[0066](二）试样的制备及特征物质的测定：
[0067] (1) HS-GC-MS/MS法测定14种特征物质
[0068] A、样品制备：将成品卷烟A除去滤嘴，剥除接装纸，按照《YC/T 31烟草及烟草制 品试样的制备和水分测定烘箱法》进行水分测定；使用分析天平称取l.ooog烟丝（精确至 0. lmg)于20mL顶空瓶中，加入lmL内标溶液，迅速压紧瓶盖，适当振摇使烟丝均匀而松散的 平铺于瓶底。
[0069] B、静态顶空条件为：顶空瓶容量：20mL，样品环容量：3mL，样品平衡温度：100°C， 样品环温度：120°C，传输线温度：160°C，样品平衡时间：45min，GC循环时间：70min，样品瓶 加压压力：138KPa，加压时间：0. 20min，充气时间：0. 20min，样品环平衡时间：0. 05min，进 样时间：0. 50min ;可以根据所选择的程序升温条件，适当调整GC循环时间；
[0070] C、在GC-MS/MS测定时，采用的色谱条件具体如下：
[0071] a)色谱柱：DB-5MS弹性石英毛细管色谱柱（30mX0. 25mmX0. 25 ym，美国Agilent 公司）；或其他等效色谱柱，如HP-5MS弹性石英毛细管色谱柱（30mX0. 25mmX0. 25 ym)、 Rxi'_5Sil MS (30mX 0.25mmX 0.25 ym)等；
[0072] b)进样 口温度：250°C ;
[0073] c)程序升温条件：初始温度80°C (保持lmin)，以3°C /min的速率升温至 100°C (保持5min)，再以2°C /min的速率升温至118°C (保持3min)，再以2°C /min的速率 升温至150°C (保持3min);再以15°C /min的速率升温至250°C (保持20min);可以根据 样品的具体情况，选择其他合适的程序升温条件；
[0074] d)载气：He (纯度彡99. 99% ) ;Q2碰撞气：氩气（纯度99. 999% );
[0075] e)电离方式：EI源；电离能70ev ;灯丝电流：80yA ;离子源温度：170°C;传输线温 度：250°C ;
[0076] f)扫描方式：多反应监测MRM模式，CID气体压力为1. 5mtorr ;对每个离子的检测 时间为150ms。
[0077] D、测定结果的计算：用HS-GC-MS/MS法测定一系列特征物质标准溶液，用特征物 质与内标峰面积的比值作为纵坐标，特征物质的浓度与内标浓度的比值作为横坐标，分别 建立14种特征物质的标准工作曲线，曲线强制归零。对校正数据进行线性回归，线性相关 系数R 2须大于0.999。
[0078] 测定样品，根据样品中的峰面积计算14种特征物质的含量，计算其中某一种特征 物质的含量：
[0079]
[0080] 其中，Q表示检测分析得到的香味特征物质的含量，单位为ug/g ;
[0081] Ai为试样中香味特征物质的峰面积，单位为U (积分单位）；
[0082] As为内标物质的峰面积，单位为U (积分单位）；
[0083] ms为加入内标物质的量，单位为ug ;
[0084] m为称取烟丝质量，单位为g ;
[0085] w为待测烟丝水分含量，单位为％ ;
[0086] &为各特征物质的标准工作曲线斜率；
[0087] E、测定结果：
[0088](1)某品牌烟丝样品A按照所述的方法进行样品制备，用HS-GC-MS/MS法测定其 14种特征物质含量。结果见表4:
[0089] 表4 HS-GC-MS/MS法测定A品牌卷烟中14种特征物质（ug/g)的结果
[0090]
[0091]
[0092] (2) A品牌卷烟花香香韵指数（HA)的计算:
[0093] 基于上述测定结果，带入下面的公式：
[0094]
[0095] 式中：(^为i种香味特征物质的含量；t i种特征物质的香气阈值；0 i种香 味特征物质的0AV值，即n为香味特征物质的数目；为便于和感官评价结果比较，将各 个特征物质的0AV值乘以一个系数，&为各物质的0AV修正系数。14种特征物质的气味活 度值如表5所不。
[0096]表5 A品牌卷烟烟丝中14种特征物质的气味活度值（0汐
[0097]
Luuyy」Ais胛奄烟化曾曾韵佰数bi，衣明该is胛奄烟化曾曾怆权独，但升 未达到强烈的程度。
[0100] 实施例2 :
[0101] 重复实施例1的过程，选择另一品牌卷烟B，用HS-GC-MS/MS法测定其14种特征物 质含量，测定值如表6所示，14种特征物质的气味活度值如表7所示。
[0102] 表6 HS-GC-MS/MS法测定B品牌卷烟中14种特征物质（ug/g)的结果
[0103]
[0104]
[0105] 表7 B品牌卷烟烟丝中14种特征物质的气味活度值（〇i)
[0106]
[0107] B品牌卷烟花香香韵指数（HB) = 4. 83。表明该品牌卷烟花香香气风格较强，但比 A品牌卷烟花香香气风格较弱。
[0108] 实施例3 :
[0109] 组织14名具有全国卷烟感官评吸资格证书的技术人员对A、B两品牌卷烟样品的 香气风格指标（烤烟烟香、晾晒烟烟香、清香、果香、辛香、木香、青滋香、花香、药草香等）进 行评价，得到花香指标评判分值。结果如表8所示。
[0110] 表8 A和B两个品牌卷烟的花香香韵指数和感官评价值对比
[0111]
[0112] 从表8可知，实施例1-2所得出的花香香韵指数与花香指标感官评价分值没有显 著差异，证明了本发明所提出的表征和评价卷烟香气中花香特征的方法的准确可行性。而 且在实施过程中，可以避免常规感官评价方法的主观性，能更客观的对卷烟花香香气风格
【主权项】
1. 一种准确表征和评价卷烟香气中花香特征的方法，包括以下步骤： (1) 以0-紫罗兰酮、0-二氢大马酮、0-大马酮、苯乙醛、香茅醇、香叶醇、苯乙醇、香 芹酮、丁香酚、苯乙酸乙酯、乙酸苯乙酯、洋茉莉醛、肉桂酸苄酯和山楂花酮作为显著影响卷 烟花香香气风格的14种特征物质； (2) 特征物质标准工作曲线的建立： ① 标准储备液：每一种特征物质分别准确称取10.Omg的标准品，置于同一个lOOmL容 量瓶中，用二氯甲烷溶解并稀释定容，配制成质量浓度为l〇〇yg/mL的标准储备液，贮存在 4 °C冰箱中备用； ② 内标物萘溶于无水乙醇，浓度为100ug/mL; ③ 分别移取①所得标准储备液〇.lmL、0. 5mL、lmL、5mL、10mL，分别置于5个lOOmL容 量瓶中，分别加入lmL内标溶液，用二氯甲烷稀释得到浓度依次为0. 1yg/mL、0. 5yg/mL、 1yg/mL、5yg/mL、10yg/mL的化合物溶液，其中内标萘浓度为1yg/mL，作为工作标准溶 液； ④ 分别用14个特征物质的标准样品及内标的响应值比值与其浓度比值进行线性回 归，得到每一种特征物质的标准工作曲线，曲线强制归零，线性相关系数R2须大于0. 999 ; (3) 待测样品的前处理： a、 取待测样品的烟丝，按照《YC/T31烟草及烟草制品试样的制备和水分测定烘箱法》进 行水分测定； b、 称取1. 000g待测样品的烟丝，置于20mL顶空瓶中，加入lmL内标溶液，迅速压紧瓶 盖，振摇使烟丝均匀而松散地平铺于瓶底； (4) 用HS-GC-MS/MS法对待测样品进行分析与测定，仪器分析条件如下： ① 顶空仪分析条件： 顶空瓶容量：20mL，样品环容量：3mL，样品平衡温度：100°C，样品环温度：120°C，传输 线温度：160°C，样品平衡时间：45min，GC循环时间：70min，样品瓶加压压力：138KPa，加压 时间：0. 20min，充气时间：0. 20min，样品环平衡时间：0. 05min，进样时间：0. 50min; ② 色谱分析条件： DB-5MS毛细管柱；进样口温度：250°C;恒流模式，柱流量lmL/min;分流比：20:1 ;升温 程序：初始温度80°C，保持lmin，以3°C/min的速率升温至100°C，保持5min，再以2°C/min 的速率升温至118°C，保持3min，再以2°C/min的速率升温至150°C，保持3min;再以15°C/ min的速率升温至250°C，保持20min; ③ 质谱分析条件： EI电离模式，电离能70ev;灯丝电流：80yA;离子源温度：170°C;传输线温度：250°C;Q2碰撞气：氩气纯度99. 999%，CID气体压力为1.5mtorr;扫描方式：多反应监测MRM模式， 对每个离子的检测时间为150ms; 有关保留时间、定性离子对、定量离子对以及优化后的碰撞能量CE值如表1所示： 表1 :(5)读取待测样品各特征物质的响应值，用步骤（2)所建立的标准曲线对待测样品中 各特征物质初始数据进行校正，即得到待测样品中某一种特征物质的含量Ci:其中，Q表示待测样品中某一种特征物质的含量，单位为ug/g; Ai为待测样品中某一种特征物质的峰面积，单位为U; As为内标物质的峰面积，单位为U;ms为加入内标物质的量，单位为ug; m为称取烟丝质量，单位为g; w为待测烟丝水分含量，单位为％ ; 1为各特征物质的标准工作曲线斜率； (6)卷烟花香香韵指数H的计算： 14种特征物质对卷烟烟气花香均有贡献，通过气味活度值OAV来评价某一特征物质对 卷烟花香的贡献程度，卷烟花香香韵指数是14种特征物质气味活度值的加和： 卷烟花香香韵指数式中：Q为待测样品中i种特征物质的含量；ti种特征物质的香气阈值；0 i种 特征物质的OAV值，即11为特征物质的数目；因香味阈值很低，为便于和感官评价结果 比较，将各个特征物质的0AV值乘以一个系数，&为各个特征物质的修正系数，具体如表2 所示； 表2(7)卷烟花香香气风格特征评判： 按照表3的评分标准对卷烟香气进行评判； 表3卷烟花香香气风格评判标准卷烟香气中的花香特征与卷烟花香香韵指数H呈正相关关系，即卷烟花香香韵指数H值越高，则表明该卷烟的花香香气风格越显著。
【专利摘要】发明公开了一种准确表征和评价卷烟香气中花香特征的方法。通过HS-GC-MS/MS检测方法来获取致香物质定量数据，并通过相应致香物质的阈值来计算并构建得到卷烟花香香韵指数H。本发明操作简便、不易受杂质干扰、检测结果准确。GC-MS/MS的选择性和灵敏度比GC-MS高，避免了GC-MS灵敏度低、分辨率不足、选择性差、易产生假阳性结果、且不能给出足够的定性/定量信息等问题。本发明从物质基础的角度对卷烟花香特征进行了相应描述和表达，避免了感官评吸的主观性，客观综合表征及评价卷烟产品的花香香气风格。
【IPC分类】G01N30/88
【公开号】CN104991023
【申请号】CN201510404610
【发明人】许 永, 张承明, 蒋薇, 吴亿勤, 李超, 蒋茨清, 邹楠, 秦云华, 杨光宇, 缪明明, 陈章玉, 张建华, 李劲竹, 鲁媛
【申请人】云南中烟工业有限责任公司
【公开日】2015年10月21日
【申请日】2015年7月10日