玉叶金花药材中玉叶金花苷g的含量测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药材质量控制技术领域，设及玉叶金花巧G，尤其是一种玉叶金花药材 中玉叶金花巧G的含量测定方法。
【背景技术】
[000引玉叶金花为茜草科植物玉叶金花（MussaendapubescensAit.f.)的干燥茎、根， 具有清热解暑，凉血解毒的功效，在岭南地区广泛使用，主要用于治疗感冒、中暑、肾炎水 月中、咽喉肿痛、支气管炎等病症，国内清火消炎类药的知名品牌玉叶解毒颗粒、玉叶清火片 中玉叶金花均作为君药使用。
[0003] 文献报道玉叶金花药材主要含有祗类、=祗皂巧类等成分。玉叶金花收载于《广西 壮族自治区壮药质量标准》第一卷，标准中只有理化鉴别，其他成药中也仅见薄层鉴别，尚 未见关于其含量测定的相关报道。为了保障其临床用药的安全、有效、稳定，必须建立质量 控制方法，W保证药材质量。
【发明内容】
[0004] 本发明要解决的技术问题是提供一种精密度高、重现性好、稳定性好、回收率高、 测定结果准确的玉叶金花药材中玉叶金花巧G的含量测定方法，从而实现有效控制玉叶金 花药材的质量，确保其临床用药的安全、有效。
[0005] 为解决上述技术问题，本发明采用W下技术方案；玉叶金花药材中玉叶金花巧G 的含量测定方法，W玉叶金花巧G为对照，W己膳：水\〇. 01%磯酸=25~40:60~75为 流动相进行高效液相色谱测定。
[0006] 上述玉叶金花药材中玉叶金花巧G的含量测定方法，按照《中国药典》2010版一部 附录VID高效液相色谱法测定操作，包括W下步骤：
[0007] <1〉色谱条件与系统适用性实验
[000引 WC18键合硅胶为填充剂；W己膳：水\0. 01 %磯酸=25~40:60~75为流动 相；流速为0. 5~2ml?min-i;柱温为25~40°C;检测波长为260~270nm;理论板数应不 低于3000 ;
[0009] <2〉对照品溶液的制备
[0010] 精密称取玉叶金花巧G对照品适量，用甲醇制成0. 06~0. 60mg?ml4溶液；
[0011] <3〉供试品溶液的制备
[0012] 取玉叶金花药材粉末（过40目）2.0~5.Og，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇 30~40ml，超声30~50min，放冷，用甲醇补足失重，过滤，取续滤液，过0. 45ym微孔滤膜， 即得；
[001引 <4〉测定法
[0014] 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10~注入高效液相色谱仪，测 定，即得。
[0015] 上述玉叶金花药材中玉叶金花巧G的含量测定方法，按照《中国药典》2010版一部 附录VID高效液相色谱法测定操作，包括W下步骤：
[0016] <1〉色谱条件与系统适用性实验
[0017]WC18键合硅胶为填充剂；W己膳：水=38:62为流动相；流速为1ml?min-i;柱 温为25°C;检测波长为265皿；理论板数应不低于3000;
[001引<2〉对照品溶液的制备
[0019] 精密称取玉叶金花巧G对照品适量，用甲醇制成0. 60mg?ml4溶液；
[0020] <3〉供试品溶液的制备
[0021] 取玉叶金花药材粉末（过40目）3.Og，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇30ml， 超声40min，放冷，用甲醇补足失重，过滤，取续滤液，过0. 45ym微孔滤膜，即得；
[0022] <4〉测定法
[0023] 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 y以注入高效液相色谱仪，测定，即 得。
[0024] 针对目前玉叶金花药材仅有定性而无定量检测的问题，发明人通过对玉叶金花药 材中玉叶金花巧G的含量进行定量研究，建立了一种玉叶金花药材中玉叶金花巧G的含量 测定方法，W玉叶金花巧G为对照，W己膳：水\〇. 01%磯酸=25~40:60~75为流动相进 行高效液相色谱测定。该法完善了玉叶金花药材的质量检测标准，为玉叶金花药材质量标 准的建立奠定了基础。本发明选择玉叶金花药材中玉叶金花巧G为指标进行含量测定，精 密度高、重现性好、稳定性好、回收率高、测定结果准确，可有效控制玉叶金花药材的质量， 从而实现确保其临床用药的安全、有效。
【附图说明】
[0025] 图1是应用本发明含量测定方法的玉叶金花巧G对照品的高效液相色谱图。
[0026] 图2是应用本发明含量测定方法的玉叶金花对照药材的高效液相色谱图。
[0027] 图3是应用本发明含量测定方法的玉叶金花药材的高效液相色谱图。
【具体实施方式】
[002引玉叶金花药材中玉叶金花巧G的含量测定方法试验研究
[0029]1.仪器与试药
[0030] 1200系列高效液相色谱仪（美国Agilent)，Techmate C18色谱柱（4.6mmX250mm， 5 ym)，BSllOS型1/10万电子分析天平（梅特勒公司）。DFY-500粉碎机（浙江省温岭市 林大机械有限公司），9200S超声波清洗器（上海）。
[0031] 玉叶金花药材（采自十个不同产地）；玉叶金花对照药材购自中检所 (121404-200401);玉叶金花巧G对照品（自制），纯度98. 0%，"CNMR、iHNMR、MS谱图数据 与文献一致；甲醇、己膳均为色谱纯，其他试剂为分析纯。
[0032] 2.色谱条件的选择
[0033] 发明人在进行玉叶金花巧G色谱条件的选择时，尤其对检测波长及流动相系统进 行了选择。确定玉叶金花巧G的色谱条件为；TechmateC18(4.6 * 250mm，5]im)色谱柱； 己膳-水（38:6。为流动相；流速为1ml?min-i;柱温为25°C;检测波长为265nm。
[0034] (1)检测波长的选择
[0035] 对玉叶金花巧G进行全波长扫描，结果显示其在265nm有最大吸收，故选择265nm 为检测波长。
[0036] 似流动相的选择
[0037] 考察了不同比例己膳-水，己膳-磯酸水，甲醇-水为流动相对分离效果的影响。 结果表明，己膳-水（38:62)较合适，可使样品中目标峰与杂质峰达到分离，峰型较好，故选 为流动相。
[003引 3.供试品提取条件的选择
[0039] (1)提取溶剂的选择
[0040] 考察了甲醇、60%己醇及95%己醇作为提取溶剂，结果表明甲醇的提取效率较高。
[0041] (2)提取方法的选择
[0042] 对超声提取40min，热回流提取比，索氏提取化，=种提取方法提取率进行比较， 提取率基本一致，考虑超声提取方法操作简便、省时，故选择超声提取。
[0043] (3)提取时间的选择
[0044] 超声提取30min，40min，60min，对立者的提取率进行比较，发现30min提取率稍 低，40min与60min提取率基本一致，故最终选择供试品提取方法为加入甲醇，超声提取 40min。4.线性关系考察
[0045] 分别精密吸取玉叶金花巧G对照品溶液0,1. 0ml，2. 5ml，5. 0ml，7. 5ml于10ml量 瓶中，加甲醇溶液至刻度。分别进样20yl，按上述色谱条件测定峰面积。分别重复进样3 次；W对应的对照品浓度为横坐标，其峰面积平均值为纵坐标，绘制标准曲线。得回归方程 Y= 878. 44X+127. 79(r= 0. 9999)，线性范围 0. 06 ~0. 60mg/ml。
[0046] 5.精密度试验
[0047] 精密吸取上述玉叶金花巧G照品溶液各20y1，连续进样6次，峰面积的RSD为 1. 82%。
[0048] 6.重复性试验
[0049] 精密称取同玉叶金花样品共6份，按本发明所述含量测定方法中的供试品的制备 方法制备，测定得玉叶金花巧G含量的RSD分别为2. 84%。
[0050]7.稳定性试验
[0化1] 精密吸取同一供试品溶液分别于0, 2,4,6,8,1化进样，测定玉叶金花巧G含量的 RSD分别为0. 15%。表明供试液在12h内稳定。
[0化2] 8.加样回收率试验
[0化3] 采用加样回收法，取已知含量的样品，精密称定，分别精密加入一定量的玉叶金花 巧G，按照本发明技术方案中所述的供试品的制备方法来制备供试液，按照上述测定方法进 行测定，计算回收率，结果见表1。
[0054]表1加样回收率测定结果[0 化 5]
[0化6] 9.样品测定
[0化7] 按本发明所述的方法制备供试品和对照品溶液，分别进样，记录色谱图，计算玉叶 金花巧G的含量，结果见表2和图1至3。
[0化引表2 10批药材及玉叶金花对照药材中玉叶金花巧G的含量测定结果
[0059]
[0061] 实施例1玉叶金花药材（中检所对照药材121404-200401)中玉叶金花巧G的含 量测定
[0062] 按照《中