一种四磨汤口服液的指纹图谱测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物质量控制技术领域，特别涉及一种四磨汤口服液的指纹图谱检测 方法，并由此得到其标准指纹图谱。
【背景技术】
[0002] 四磨汤由木香、槟榔、枳壳、乌药4味药材组成。该方主要具有顺气降逆，消积止痛 之功效，常用于婴幼儿乳食内滞证，症见腹胀、腹痛、啼哭不安、厌食纳差、腹泻或便秘，中老 年气滞、食积证，症见脘腹胀满、腹痛、便秘，以及腹部手术后促进肠胃功能的恢复。在临床 上应用较为广泛。
[0003] 四磨汤中的木香乃方中的君药，主要含有挥发油类成分，该类成分是木香发挥行 气止痛、健脾消食作用的主要成分，同时还具有松弛平滑肌和解痉的作用。
[0004] 四磨汤口服液作为中成药，其药效是多种活性成分共同作用的结果。目前四磨 汤口服液现行的质量标准为WS-10040- (ZD-0040)-2002,仅测定单一指标成分柚皮苷的 含量，未对其他有效成分进行监测，存在一定局限性，不能全面反映四磨汤口服液的质量水 平。针对四磨汤口服液的质量检测方法的公开专利只有二个，中国专利201110074548. 7 (公开号CN102221590A)采用HPLC法控制其辛弗林、去甲异波尔定及槟榔碱的含量，中国专 利201110125049. 6 (公开号CN102346177A)采用HPLC法构建指纹图谱对其质量进行控制。 经报道针对四磨汤口服液的质量检测方法如下，《中国药事》2014年第28卷第3期《四磨 汤口服液质量标准补充研究》中记录了用HPLC法测定四磨汤口服液中辛弗林、去甲异波尔 定、槟榔碱、柚皮苷、新城皮苷含量、《医药导报》2009年6月第28卷增刊《高效液相色谱法 测定四磨汤口服液中柚皮苷的含量》、《白求恩军医学院学报》2010年8月第8卷第4期《高 效液相色谱法测定四磨汤口服液中柚皮苷含量方法改进》等文章中记载了一种测定四磨汤 口服液中柚皮苷含量的HPLC方法；《湖南中医药大学学报》2009年8月第29卷第4期《高 效液相色谱法测定四磨汤口服液中槟榔碱的含量》记载了一种测定四磨汤口服液中槟榔碱 含量的HPLC方法；《中国医药导刊》2009年第11卷第1期《HPLC法测定四磨汤口服液中 辛弗林的含量》记载了一种测定四磨汤口服液中辛弗林含量的HPLC方法。现有技术中，虽 然对四磨汤口服液的多项指标成分进行了控制，但尚无对其挥发性成分进行有效控制的方 法，因此建立针对挥发性成分的指纹图谱检测方法对控制四磨汤口服液的质量具有非常重 要的意义。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种四磨汤口服液的指纹图谱检测方法，通过该测定方法可 控制四磨汤口服液中的挥发性成分从而控制其质量，以保证其临床疗效。
[0006] 本发明为一种四磨汤口服液的指纹图谱检测方法，其特征在于采用气质联用的方 法检测，包括以下步骤： (1)供试品溶液的制备：取四磨汤口服液，用挥发油提取器提取，即得供试品溶液； (2) 气相色谱条件：色谱柱为弹性石英毛细管柱；色谱柱程序升温条件：初始温度 45-60°C (保持 7min)，以 2-3°C /min 升温至 65-75°C (保持 lOmin)，再以 2-3°C /min 升温 至190-2KTC;气化室温度245-260°C;载气为高纯度氦气；载气流量为I. 53mL/min ;进样量 为0. 1 μ L ;分流比为1:50 ; (3) 质谱条件：离子源为电喷雾离子源（ΕΙ)，离子源温度为220~240°C ;电子能量为 70ev ;质量范围为35_400m/z ; (4) 测定：采用气质联用测定；吸取供试品溶液，注入气相色谱-质谱联用仪，测定，记 录70min色谱图，得到指纹图谱。
[0007] 本发明中，所述供试品溶液的制备方法采用挥发油提取器提取2~4h，优选的提取 时间为3h。
[0008] 本发明中，所述色谱柱为弹性石英毛细管柱，优选的色谱柱以交联5%苯基甲基聚 硅氧烷为固定相。
[0009] 本发明中，所述优选的色谱柱程序升温条件为：初始温度50°C (保持7min)，以 2. 5°C /min 升温至 70°C (保持 lOmin)，再以 2. 5°C /min 升温至 200°C。
[0010] 本发明中，所述的气化室温度250°C ;载气为高纯度氦气；载气流量I. 53mL/min ; 分流比1:50。
[0011] 本发明中，精密吸取注入气相色谱仪的供试品溶液的进样量为0. 1 μ 1。
[0012] 本发明中，采用气质联用仪测定；吸取供试品溶液，注入气相色谱-质谱联用仪， 测定，记录70min色谱图，根据谱库检索鉴定各峰对应组分的结构，并对色谱峰用面积归一 法进行计算，求取各组分的百分含量，以5号峰α -松油醇为参照峰，计算相对保留时间。
[0013] 本发明中，所述的四磨汤口服液的指纹图谱中单个峰面积均超过总峰面积1%并 确定成分的共有峰有8个，确定的成分如下：1号峰为顺-α，α-5-三甲基-5-乙烯基四 氢化呋喃-2-甲醇、2号峰为反式氧化芳樟醇、3号峰为芳樟醇、4号峰为（R)- (-)-4-萜品 醇、5号峰为α-松油醇、6号峰为香叶醇、7号峰为内型_1，3, 3-三甲基二环[2.2.1]庚 烷-2-醇乙酸酯、8号峰为亚麻酸。
[0014] 本发明中，所述的四磨汤口服液的指纹图谱中单个峰面积均超过总峰面积1%的 共有峰有8个，以5号峰α -松油醇为参照峰，计算相对保留时间，各峰的相对保留时间分 别为：（1)0. 523~0· 641、（2)0. 564~0· 689、（3)0. 610~0· 789、、（4)0. 825~0· 970、（5)1. 000、 (6) I. 266~1. 548、（7) I. 313~1. 618、（8) 2. 665~3. 035 ;优选的各峰相对保留时间分别为： (1) 0· 567~0· 601、（2) 0· 594~0· 641、（3) 0· 621~0· 761、（4) 0· 865~0· 930、（5) 1. 000、（6) L 342~1· 494、（7) L 353~1· 548、（8) 2. 765~2· 914。
[0015] 本发明优点如下： (1)四磨汤口服液中的木香、枳壳含有较多的挥发性成分，但现有质量标准中未对其进 行控制，以四磨汤口服液中的挥发性成分为指标建立的气质联用指纹图谱能有效的表征四 磨汤口服液的质量； (2 )本发明具有稳定性好、重现性好、精密度高的特点。
[0016] 下面结合最佳实施方式和附图对本发明作进一步的解释说明，对本发明不构成限 制。
【附图说明】
[0017] 图1为10批次样品图谱比较，谱图基本一致表明有效成分含量基本一致。
[0018] 图2对照指纹图谱。
[0019]
【具体实施方式】一四磨汤口服液指纹图谱的构建 下面通过具体实施例对本发明作进一步说明，该实施例仅用于说明本发明，并不限制 本发明的范围。
[0020] (1)仪器与试药 岛津QP2010UItra型GC/MS气质联用仪及GCMSsolutions工作站； HP-5MS石英毛细管柱（30mX0. 25mmX0. 25μπι)，安捷伦科技有限公司； MEGA-5MS石英毛细管柱（30mΧ0. 25mmΧ0. 25 μ m)，意大利麦格色谱公司； 四磨汤口服液(厂家：湖南汉森制药股份有限公司、批号=1408210、1408211、1408212、 1408310、1408309、1407205、1404306、1404302、1404309、1404318)。
[0021] (2)色谱条件的选择。
[0022] 升温程序的选择 由于样品中成分复杂，需对升温程序进行摸索，当按以下程序进行升温时，样品中各组 分均有较好的分离，基线平稳，故选用该升温程序