检测结核性肋膜炎的装置的制造方法
【技术领域】
[0001] 本实用新型是关于一种结核性肋膜炎的装置，特别是关于一种利用生物标记以检 测结核性肋膜炎的装置。
【背景技术】
[0002] 结核病（tuberculosis)是由结核菌所引起的疾病，是一全球性的慢性传染病，在 未开发及开发中国家尤其盛行。在台湾一年四季都有结核病的病例，其中男性的发生率 比女性高，老年人发生率比年轻人高。根据世界卫生组织的估计，2013年当中全球大约有 九百万人罹患结核病，一百五十万人死于结核病。在所有的结核病当中，大约有5~10% 的病人会有结核性胸水（tuberculouspleuraleffusion)的表现，是第二常见的肺外结核 (extra-pulmonarytuberculosis)。在常规的胸水检验中，结核性胸水的典型表现是以淋 巴球为主的发炎性渗出液（lymphocyte-predominantexudate)。然而，不一定只有结核性 胸水会发生以淋巴球为主的发炎渗出液，其他可能产生淋巴球为主的发炎性渗出液的疾病 包括恶性肿瘤（malignancies)、自体免疫疾病（autoimmunedisease)等等。
[0003]因为诊断结核性胸水的黄金准则是胸水或肋膜组织的分枝杆菌培养，这一般需要 数周的时间，而且敏感度只有40~63%。因此，早期诊断结核性胸水通常不容易，因而造 成治疗上的延误，导致死亡率提高。为了解决这个问题，许多人尝试使用胸水中的生物标记 (biomarker)来帮助诊断。但在过去的研究中，生物标记对于诊断结核性胸水的敏感度并不 高，约为45. 2%。对于临床上使用而言，生物标记的检测一般需要敏感度与特异度二者同时 皆达到80%以上，才具有临床上检测的效益及所要求的准确度。而且，对于所使用的检测技 术来说，需要各种实验仪器与设备才能进行，因此没有办法全面性的应用在医疗上，更无法 提供床边检验（P〇int-〇f-caretesting)的方便性与可近性。 【实用新型内容】
[0004] 为解决上述问题，本实用新型提供一种检测结核性肋膜炎的装置，包含：至少一 基板；至少四样本接收区，分别或一同设置于该至少一基板上，该至少四样本接收区分别 设有一第一抗体、一第二抗体、一第三抗体及一第四抗体，且该第一抗体、该第二抗体、该第 三抗体及该第四抗体会分别与一生物标记组合中的生物标记结合；以及至少四检测区，设 置于该至少一基板上，以液体通道分别连接该至少四个样本接收区，该至少四检测区分别 设有一第五抗体、一第六抗体、一第七抗体及一第八抗体，且该第五抗体、该第六抗体、该 第七抗体及该第八抗体会分别与该生物标记组合中的生物标记结合而在超过一预设阈值 时显色；其中，该生物标记组合包含：组A.介白素-IP(IL-IP)与丙型干扰素诱导蛋白 IO(IP-IO)、介白素-2(IL-2)与丙型干扰素诱导蛋白IO(IP-IO)、或肿瘤坏死因子第一型可 溶性受体（TNF-sRl)与第三型诱饵受体（DcR3)、组BI.腺苷脱胺酶（ADA)或组B2.颗粒溶 解酶A(GranzymeA)、及组C?丙型干扰素（IFN-y) 〇
[0005] 在本实用新型的一实施例中，组A所含的生物标记为介白素-IMIL-1P)与丙型 干扰素诱导蛋白IO(IP-IO)。
[0006] 在本实用新型的另一实施例中，组A所含的生物标记为介白素-2 (IL-2)与丙型干 扰素诱导蛋白IO(IP-IO)。
[0007] 在本实用新型的又一实施例中，组A所含的生物标记为肿瘤坏死因子第一型可溶 性受体（TNF-sRl)与第三型诱饵受体（DcR3)。
[0008] 另外，在本实用新型的一实施例中，该装置进一步包括四对照区，设置于该至少一 基板上，以液体通道分别连接该至少四个检测区，该些对照区设有一第九抗体；其中，该第 一抗体、该第二抗体、该第三抗体、及该第四抗体会与该第九抗体结合而显色。
[0009] 其中，该装置可选择性地包含一基板、二基板、三基板或四基板以设置四个样本接 收区、四个对照区及四个检测区。
[0010] 在本实用新型一实施例中，分析结核性肋膜炎患者的胸水，得到若同时侦测包含 组A.介白素-10 (IL-IP)与丙型干扰素诱导蛋白IO(IP-IO)、介白素-2(IL-2)与丙型干 扰素诱导蛋白IO(IP-IO)、或肿瘤坏死因子第一型可溶性受体（TNF-sRl)与第三型诱饵受 体（DcR3);组BI.腺苷脱胺酶（ADA)或组B2.颗粒溶解酶A(GranzymeA);以及组C.丙型 干扰素（IFN-Y)的生物标记组合，并加以适当的阈值，其诊断结核性肋膜炎的特异度及敏 感度皆可达到80%以上；尤其是同时侦测IFN-y、ADA、TNF-sRl、和DcR3、或是IFN-y、颗粒 溶解酶A、TNF-sRl、和DcR3这二组生物标记，特异度可分别达86. 7 %和90. 0 %，且大幅提高 结核性肋膜炎诊断的敏感度达到82. 9%和80. 0%。目前在先前研究或是临床上，第三型诱 令耳受体（DcR3)、肿瘤坏死因子第一型可溶性受体（TNF-sRl)、和颗粒溶解酶A(GranzymeA) 从未有使用于胸水（pleuraleffusion)检验的经验。本实用新型的装置利用这三个生物 标记，搭配丙型干扰素（IFN-y)、腺苷脱胺酶（ADA)浓度检测胸水，预想不到能够大幅提高 结核性肋膜炎的诊断率。本实用新型解决传统检查中低敏感度、使用上的不方便以及高成 本的问题，转而提供快速、准确、及便宜的床边检测方法及装置。
[0011] 以下将配合图式进一步说明本实用新型的实施方式，下述所列举的实施例是用以 阐明本实用新型，并非用以限定本实用新型的范围，任何熟习此技艺者，在不脱离本实用新 型的精神和范围内，当可做些许更动与润饰，因此本实用新型的保护范围当视后附的申请 专利范围所界定者为准。
【附图说明】
[0012] 图I(a)~（c)为本实用新型检测结核性肋膜炎的装置及使用状态的示意图；
[0013] 图2为本实用新型检测结核性肋膜炎的装置，使用一基板的示意图；
[0014] 图3为本实用新型检测结核性肋膜炎的装置，使用二基板的示意图；
[0015]图4为本实用新型检测结核性肋膜炎的装置，使用三基板的示意图；
[0016] 图5为本实用新型检测结核性肋膜炎的装置，使用四基板的示意图。
[0017][附图标记说明]
[0018] 11-基板，12-样本接收区，13-检测区，14-对照区，15-样本垫，16-吸湿垫，90-样 本，901-待测生物标记。
【具体实施方式】
[0019] 本实用新型提供一种检测结核性肋膜炎的装置，包含：至少一基板；至少四样本 接收区，分别或一同设置于该至少一基板上，该至少四样本接收区分别设有一第一抗体、 一第二抗体、一第三抗体及一第四抗体，且该第一抗体、该第二抗体、该第三抗体及该第四 抗体会分别与一生物标记组合中的生物标记结合；以及至少四检测区，设置于该至少一 基板上，以液体通道分别连接该至少四个样本接收区，该至少四检测区分别设有一第五抗 体、一第六抗体、一第七抗体及一第八抗体，且该第五抗体、该第六抗体、该第七抗体及该 第八抗体会分别与该生物标记组合中的生物标记结合而在超过一预设阈值时显色；其中， 该生物标记组合包含：组A.介白素-IP(IL-IP)与丙型干扰素诱导蛋白IO(IP-IO)、 介白素-2(IL-2)与丙型干扰素诱导蛋白10(IP-10)、或肿瘤坏死因子第一型可溶性受 体（TNF-sRl)与第三型诱饵受体（DcR3)、组BI.腺苷脱胺酶（ADA)或组B2.颗粒溶解酶 A(GranzymeA)、及组C?丙型干扰素（IFN-y)
[0020] 在本实用新型的一实施例中，组A所含的生物标记为介白素-IMIL-1P)与丙型 干扰素诱导蛋白IO(IP-IO)。
[0021] 在本实用新型的另一实施例中，组A所含的生物标记为介白素-2 (IL-2)与丙型干 扰素诱导蛋白IO(IP-IO)。
[0022] 在本实用新型的又一实施例中，组A所含的生物标记为肿瘤坏死因子第一型可溶 性受体（TNF-sRl)与第三型诱饵受体（DcR3)。
[0023] 另外，在本实用新型的一实施例中，该装置进一步包括四对照区，设置于该至少一 基板上，以液体通道分别连接该至少四个检测区，该些对照区设有一第九抗体；其中，该第 一抗体、该第二抗体、该第三抗体、及该第四抗体会与该第九抗体结合而显色。
[0024] 肿瘤坏死因子第一型可溶性受体（TNF-sRl)是肿瘤坏死因子发炎路径中的一员， 属于一种前发炎性细胞激素（proinflammatorycytokine)，在发炎反应时会刺激巨嗜细胞 与单核球大量表现，并启动下游的细胞激素表现，可作为严重发炎的相关指标。第三型诱饵 受体（DcR3)是肿瘤坏死因子受体的一种，可调控树突细胞（dendriticcell，DC)与噬骨细 胞（osteoclast)的分化与活化，并抑制巨细胞（macrophage)的吞作用，在发炎组织会 高度表现。丙型干扰素（IFN-y)是免疫系统中的T细胞和自然杀手细胞活化所产生，是人 体对结核菌的免疫反应中最重要的一员。腺苷脱胺酶（ADA)是体内代谢嘌呤的酵素，可将 嘌呤代谢成阿摩尼亚。
[0025] 根据台湾最近的研究数据显示，以75pg/mL为截切点单单侦测胸水中的丙型干 扰素来诊断结核性肋膜炎时，特异度（specificity)为96. 7%、敏感度（sensitivity)为 65. 7% ;以40IU/mL为截切点仅侦测胸水中的腺苷脱胺酶时，特异度为98. 3%、敏感度为 40. 0%。因此，虽然两种生物标记特异度高，但敏感度是临床