠。

5.根据权利要求4所述的一种白介素6质控品，其特征在于，所述防腐剂是proclin300。

6.根据权利要求5所述的一种白介素6质控品，其特征在于，所述表面活性剂是曲拉通x-100和月桂基甜菜碱中的一种或者两种的组合物。

7.根据权利要求6所述的一种白介素6质控品，其特征在于，所述糖类稳定剂是葡聚糖2万。

8.一种白介素6质控品的制备方法，用于制备如权利要求1～7任一项所述白介素6质控品，其特征在于，包括如下步骤：

技术总结
本发明提供了一种白介素6质控品，包括白介素6抗原和质控品保护液，所述质控品保护液包括磷酸盐缓冲液、无机盐、防腐剂、表面活性剂、糖类稳定剂以及蛋白保护剂；所述蛋白保护剂包括辛酸钠、酪蛋白以及丙三醇。所述糖类稳定剂是葡聚糖2万。通过向保护液中添加糖类稳定剂葡聚糖2万以及蛋白保护剂辛酸钠、丙三醇和酪蛋白，使白介素6质控品在水溶液中以稳定状态存在，增加了白介素6质控品的使用便携性。并且本发明质控品制备工艺简单成本低，制备得到的质控品均匀性好，具有良好的稳定性，能够长时间保存，满足临床使用需求。

技术研发人员：马丽利,范文萍,邵建辉
受保护的技术使用者：成都达思嘉生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/5/16