一种gc-nci-ms测定水果和蔬菜中二溴氯丙烷残留的方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种二漠氯丙烷残留量的检测方法，具体地说，设及一种采用气相色 谱-负化学离子源-质谱（GC-NCI-MS)定性定量测定水果和蔬菜中二漠氯丙烷残留量的方 法，属于农药残留的检测技术领域。
【背景技术】
[0002] 二漠氯丙烷，俗称黑药，学名1，2-二漠-3-氯丙烷，英文名称1, 2-Dib;rom〇-3-chl oropropane(简称：DBCP)，CAS号为 96-12-8,分子量 236. 3328,结构式为：
二漠氯丙烷是液态熏蒸性杀线虫剂的活性成份。它是一种农业上使用的±壤熏蒸剂， 适用于蔬菜、花弁、烟草、草替等作物的苗床和溫室大棚的熏蒸，防治根结线虫、抱囊线虫、 短体线虫、螺旋线虫、纽带线虫、矮化线虫等。众多研究表明二漠氯丙烷对人体有剧毒，具有 高残留、致崎、致不育的特点。在发现它对人类健康造成不良影响之后，此化合物于1979年 被禁止及限制使用。但仍有不法分子为取得高效的种植效果，暗地使用该农药，为社会留下 不少隐患。
[0003] 国内外对于水果和蔬菜中二漠氯丙烷的检测研究开展的较少，且主要集中在上世 纪80年代。已有的研究主要是针对花生上的二漠氯丙烷，采用气相色谱技术进行其残留量 检测，但前处理手段落后、过程繁琐、检测效率低，且溶剂多为毒性较大的苯、乙烧、浓硫酸 等，对人体有较大危害。另外，气相色谱技术无法克服基质干扰、假阳性等问题，不能进行较 复杂基质中二漠氯丙烷的检测，限制了其使用范围。因此，迫切需要建立一种操作简单、回 收率高、重复性好、检出限低、选择性好的方法，适用于各种蔬菜和水果中二漠氯丙烷的检 测。
【发明内容】
[0004] 本发明要解决的问题是针对W上不足，提供一种GC-NCI-MS测定水果和蔬菜中二 漠氯丙烷残留的方法，克服传统技术检测步骤繁琐、溶剂用量大且苯、乙烧、浓硫酸毒性较 大、灵敏度低、回收率低、重现性差、方法不适用于果蔬基质的缺陷，采用本发明的方法，具 有检测快速简便、毒性小、灵敏度高、选择性强、重现性好、回收率高的优点。
[0005] 为解决W上问题，本发明采取W下技术方案：一种GC-NCI-MS测定水果和蔬菜中 二漠氯丙烷残留的方法，其特征在于，包括如下步骤： (1) 提取：称取粉碎好的样品置于具塞离屯、管中，加入无水硫酸儀、无水乙酸钢和0. 1% 醋酸/乙腊溶液，立即用玻璃棒充分揽拌均匀，均质后离屯、得样品提取液； (2) 净化：移取样品提取液上清液于旋蒸瓶中，旋蒸至近干，用乙腊溶解残渣，满旋振 荡，溶解液转入加有分散固相萃取剂和甲苯的离屯、管中，满旋振荡，离屯、，过膜得样品液； (3) 标准工作溶液的配制：采用样品空白基质提取液配制不同浓度标准工作液，然后用 标准溶液浓度-色谱峰面积作标准工作曲线； (4) 气相色谱-负化学源-质谱（GC-NCI-MS)测定 将步骤（3)中的各浓度的标准工作液进行GC-NCI-MS测定，用标准溶液浓度-色谱峰 面积作出标准工作曲线； 在相同条件下将步骤（2)中得到的样品液进行GC-NCI-MS测定，测得样品中二漠氯丙 烧的色谱峰面积，带入标准曲线，得到样品液中二漠氯丙烷的含量，然后根据样品液所代表 的质量计算得到样品中二漠氯丙烷的残留量。
[0006]W下是对上述技术方案的进一步说明： 步骤（1)中样品若为脱水蔬菜和水果，称样量减为正常值的十分之一，然后加水至正常 值，浸泡半小时，进行检测。
[0007] 步骤（2)中分散固相萃取剂由PSA和C18组成，加入量分别为150mg和200mg，甲 苯为lOOuL。
[0008] 步骤（4)中气相色谱条件为：色谱柱HP-5MS毛细管色谱柱，30*0. 25*0. 25;进样口 溫度270°C;载气：化气，不分流模式进样，进样量luL;恒流模式，柱流量1.OmL/min;程序 升溫：初溫50°C保持2min，W每分钟5°C的速度升至180°C，保持5min，然后W每分钟20°C 的速度升至210°C，保持5min;传输线溫度250°C。质谱条件为：离子源溫度：200°C;电离模 式：NCI;扫描模式：选择离子监测（SIM)模式；甲烧气流量：2血/min;监测的离子：79、81、 160、162,162为定量离子。
[0009] 步骤（4)中测定样品和标准工作溶液时，若两者相应农药的保留时间一致，并且在 扣除背景后的样品质谱图中所选择的离子均出现，且离子丰度比与标准溶液一致，则可判 断样品中残留此种农药，若不能同时满足上述两个条件，则判断不含该种农药。
[0010]回收率为 97. 96-103. 69%，检出限为 0. 75ug/kg，相对标准偏差RSD为 3. 02-5. 74〇/〇。
[0011] 本发明采用W上技术方案，与传统技术相比，具有W下优点：将分散固相萃取前 处理技术和气相色谱-负化学离子源-质谱检测技术相结合，本方法快速简便，采用醋酸、 乙腊作为溶剂，毒性小。检出限低至0. 75ug/kg，所W灵敏度高。回收率97. 40-103. 69%，所 W选择性强。RSD值3. 02-5. 74%，所W重现性好，有效的去除了基质的干扰，适用于各种蔬 菜水果及其制品中二漠氯丙烷的检测。同时在分散固相萃取前处理方法的净化步骤中加入 了甲苯，有效降低净化粉PSA对目标物的吸附，同一基质中使方法的回收率由不加甲苯时 的 69. 25-75. 37%，提高到 97. 96-103. 69% 之间。
[0012] 下面结合附图和实施例对本发明作详细说明。
【附图说明】
[0013] 附图1为添加在空白苹果基质中的二漠氯丙烷标液的选择离子色谱图； 附图2为空白苹果样品的选择离子色谱图； 附图3为添加在空白苹果基质中的二漠氯丙烷标液的质谱图。
【具体实施方式】
[0014] 现下实施实例来说明本发明，但并不是限制本发明的范围。
[001引实施例1:下面W苹果为例，说明二漠氯丙烷残留量的测定方法，包括如下步骤： (1)样品前处理 称取粉碎并充分混匀的苹果15g，置于lOOmL塑料离屯、管中，加入0. 1%醋酸/乙腊溶 液15mU无水硫酸儀6.Og，无水乙酸钢1. 5g，用玻璃棒充分揽拌均匀，于均质器上高速均质 2min，10000;r/min，4°C高速离屯、lOmin; 取10血上清液于250血旋蒸瓶中，旋蒸至近干，准确加入乙腊2血溶解残渣，140化/min满混2min，溶解液转移入盛有150mgPSA、200mgC18和lOOul甲苯的离屯、管中，1400r/ min满混2min，净化液4000;r/min，离屯、lOmin后用0. 45um滤膜过滤，供GC-NCI-MS分析。
[0016] (2)气相色谱-负化学源-质谱（GC-NCI-MS)测定 将不同浓度的标准工作液进行GC-NCI-MS测定，用标准溶液浓度-色谱峰面积作出标 准工作曲线；在相同条件下将样品液进行GC-NCI-MS测定，测得样品中二漠氯丙烷的色谱 峰面积，带入标准曲线，得到样品液中二漠氯丙烷的含量，然后根据样品液所代表的质量计 算得到样品中二漠氯丙烷的残留量。
[0017] (3)色谱条件和质谱条件 色谱条件： 色谱柱HP-5MS毛细管色谱柱，30*0. 25*0. 25 ;进样口溫度270°C;载气：化气，不分流 模式进样，进样量luL;恒流模式，柱流量1.OmL/min;程序升溫：初溫50°C保持2min，W每 分钟5°C的速度升至180°C，保持5min，然后W每分钟20°C的速度升至210°C，保持5min;传 输线溫度250°C。
[001引质谱条件： 离子源溫度：200°C;电离模式：NCI;扫描模式：选择离子监测（SIM)模式；甲烧气流量： 2血/min;监测的离子：79、81、160、162,162为定量离子。
[0019] (4)基质标准工作曲线 分别用苹果空白基质提取液配制标准工作液各点：〇. 02、0. 05、0. 1、0. 2、0. 5ug/mU按 照实验条件GC-NCI-MS测定，用标准溶液浓度-色谱峰面积作出标准工作曲线，求出回归方 程如表1。 加标回收率和重复性：
在不含二漠氯丙烷的空白苹果样品中加入50、100和200ug/kg=个浓度水平的二漠氯