一种协同富集同时检测萘酚异构体的方法
【技术领域】：
[0001] 本发明属于环境科学、食品安全领域，具体设及一种蒙酪异构体的检测方法。
【背景技术】：
[0002] 蒙酪是一类重要的工业原料，在染料、农药、医药、香料等方面有着广泛的应用，同 时它也是一类环境污染物，广泛分布在空气、水、±壤、食品等环境中，其生物有效性部分可 通过食物链进行富集、传递，给生物和人类带来了极大的危害。蒙酪属中等毒物，对眼、皮肤 和粘膜具有强烈的刺激作用，并具有致敏、致癌、致崎和致突变的潜在毒性。目前，我国是世 界上蒙酪的主要生产国和出口国，国内众多染料厂、农药厂、制药厂等生产过程中会产生各 类蒙酪废水，其质量浓度可达数千毫克每升，一旦排放到水环境中，将严重地污染环境并对 人体健康产生危害，因此其含量是衡量水质的重要指标。
[0003] 由于哲基位置的不同，蒙酪有两种同分异构体，分为a-蒙酪和P-蒙酪，其中后 者的毒性远远强于前者，同时含该两种物质的废水毒性大、难降解，且组分复杂，难W处理。 目前已有许多关于a-蒙酪和P-蒙酪单独检测方法，但由于两者性质相近，往往共存，检 测时互相干扰，因此建立同时检测a-蒙酪和P-蒙酪的分析方法对实际水样检测分析有 着重要意义。
[0004] 目前国内外报道的蒙酪异构体的测定方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法、 气相色谱-质谱串联法、巧光光谱法、免疫检测法等，但都有各自的局限性，如检测过程复 杂、费用高、检测周期长等。近些年来，电化学法W其操作简单、灵敏度高、检测速度速、费用 低而受到广泛的重视。2013年公开的发明专利；"一种同时检测两种蒙酪同分异构体的电 化学方法"（201210518787. 1)，将介孔材料修饰电极，利用循环伏安法和差分脉冲法实现了 蒙酪的两种同分异构体的同时电化学测量，a-蒙酪和0-蒙酪的检出限均为2. OmM.
【发明内容】
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[0005] 本发明目的在于提供一种灵敏性高、特异性好的蒙酪两种同分异构体（a -蒙酪 和0-蒙酪）的检测方法。本发明采用的技术方案为；W氧化石墨締的高氯酸钢溶液为原 料，通过电化学还原的方法，制备电还原氧化石墨締修饰玻碳电极，在磯酸盐缓冲溶液中， 利用电迁移富集和n-Ji共辆作用协同富集样品中蒙酪异构体（a-蒙酪和P-蒙酪）， 采用循环伏安法和差分脉冲伏安法，同时检测富集在电还原氧化石墨締修饰玻碳电极上的 a-蒙酪和0-蒙酪。具体步骤为：
[0006] (1)制备电还原氧化石墨締修饰玻碳电极
[0007] 取30mg氧化石墨締溶于10血二次蒸馈水中，超声2?化分散均匀，再加入高氯 酸钢，继续超声5min，配制成3mg/mL氧化石墨締的高氯酸钢溶液；将玻碳电极先后采用3um 和50nmAl2〇3粉末打磨，再依次在无水己醇和二次蒸馈水中超声清洗2?3min，然后置于 0. 5M H2SO4溶液中用循环伏安法进行活化，于-0. 2?1. 0V下反复扫描直至曲线稳定，最后 用二次蒸馈水冲洗干净并用氮气吹干；将预处理过的玻碳电极置于氧化石墨締的高氯酸钢 溶液溶液中，采用恒电压-1. 2V下电聚合300s，取出浸泡于二次蒸馈水中lOmin，除去未结 合上的氧化石墨締，再置于1M化Cl〇4溶液中，-1. 2V下保持30s，取出清洗除去残留的高氯 酸钢并惊干，即得到电还原氧化石墨締修饰玻碳电极。
[000引 （2)电迁移和31-31共辆作用协同富集样品中蒙酪异构体
[0009] 电还原氧化石墨締修饰玻碳电极作为工作电极，在+0. IV富集电位下，富集时间 从50s增加到90s时，蒙酪同分异构体的氧化峰电流增加，继续延长富集时间，峰电流几乎 不变。该是由于随着富集时间的增加，富集在电还原氧化石墨締修饰玻碳电极上的a-蒙 酪和0 -蒙酪逐渐增多，并在90s时达到饱和，因此电迁移富集时间优选90s ;电还原氧 化石墨締拥有巨大的二维n体系，蒙酪为二元共辆苯环结构，有一个小JT体系；当蒙酪 (a -蒙酪或0-蒙酪）在溶液中靠近电还原氧化石墨締时，二者的31体系发生31-31共辆 相互作用，蒙酪（a-蒙酪或0-蒙酪）被富集在电还原氧化石墨締修饰玻碳电极表面。
[0010] (3)差分脉冲伏安法同时检测蒙酪异构体
[0011] 采用=电极体系（工作电极为修饰玻碳电极，参比电极为饱和甘隶电极，对电极 为销丝电极），W0. 1M磯酸盐缓冲溶液（PB巧为支持电解质，加入适量a -蒙酪和P -蒙酪， 保持氮气氛围，采用循环伏安法和差分脉冲伏安法进行测试，每次测试后，将电极置于空白 底液中循环扫描至无电流峰出现再继续下一次测定；结果显示该方法对a-蒙酪的线性范 围为5?400nM，检出限（S/N =扣为l.OlnM，灵敏度为0. 0097 UA. uM-i;对0-蒙酪线 的性范围为5?350nM，检出限（S/N= 3)为0. 43nM，灵敏度为0. 0113yA. uM-i。
[0012] 本发明与现有技术相比，其显著优点是：
[001引（1)电还原氧化石墨締是已知的最薄的一种材料，并且具有极强导电性、超大比表 面积、共辆的n体系等优点，该些都有利于蒙酪异构体的富集与检测；
[0014] (2)利用电迁移和31-31共辆作用协同富集样品中蒙酪异构体，可W大大提高检 测的灵敏度；
[001引 （3)该方法对a -蒙酪的检出限（S/N = 3)达到1. OlnM，灵敏度为 0. 0097 uA ? uM-i;对0 -蒙酪线的检出限（S/N = 3)达到0. 43nM，灵敏度为 0. 0113]iA* yM4,明显优于现有方法。
【附图说明】：
[0016] 附图1为：电化学还原氧化石墨締时间对200nMa -蒙酪和P -蒙酪差分脉冲伏安 法响应电流的影响。附图2为；富集电位对200nM a -蒙酪和P -蒙酪差分脉冲伏安法响应 电流的影响。附图3为；富集时间对200nM a -蒙酪和P -蒙酪差分脉冲伏安法响应电流的 影响。附图4为；200nMa-蒙酪和P-蒙酪在抑值分别为2、3、4、5、6、7、8的0. 1M PBS中 的循环伏安曲线。附图5为：不同浓度a-蒙酪和P-蒙酪在电还原氧化石墨締修饰玻碳 电极上的差分脉冲伏安曲线。
【具体实施方式】
[0017] 结合实施例对本发明作进一步地描述，但该发明不局限于实施例。
[0018] (1)当电化学还原氧化石墨締的时间从150s增加至250s时，随着聚合上的电化学 还原氧化石墨締的量增多，修饰的表面积增大，差分脉冲伏安法检测到a-蒙酪和0-蒙酪 的氧化峰电流逐渐增加，富集效率随之提高，当电还原时间达到250s时，两者的峰电流均 达到最大值。
[0019] (2)富集电位对蒙酪同分异构体氧化峰电流的影响。当富集电位从-0.5V变化到 +0. IV时a -蒙酪和P -蒙酪的峰电流明显的随之增大，由于蒙酪具有弱酸性，在水溶液中 易发生解离，生