黑加仑中矢车菊-3-芸香糖苷的hplc测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及药物分析提取技术领域，特别设及一种黑加仑中矢车菊-3-芸香糖巧 的HPLC测定方法。
【背景技术】
[000引黑加仑学名黑穗醋栗巧ibes nigrum L.)又名黑醋栗，黑豆果，紫梅，虎耳草目茶 薦子科茶薦子属，小型灌木，其成熟果实为黑色小浆果，内富含维生素C、花青素，可W食用。 也可W加工成果汁，果酱等食品。黑加仑含有非常丰富的维生素C、磯、儀、钟、巧、花青素、酪 类物质。目前已经知道的黑加仑的保健功效包括预防痛风、贫血、水肿、关节炎、风湿病、口 腔和咽喉疾病、咳嗽等。
[0003] 黑加仑是我国北方的主要浆果产品，产量较高，果实营养丰富并具有多种花青素 昔，还具有重要的生理功能和保健功能，具有很好的市场前景。
[0004] 现有的黑加仑中矢车菊-3-芸香糖巧的测定方法，步骤繁琐，准确率低，且在测定 过程中会对黑加仑果实造成较大损耗，造成产品经济效益低下。
[0005] 矢车菊-3-芸香糖巧是黑加仑果实中的主要色素成分。本发明在现有技术基础上 建立了一种黑加仑果实中矢车菊素-3-0-芸香糖巧含量的HPLC测定方法。
【发明内容】
[0006] 为解决上述现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供一种黑加仑中矢车 菊-3-芸香糖巧的HPLC测定方法。
[0007] 为达到上述目的，本发明的技术方案为：
[000引一种黑加仑中矢车菊-3-芸香糖巧的HPLC测定方法，包括如下步骤：
[0009] 步骤一、选取成熟新鲜的黑加仑果实，清洗干净后充分压棒打浆；
[0010] 步骤二、将步骤一所得浆液及黑加仑果实残渣利用己醇充分提取矢车菊-3-芸香 糖巧；
[0011] 步骤=、将步骤二所得含有矢车菊-3-芸香糖巧的滤液利用高效液相色谱仪 Agilent 2600,采用Zorbax SB C18柱；紫外检测器；VWD，G1314F，检测波长为520nm ;流 动相A液选取浓度1. 6%的甲酸水溶液，B液选取浓度1. 6%的甲酸己膳溶液；柱温箱温度 30 ; °C进样量lOul ;流速Iml/min，进行梯度洗脱；
[0012] 步骤四、依据梯度洗脱数据建立矢车菊-3-芸香糖巧标准曲线回归方程。
[0013] 进一步的，所述步骤S中，ZorbaxSB C18柱的具体参数为250mmX4. 60mm，5ym。
[0014] 进一步的，所述步骤S中，梯度洗脱的具体操作为；0-5min，85% A液，15% B液； 5-10min，80% A 液，20% B 液；10-30min，72% A 液，28% B 液；30-36min，100% B 液。
[0015] 进一步的，所述步骤四中：矢车菊-3-芸香糖巧标准曲线回归方程为；Y = 2X 107X- 33120(r = 0.9998)，在0.1041~1.041yg范围内线性关系良好，平均回收率 分别为96. 4%，矢车菊素-3-0-芸香糖巧含量范围为5. 263~12. 829mg/g。
[0016] 相对于现有技术，本发明的有益效果为：
[0017] 本发明方法简便、准确，可用于黑加仑果实质量控制。结果显示利用本发明矢车 菊-3-芸香糖巧标准曲线回归方程为；Y = 2X 107X- 33120(r = 0.9998)，在0.1041~ 1. 041 y g范围内线性关系良好，平均回收率分别为96. 4%，矢车菊素-3-0-芸香糖巧含量 范围为 5. 263 ~12. 829mg/g。
【具体实施方式】
[0018] 下面结合【具体实施方式】对本发明技术方案做进一步详细描述：
[0019] 试验例；
[0020] 仪器；Agilent 2600 ;
[0021]检测波长；515nm，，检测器；VWD佑1314巧；
[002引 柱温箱温度；30°C，TCC佑1316A);
[0023]进样量；10ul
[0024]流速；Iml/min
[0025] 流动相；A液；1. 6%甲酸水溶液；B液；1. 6%甲酸甲醇溶液
[0026] 运行程序：
[0027]
【主权项】
1. 一种黑加仑中矢车菊-3-芸香糖苷的HPLC测定方法，其特征在于，包括如下步骤： 步骤一、选取成熟新鲜的黑加仑果实，清洗干净后充分压榨打浆； 步骤二、将步骤一所得浆液及黑加仑果实残渣利用乙醇充分提取矢车菊-3-芸香糖 苷； 步骤三、将步骤二所得含有矢车菊-3-芸香糖苷的滤液利用高效液相色谱仪Agilent 2600,采用ZorbaxSB C18柱；紫外检测器：VWD，G1314F，检测波长为520nm ;流动相A液选 取浓度1. 6%的甲酸水溶液，B液选取浓度1. 6%的甲酸乙腈溶液；柱温箱温度30°C ;进样 量IOul ;流速lml/min，进行梯度洗脱； 步骤四、依据梯度洗脱数据建立矢车菊-3-芸香糖苷标准曲线回归方程。
2. 根据权利要求1所述的黑加仑中矢车菊-3-芸香糖苷的HPLC测定方法，其特征在 于，所述步骤三中，Zorbax SB C18柱的具体参数为250mmX 4. 60mm，5 ym。
3. 根据权利要求1所述的黑加仑中矢车菊-3-芸香糖苷的HPLC测定方法，其特征在 于，所述步骤三中，梯度洗脱的具体操作为：〇-5min，85% A液，15% B液；5-10min，80% A 液，20% B 液；10-30min，72% A 液，28% B 液；30-36min，100% B 液。
4. 根据权利要求1所述的黑加仑中矢车菊-3-芸香糖苷的HPLC测定方法，其特征在 于，所述步骤四中：矢车菊-3-芸香糖苷标准曲线回归方程为：Y = 2X 107X - 33120 (r = 0.9998)，在0. 1041~1.041yg范围内线性关系良好，平均回收率分别为96.4%，矢车菊 素-3-0-芸香糖苷含量范围为5. 263~12. 829mg/g。
【专利摘要】一种黑加仑中矢车菊-3-芸香糖苷的HPLC测定方法，包括如下步骤：步骤一、选取成熟新鲜的黑加仑果实，清洗干净后充分压榨打浆；步骤二、将步骤一所得浆液及黑加仑果实残渣利用乙醇充分提取矢车菊-3-芸香糖苷；步骤三、将步骤二所得含有矢车菊-3-芸香糖苷的滤液利用高效液相色谱仪Agilent 2600，采用Zorbax SB C18柱；紫外检测器：VWD，G1314F，检测波长为520nm；流动相A液选取浓度1.6％的甲酸水溶液，B液选取浓度1.6％的甲酸乙腈溶液；柱温箱温度30℃；进样量10μl；流速1ml/min，进行梯度洗脱；步骤四、依据梯度洗脱数据建立矢车菊-3-芸香糖苷标准曲线回归方程。本发明方法简便、准确，可用于黑加仑果实质量控制。平均回收率分别为96.4％。
【IPC分类】G01N30-02
【公开号】CN104749279
【申请号】CN201510142303
【发明人】夏惠, 梁东, 唐懿, 吕秀兰, 王迅, 王志辉, 孙国超, 林玲, 朱婷婷, 杨涛
【申请人】四川农业大学
【公开日】2015年7月1日
【申请日】2015年3月27日