乳粉中低聚果糖的检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及乳粉检测技术领域，具体涉及乳粉中低聚果糖的检测方法。
【背景技术】
[0002] 低聚果糖是一种天然活性物质，又称蔗果低聚糖，是由1~5个果糖基通过 β (2-1)糖苷键与蔗糖中的果糖基结合生成的蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖等的混合物。 甜度为蔗糖的〇. 3-0. 6倍。低聚果糖既保持了蔗糖的纯正甜味性质，又比蔗糖甜味清爽。是 具有调节肠道菌群，增殖双歧杆菌，促进钙的吸收，调节血脂，免疫调节，抗龋齿等保健功能 的新型甜味剂，被誉为继抗生素时代后最具潜力的新一代添加剂一促生物质；在法国被称 为原生素（PPE)，已在乳制品、乳酸菌饮料、固体饮料、糖果、饼干、面包、果冻、冷饮等多种食 品中应用。
[0003] 低聚果糖作为益生元被添加到奶粉中，但根据各国的标准，对于乳粉中低聚果糖 的含量有严格的限制。由于糖类物质没有紫外吸收，卫生部《保健食品检验与评价技术规 范》（2003年版）采用了高效液相折光示差法，但此方法对流动相的要求比较高，色谱柱及 检测器需控制温度，且灵敏度较低。
【发明内容】
[0004] 为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种乳粉中低聚果糖的检测方 法，通过稳定的前处理和控制色谱条件较好的解决了检测灵敏度较低与样品成分分离度低 的问题。
[0005] 为解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下：
[0006] 乳粉中低聚果糖的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：
[0007] 1)标准溶液配制：分别取蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖加水制成混合溶液，并 逐级稀释成梯度浓度的标准系列溶液，绘制标准曲线；
[0008] 2)待测样品溶液制备：取混合均匀待测样品，置于带塞离心管中，加水，再加入无 水乙醇，搅拌混匀，放置3-8min，离心，取上清液，置水浴挥至近干，残液加水溶解并继续加 水稀释，滤过，取滤液，即得待测样品溶液；
[0009] 3)高效液相色谱测定：取等量的待测样品液和标准溶液分别注入高效液相色谱 仪对待测样品进行测定，记录峰面积，以外标法计算低聚果糖含量；
[0010] 其中色谱条件如下：
[0011] 色谱柱：不锈钢柱，柱温：40-50°C，检测室温度：35-45°C，流动相：乙腈-水体系， 流速：0· 5-1.0ml/min，进样量：10-25μ 1。
[0012] 进一步的，本发明中所述的色谱柱为HILIC Amide柱，规格为300mmX4. 6mm, 5 μ m〇
[0013] 流动相的比例会影响保留因子、分离度、拖尾因子和出峰时间等，为了获得合理的 保留时间和分离度，进一步的，本发明中所述流动相中乙腈与水的体积比为60: (15-40)。
[0014] 进一步的，步骤1)中加水制成每1ml分别含蔗果三糖（GF2)3.0mg、蔗果四糖 (GF3) 3. Omg和蔗果五糖（GF4) 4. Omg的混合溶液，然后将混合溶液逐级稀释成下列浓度配 制成标准系列溶液：
【主权项】
1. 乳粉中低聚果糖的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤： 1) 标准溶液配制：分别取蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖加水制成混合溶液，并逐级 稀释成梯度浓度的标准系列溶液，绘制标准曲线； 2) 待测样品溶液制备：取混合均匀待测样品，置于带塞离心管中，加水，再加入无水乙 醇，搅拌混匀，放置3-8min，离心，取上清液，置水浴挥至近干，残液加水溶解并继续加水稀 释，滤过，取滤液，即得待测样品溶液； 3) 高效液相色谱测定：取等量的待测样品液和标准溶液分别注入高效液相色谱仪对 样品进行测定，记录峰面积，以外标法计算低聚果糖含量； 其中色谱条件如下： 色谱柱：不锈钢柱，柱温：40-5(TC，检测室温度：35-45°C，流动相：乙腈-水体系，流 速：0· 5-L Oml/min，进样量：10-25μ 1。
2. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述色谱柱为HILICAmide柱，规格为 300mmX 4：. 6mm, 5 μ m。
3. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相中乙腈与水的体积比为 60:15-40。
4. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤1)中加水制成每1ml分别含蔗 果三糖3. Omg、蔗果四糖3. Omg和蔗果五糖4. Omg的混合溶，然后将混合液逐级稀释成下列 浓度配制成标准系列溶液：
5. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤3)中以外标法计算低聚果糖含 量的计算式为：
式中：X为每100g待测样品中糖组分的绝对含量，C为由线性方程获得的待测样品溶液 中某种糖组分的浓度，mg/ml，V为待测样品稀释后的体积，ml ;m为待测样品取样量，g。
6. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述色谱条件还包括进样器温度 20-25。。。
7. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，该检测方法的平均回收率为 85% -90%，峰面积和保留时间的RSD分别为0. 90% -0. 95%和0. 80% -0. 90%。
【专利摘要】本发明公开了乳粉中低聚果糖的检测方法，所述检测方法包括标准溶液配制、待测样品溶液制备、高效液相色谱测定等步骤。本发明能较快速、准确地、灵敏地检测出乳品中低聚果糖的含量，使用较为安全的非破坏性检测器，通过稳定的前处理和控制色谱条件较好的解决了检测灵敏度较低与样品成分分离度低的问题。
【IPC分类】G01N30-88
【公开号】CN104678042
【申请号】CN201510104441
【发明人】陈斌, 张人明, 彭美纯, 杨云
【申请人】长沙素加营养品有限公司
【公开日】2015年6月3日
【申请日】2015年3月10日