一种密蒙花中蒙花苷的测定方法
【专利摘要】本发明公开了一种密蒙花中蒙花苷的测定方法，包括以下步骤：步骤1：将密蒙花粉碎后采用ASE萃取法萃取得到萃取液；步骤2：将萃取液离心分离后，得到上清液；步骤3：将上清液采用液相色谱法进行分析；其中，液相色谱法的分析条件为：a)仪器：双三元液相色谱仪b)色谱柱规格：碳18色谱柱，3*100mm 3umc)柱温：40℃d)流速：0.5mL/mine)流动相：甲醇?0.1％醋酸溶液，具体来说，甲醇和质量百分比为0.1％醋酸溶液体积比48：52，该体积比为20℃条件下的体积比；f)检测波长：326nm。本发明提供了一种密蒙花中蒙花苷的测定方法，该方法操作简单，检测精度高。
【专利说明】
-种密蒙花中蒙花昔的测定方法
技术领域
[0001] 本发明设及实验室检测领域，特别是一种密蒙花中蒙花巧的测定方法。
【背景技术】
[0002] 2015年药典记录了提取密蒙花中蒙花巧的方法:取本品粗粉约0.5g，精密称定，置 索氏提取器中，加石油酸(60~90°C)100ml，加热回流2小时，弃去石油酸，药渣挥干，再加甲 醇100mL继续加热回流4小时，提取液置蒸发皿中，浓缩至适量，转移至50ml量瓶中，残渣及 容器用少量甲醇洗涂，洗液并入同一量瓶中.加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。在 1 SOOOr/min下离屯、3min，取上清液，进入LC测定。
[0003] 其液相色谱的参数为：W十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；W甲醇-0.1 %冰醋酸 (48:52)为流动相;检测波长为326nm。
[0004] 药典的方法操作过程复杂，对操作人员的操作技能要求高。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种密蒙花中蒙花巧的测定方法，该方法操作简单，检测精 度高。
[0006] 本发明提供的技术方案为:一种密蒙花中蒙花巧的测定方法，包括W下步骤：
[0007] 步骤1:将密蒙花粉碎后采用ASE萃取法萃取得到萃取液；
[000引步骤2:将萃取液离屯、分离后，得到上清液；
[0009] 步骤3:将上清液采用液相色谱法进行分析；
[0010] 其中，液相色谱法的分析条件为：
[0011] a)仪器:双=元液相色谱仪
[001^ b)色谱柱规格:碳18色谱柱，3*100mm 3um [OOU] c)柱溫：4(TC
[0014] d)流速:0.5mL/min
[0015] e)流动相：甲醇-0.1%醋酸溶液，具体来说，甲醇和质量百分比为0.1%醋酸溶液 体积比48:52，该体积比为2(TC条件下的体积比；
[0016] f)检测波长:326nm。
[0017] 在上述的密蒙花中蒙花巧的测定方法中，所述的步骤1具体为：
[0018] Sl 1:将密蒙花粉碎后，过筛；
[0019] S12:称取0.5重量份密蒙花粉，与0.5重量份娃藻±混合均匀待用；
[0020] S13:在预先放好过滤膜的萃取池中，加入适量的娃藻±至达到萃取池的池口；盖 上萃取池的盖子；
[0021] S14:对萃取池内的混合物进行去醋；
[0022] 去醋条件为：萃取溶剂为正己烧；萃取溫度80°C;静态萃取时间7min;冲洗体积 100%;静态循环次数1次。
[0023] S15: S14结束后，对萃取池内的混合物进行提取;提取结束后得到萃取液；
[0024] 提取条件为：萃取溶剂为甲醇；萃取溫度100°C;静态萃取时间5min;冲洗体积 60%;静态循环次数2次。
[0025] 在上述的密蒙花中蒙花巧的测定方法中，所述的萃取池的体积为10ml。
[0026] 在上述的密蒙花中蒙花巧的测定方法中，所述的S14和S15的静态萃取的压力均为 ISOOpsio
[0027] 在上述的密蒙花中蒙花巧的测定方法中，所述的S14的吹扫时间为200s，S15的吹 扫时间为60s。
[00%]在上述的密蒙花中蒙花巧的测定方法中，步骤2具体为:将萃取液在1500化/min的 条件下离屯、3min，取上清液。
[0029] 在上述的密蒙花中蒙花巧的测定方法中，所述的仪器为化ermo U3000 UHPLC液相 色谱仪。
[0030] 在上述的密蒙花中蒙花巧的测定方法中，所述的色谱柱为化ermo Syncronis C18。
[0031] 在上述的密蒙花中蒙花巧的测定方法中，所述的ASE萃取法所采用的仪器为 ASE350快速溶剂萃取仪。
[0032] 本发明在采用上述技术方案后，其具有的有益效果为：
[0033] 本发明的检测方法操作简单，精度与药典方法的精度一致，重复性好。
【附图说明】
[0034] 图1为本发明的色谱分析有效性验证的直角坐标图。
【具体实施方式】
[0035] 下面结合【具体实施方式】，对本发明的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制。
[0036] 实施例1:
[0037] 将密蒙花经粉碎机粉碎，过=号筛，约0.5g，精密称定，与0.5g娃藻±混合均匀，待 用，移入到预先放好过滤膜的ASEWlO ml萃取池中再加入适量娃藻±，轻轻振摇使之与池 口在同一水平线上，梓紧萃取池上盖。萃取结束后，把萃取液转移于50ml容量瓶中，用甲醇 稀释至刻度，在1500化/min下离屯、5min，取上清液，进入LC测定。
[0038] 萃取条件(见表1)为：
[0039] 表 1
[0040]
[0041 ]分析方法为LC液相色谱法，液相色谱分析条件：
[0042] a)仪器:Thermo双S元液相化-3000);
[0043] b)色谱柱：Thermo Syncronis C18 3*100mm 3um，即碳 18色谱柱，直径3mm，长度 100mm，粒径3微米；
[0044] 。)柱溫:40°(：;
[0045] d)流速:0.5mL/min;
[0046] e)流动相：甲醇-0.1 %冰醋酸(体积比48:52);
[0047] f)检测波长:326nm;
[004引色谱分析有效性验证：
[0049]取蒙花巧对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1 mg的溶液，即得。
[(K)加]取蒙花巧对照品溶液(浓度:0.1321mg/ml)，分别精密吸取该溶液0.扣1、化1、化1、 4山、5山进入LC测定，并依照上述方法测定，结果详见表2;附图1与表2对应，附图1横坐标表 示绝对进样量，纵坐标表示峰面积。
[0051]表 2
[0化2]
[0053] 实施例1的萃取方法的精确度测试
[0054] 采用实施例1的ASE萃取方法和药典的萃取方法对密蒙花进行萃取，密蒙花为4批， 批号分别为 1508090,151118,20150701,141201;
[0055] 实施例1的ASE萃取方法对同一批次的密蒙花平行测试两次，分别为ASEl和ASE2表 /J、- O
[0056] 具体测试结果见下表3;
[0化7] 表3 [0化引
[0059] W上所述的仅为本发明的较佳实施例，凡在本发明的精神和原则范围内所作的任 何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种密蒙花中蒙花苷的测定方法，其特征在于，包括以下步骤： 步骤1:将密蒙花粉碎后采用ASE萃取法萃取得到萃取液； 步骤2:将萃取液离心分离后，得到上清液； 步骤3:将上清液采用液相色谱法进行分析； 其中，液相色谱法的分析条件为： a) 仪器:双三元液相色谱仪 b) 色谱柱规格:碳18色谱柱，3*100mm 3um (：)柱温:40°〇 d) 流速:O · 5mL/min e) 流动相：甲醇-O. I %醋酸溶液，体积比48:52 f) 检测波长：326nm〇2. 根据权利要求1所述的密蒙花中蒙花苷的测定方法，其特征在于，所述的步骤1具体 为： Sl 1:将密蒙花粉碎后，过筛； S12:称取0.5重量份密蒙花粉，与0.5重量份硅藻土混合均匀待用； S13:在预先放好过滤膜的萃取池中，加入适量的硅藻土至达到萃取池的池口；盖上萃 取池的盖子； S14:对萃取池内的混合物进行去酯； 去酯条件为：萃取溶剂为正己烷；萃取温度80°C;静态萃取时间7min;冲洗体积100%; 静态循环次数1次。 S15: S14结束后，对萃取池内的混合物进行提取;提取结束后得到萃取液； 提取条件为:萃取溶剂为甲醇；萃取温度100 °C ;静态萃取时间5min;冲洗体积60 % ;静 态循环次数2次。3. 根据权利要求2所述的密蒙花中蒙花苷的测定方法，其特征在于，所述的萃取池的体 积为l〇ml。4. 根据权利要求2所述的密蒙花中蒙花苷的测定方法，其特征在于，所述的S14和S15的 静态萃取的压力均为1500psi。5. 根据权利要求2所述的密蒙花中蒙花苷的测定方法，其特征在于，所述的S14的吹扫 时间为200s，Sl 5的吹扫时间为60s。6. 根据权利要求1所述的密蒙花中蒙花苷的测定方法，其特征在于，步骤2具体为:将萃 取液在15000r/min的条件下离心3min，取上清液。7. 根据权利要求1所述的密蒙花中蒙花苷的测定方法，其特征在于，所述的仪器为 Thermo U3000 UHPLC液相色谱仪。8. 根据权利要求1所述的密蒙花中蒙花苷的测定方法，其特征在于，所述的色谱柱为 Thermo Syncronis C18〇9. 根据权利要求1所述的密蒙花中蒙花苷的测定方法，其特征在于，所述的ASE萃取法 所采用的仪器为ASE350快速溶剂萃取仪。
【文档编号】G01N30/02GK105954380SQ201610254580
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年4月22日
【发明人】陈学松, 王丽丽, 韦涛, 梁美艳, 黄新惠
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所