专利名称：用于脂肪组织的抗体的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种生产束缚脂肪组织的抗体，尤其是束缚动物(例如饲养动物)和/或人类的体内脂肪组织内质膜的特征成分的多克隆抗体的方法。本发明还涉及根据本方法可获得的抗体、抗体的使用、包含抗体的饲料添加剂、包含抗体的药物和一种调节需要抗体的目标动物体内脂肪组织含量的方法。
背景技术：
在畜牧场里，一个主要的目的是提高饲养动物的生长速率，以至于在一般相同的管理条件下，动物将更快地成长，因而能够提高畜牧场的生产率。在过去，在畜牧场里采用现代技术之前，通常畜牧者只是简单地用更多食物喂养动物，从而希望更多的食物消耗促进动物成长，并且使体重增加地更快。然而，这种能够帮助动物增加体重的方法有局限性。而且，其缺点是这个方法会增加动物饲料的总消耗量和由此不被希望转化的更高的操作费用。
另一种促进饲养动物成长的方法是给动物使用生长素。但是基于许多原因，这个方法是不被希望的。首先，来自不同动物的生长素很少是同质的，并且不同的哺乳类动物，例如，只与某一种特定的生长素类型起反应。因为合适的外源生长素通常是从脑下垂体提取出来的，所以准备足够用于大规模应用的合适的外源生长素是相当困难和不经济的。尽管现在，通过DNA重组技术能够制备外源生长素，但是使用这样的方法制作外源生长素仍然相当昂贵。其次，将外源生长素用于饲养动物通常是通过直接注射进行的，不可避免地，其相当地昂贵，而且对拥有成千上万动物的大型畜牧场的应用也是困难的。第三，相当难以控制精确地产生所希望的效果的服用剂量，并且过量的外源生长素可能对动物有害。第四，外源生长素的剩余物可能进入到肉产品中，并且随着其消耗品进入到人体中。即使一些科学家关注这些外源生长素对人类的负面影响，但关于这方面仍然需要进一步地研究。
也曾计划在动物饲料中加入各种饲料添加剂，以使得由这些饲料喂养的动物会成长地更快。不幸的是，不管使用上述哪种方法，通常的情况是增长的体重中相对比较大的比例来自脂肪含量的增长，而不是来自肌肉含量的增长。尽管在其他饲养动物身上有类似的问题，但是在猪身上尤为突出。由于人类变得越来越具有健康意识，所以几乎没有任何对高脂肪含量的肉制品的需求。因此，对尽可能少脂肪含量(即高肌肉含量)的肉制品的需求增长。
许多方法用来促使含高肌肉含量的饲养动物发展。一个非常古老的方法是在开放或半开放的农场饲养动物，以使得动物能有更多的机会锻炼，从而减少体内的脂肪含量。但是，由于空地是非常珍贵的，这个方法在现代农场的实践中几乎是不可能实现的。除此以外，这个方法相当难预测。根据这个方法得到的动物体内可能仍然有较高的脂肪含量。
因此，一种调节和减少饲养动物内脂肪含量的物质需求仍然存在。优选地，这个物质应该易于使用和天然的，并且不应该有类似于由人造的或外源的生长素引起的副作用。换句话说，这个物质应该能安全使用。应用于饲养动物的物质还应该在修改后优选应用于人类。
因而，本发明的目的是提出上述论点，或者至少提供给公众一种有用的选择。
发明内容
根据本发明的第一方面，提供一种生产抗体的非治疗方法，该抗体束缚需要抗体的目标动物内的脂肪组织，以调节目标动物的脂肪组织含量，方法包括以下步骤(1)用源动物的脂肪组织制备抗原；(2)对产蛋动物使用抗原促使抗体的生成；和(3)从产蛋动物的蛋中获得抗体，其中源动物和产蛋动物属于不同物种。
抗体是用来束缚目标动物脂肪组织质膜的特征成分。尤其是，抗体可以束缚目标动物脂肪组织的粒状粘质蛋白和/或纤维粘质蛋白。抗体适合特定地束缚特征成分。特定束缚特征成分的意思是抗体具有低的、或是没有明显的可交叉反应能力。
该方法包括促使来自产蛋动物体内的抗体生成的步骤。有利地，该方法包括促使抗体在产蛋动物的蛋中沉积的步骤。尤其是，从蛋中获得抗体的步骤可以包括从蛋的蛋黄中分离抗体的步骤。抗原适合包括源动物脂肪组织的质膜、其脂肪组织质膜表层蛋白、或其片段。
优选地，抗体是多克隆抗体。
优选地，源动物和产蛋动物属于明显不同的物种。产蛋动物优选是禽类动物，源动物可以是非禽类动物。尤其是，产蛋动物可以是母鸡，源动物可以是哺乳动物，例如猪。
优选地，目标动物和产蛋动物属于不同物种。更优选地，目标动物和产蛋动物属于明显不同的物种。明显不同的物种的意思是他们在种系上是截然不同的。例如，猪是哺乳动物，母鸡是禽类，他们是明显不同的物种。
优选地，目标动物和源动物属于相同物种。作为选择，目标动物和源动物属于接近物种。接近物种的意思是他们在种系上是有关联的。例如，猪和老鼠是接近物种，他们都是哺乳动物，而且相应从猪脂肪组织制备的抗原产生的抗体能够非常充分地对调节老鼠体内脂肪组织含量起作用。
在一项实施方案中，目标动物是饲养动物。尤其是，源动物和/或所述目标动物可以是猪。猪的脂肪含量经常高于其他的饲养动物，并且使用了抗体的猪体内的脂肪组织明显减少。但是，目标动物可以是其他需要调节其脂肪组织的动物。例如，目标动物可以是用以生产较瘦牛肉的牛。
在方法实施后，一个或者全部动物可能死掉。
在另一项实施方案中，目标动物是患者。
根据本发明的第二个方面，提供了根据上述限定的方法可获得的抗体。根据本发明的第三个方面，提供了应用于治疗和诊断方法的抗体。
根据本发明的第四个方面，提供了上述限定的抗体在用于治疗引起过度脂肪组织状况的药剂制备的使用。
根据本发明的第五个方面，提供了一个含有如上所限定的有效量抗体的饲料添加剂。尤其是，饲料添加剂可以适合于降低目标动物内脂肪组织的含量。
在一项实施方案中，饲料添加剂可能包括含有抗体的蛋的蛋黄。
根据本发明的第六个方面，提供了含有如上所限定的有效量抗体的药剂。优选地，药剂适合通过食用的方式使用。作为选择，药剂也适合通过注射的方式使用。
根据本发明的第七个方面，提供了一种调节需要抗体的目标动物体内脂肪组织含量的方法，包括以下步骤(1)用源动物脂肪组织制备抗原，(2)对产蛋动物使用抗原，(3)由相应抗原的产蛋动物产生抗体，(4)从产蛋动物的蛋中获得抗体，和(5)向目标动物使用药学有效量的抗体，其中源动物和产蛋动物属于不同物种。尤其是，可获得的步骤包括从蛋的蛋黄中分离抗体。
优选地，方法包括通过食用的方式使用抗体。作为选择，方法包括通过注射的方式使用抗体。
调节的方法包括将抗体束缚目标动物脂肪组织质膜的特征成分的步骤。该方法可以包括抗体束缚目标动物脂肪组织的粒状粘质蛋白的步骤。该方法还可以包括抗体束缚目标动物脂肪组织的纤维粘质蛋白的步骤。尤其是，抗体适合特定地束缚特征成分。特定束缚特征成分的意思是抗体有低的，或是没有值得注意的交互反应能力。
优选地，抗原包括源动物脂肪组织的质膜、其脂肪细胞质膜表层蛋白、或其片段。
优选地，抗体是多克隆抗体。
优选地，源动物和产蛋动物属于明显不同的物种。产蛋动物优选为禽类动物，源动物可以是非禽类动物。尤其是，产蛋动物可以是母鸡，源动物可以是哺乳动物，例如猪。
优选地，目标动物和产蛋动物属于不同物种。更优选地，目标动物和产蛋动物属于明显不同的物种。明显不同的物种的意思是他们在种系上是截然不同的。例如，猪是哺乳动物，母鸡是禽类，他们是明显不同的物种。
优选地，目标动物和源动物属于相同物种。作为选择，目标动物和源动物属于接近物种。接近物种的意思是他们在种系上是有关联的。例如，猪和老鼠是接近物种，他们都是哺乳动物，而且相应从猪脂肪组织制备的抗原产生的抗体能够非常充分地对调节老鼠体内脂肪组织含量起作用。
调节方法可以是非治疗方法。
在一项实施方案中，目标动物是饲养动物。尤其是，源动物和/或目标动物可以是猪。
优选地，产蛋动物是禽类动物，源动物可以是非禽类动物。尤其是，产蛋动物可以是母鸡，源动物可以是猪。
方法实施后，一个或多个的动物可能死亡。
在另一项实施方案，目标动物是患者。
根据本发明的第八个方面，提供了生产抗体的方法，该抗体束缚需要抗体的目标动物内脂肪组织，以调节目标动物内脂肪组织的含量，方法包括以下步骤(1)从源动物脂肪组织制备抗原，(2)对产蛋动物使用抗原促使抗体的产生，和(3)从产蛋动物的蛋中获得抗体，其中源动物和产蛋动物属于不同物种。
根据本发明更进一层方面，提供了特定束缚目标实验者内脂肪组织的抗体，该目标实验者为需要抗体调节目标动物内脂肪组织含量的饲养动物或患者。抗体束缚脂肪组织质膜的特征成分。尤其是，抗体可以束缚脂肪组织的粒状粘质蛋白。抗体也可以束缚脂肪组织的纤维粘质蛋白。
抗体从和/或包含在产蛋动物的蛋中获得的。抗体沉积在产蛋动物的蛋上。从产蛋动物的体内产生抗体。与施加给产蛋动物的抗原相对应产生抗体。
从源动物的脂肪组织制备抗原。抗原包括源动物脂肪组织质膜和/或其脂肪细胞质膜表层蛋白。
优选地，目标动物和源动物属于相同物种。作为选择，目标动物和源动物属于接近物种。
优选地，源动物和产蛋动物属于明显不同的物种。
优选地，抗体是多克隆抗体。
根据本发明更进一层方面，提供包括含有上述限定的有效量抗体的饲料添加剂。该饲料添加剂适合降低目标动物内脂肪组织的含量。
根据本发明更进一层方面，提供了含有上述限定的药学有效量抗体的药剂。该药剂适合通过食用的方式使用。药剂适合通过注射的方式使用。
根据本发明更进一层方面，提供了一种调节需要抗体的目标实验者体内脂肪组织含量的方法，该目标实验者是饲养动物或患者，该方法包括使用上述限定的药学有效量的抗体的步骤，该抗体特定束缚目标动物内的脂肪组织。
所述方法包括抗体束缚脂肪组织质膜的特征成分的步骤。尤其是，该方法可以包括抗体束缚脂肪组织的粒状粘质蛋白的步骤。该方法还可以包括抗体束缚脂肪组织内的纤维粘质蛋白的步骤。
方法包括通过食用以使用所述组合物的步骤。
抗体是多克隆抗体。
根据本发明更进一层方面，提供了一种含有上述限定的药学有效量抗体的组合物制作方法，该方法包括从产蛋动物的蛋中获得抗体的步骤。优选地，方法包括使抗体沉积在产蛋动物的蛋中的步骤。
优选地，该方法包括促使来自产蛋动物体内的抗体产生的步骤。尤其是，该方法包括在产蛋动物内产生与用源动物脂肪组织制备的抗原相应的抗体的步骤。该方法包括对产蛋动物使用抗原的步骤。
优选地，抗原包括源动物脂肪组织质膜和/或其脂肪细胞质膜表层蛋白。
优选地，目标动物和源动物属于相同物种。作为选择，目标动物和源动物属于接近物种。
优选地，源动物和产蛋动物属于明显不同的物种。
优选地，抗体是多克隆抗体。
组合物可以包括含有所述抗体的蛋黄。
本发明具体实施方案可以从“生产”动物的脑下垂体中产生和提取生物物质(例如，生长素)。生产动物的意思是作为机器的动物用来生产所希望得到的生物物质。根据生物物质的种类或性质，事实上，可以使用不同的方法获得或分离它们。例如，如果生物物质是一种在生产动物中以牛奶初乳存在的生长素，那么将进行其生长素的适当分离方法。作为选择，如果生长素是在生产动物中以血清存在的，那么将进行其生长素的另一种合适的分离方法。但是，无论使用哪种分离方法，都已发现足够数量的来自动物源以作为商业用途的生物物质的分离是非常困难的。首先，困难是由通常生产的生物物质的数量非常少产生的，其次，来自动物的生物物质的分离是非常昂贵的。同样的困难类似地存在于来自生产动物的特定抗体的提取或分离。
在本发明中，论证了当用于可以是饲料动物的目标动物时，根据本发明制备的抗体减少或至少调节其体内的整个脂肪含量至一个更被希望的标准，从而生产瘦肉。当本发明用于人类的使用时，目标动物的意思是需要抗体的患者。
通常，首先从源动物中移出脂肪组织。然后，从脂肪组织中分离脂肪组织的质膜。分离后的质膜包括所有的脂肪细胞质膜蛋白和如粒状和纤维粘质蛋白的识别部位。分离后的质膜用于制备作为抗原使用的物质。优选地，物质形成适合于注射的形式，并且设计为有免疫有效浓度的抗原，该抗原适合于引出生产动物内所需的免疫响应。
在本发明中，将所述物质用于如母鸡的产蛋动物的生产动物。尤其优选的是母鸡作为生产动物的使用，因为通常母鸡产的蛋多于其他产蛋家禽。例如，经济农场中平均一只母鸡通常每年能够产的蛋是200到300个。从而生产的蛋黄的数量是非常可观的。但是，其他产蛋动物，如鸭也可以使用。
一旦将含有抗原的物质用于生产动物，例如通过注射，生产动物体将要和抗原发生反应，并且引起免疫响应来产生抗体。如上所述，应用物质中的抗原实际上包括来自源动物的脂肪组织的质膜，或其片段。因而，由产蛋动物生产的抗体是多克隆的，并且适于束缚各种不同的特征成分，即质膜的脂肪细胞质膜蛋白。在本发明的研究和发展中，确定的是生产动物体内产生的相当数量的抗体沉积在随后由生产动物产下的蛋中。进一步确定蛋的蛋黄中的抗体浓度要比蛋清中的高得多，以显示出抗体优选沉积在蛋黄中。换句话说，在本发明内容中提出了从动物源中产生和分离生物有效物质的问题。尤其是，能够将蛋看作可从中相当容易回收抗体的仓库。也是由于这个原因，因母鸡能够产相当数量的蛋，从而母鸡优选作为生产动物使用。
然后，能够从蛋黄中分离产生的抗体。换句话说，可以直接或处理后使用包含抗体的原始蛋黄，如使其干燥形成蛋黄粉。然后，将有效量的分离后抗体，也就是原始或处理后的包含抗体的蛋黄应用于目标动物。本发明的一个主要应用是打算用于动物农场，并且其中目标动物可以是饲养动物。然而，如上所述，本发明可以用于人类的使用，那么目标动物可以是需要抗体的患者。
当用于目标动物时，抗体将束缚与源动物脂肪组织的脂肪细胞质膜蛋白相似的特征结构或范围(例如，目标动物内细胞的表层蛋白)。例如，如果源动物是猪，目标动物属于猪的相同物种，使用的抗体将束缚目标动物体内脂肪组织的脂肪细胞质膜，并且干扰其脂肪组织的生理发展。已经确定的是，在本发明的研究和开发中，依据其重量百分比和绝对重量，这样的束缚和/或干扰明显降低目标动物内脂肪组织的含量。
如上所述，源动物和目标动物可以属于动物的相同物种。源动物和目标动物越是紧密关连，以目标动物脂肪组织为目标，并且最终降低或至少调节目标动物体内的脂肪含量的产生的抗体就越有效。然而，源动物和目标动物不需要属于相同物种。例如，源动物可以是牛，但目标动物可以是猪。由于牛和猪都是哺乳动物，它们的脂肪组织，尤其是它们的质膜要比如禽类与哺乳动物之间的质膜有更多的相似之处。总而言之，源动物和目标动物越是紧密关连，抗体束缚、干扰、调节和/或减少目标动物体内的脂肪含量越有效。
但是值得注意的是，源动物和生产动物应该优选为完全不同的。否则，用于生产动物的含有抗原的物质不能引起有效的免疫响应来产生足够量的抗体。例如，如果源动物是鸭子，从其脂肪组织中制备出来的抗原在母鸡中会引起相对低的免疫响应，因为鸭子和母鸡两者均是禽类动物，并且它们的脂肪组织是相对相似的。源动物和生产动物应该是不同的，因为动物不能产生被认为是“自身”抗原的抗体。
通过以下试验进一步描述本发明。
试验试验1在母鸡内产生用于猪脂肪组织的抗体的方法
A.从源动物的脂肪组织中分离质膜从源动物的背部移出脂肪组织。试验中使用的源动物是二花脸猪。用韦林氏搅切机在2000rmp下在37℃左右的萃取介质中处理并搅匀脂肪组织5分钟，然后用超声处理10分钟。萃取介质是由0.25M的蔗糖、0.01M的Na2HPO4、0.002M的EDTA和0.2mM的PMSF组成，并且在40℃调节pH值为7.4。然后，将均匀混合物在37℃下以5000rmp用离心分离30分钟，以使甘油三酸脂从其他组分中分离出来。
然后，将含有甘油三酸脂的上清液从离心机中移出，并且使剩余物，即下层液，在4℃以10000rpm离心分离30分钟。然后将其上清液在4℃以10000rpm离心分离30分钟且保留上清液。然后将其上清液在4℃以38000rpm分离1小时。从脂肪组织得到含有其的脂肪细胞膜蛋白的质膜。其后，在-20℃保存膜蛋白直至使用。
B.猪脂肪细胞质膜及其蛋白的抗体的产生从上述方法中得到的质膜用于制备引起来自生产动物的免疫响应的抗原。本试验中，产蛋的母鸡用来作为生产动物。试验中，制备出来的包括抗原的初始注射剂含有最初悬浮在0.5ml完全的弗氏佐剂中的大约80μg质膜以及其蛋白。悬浮在不完全的弗氏佐剂以促进免疫响应的包括同样抗原的第二个注射剂随后也可以通过直接注射使用。间隔每四周一次，在母鸡的20个不同的皮肤粘膜间的位置进行每一轮的使用。在第三和第四次激发注射之后，从母鸡随后下的蛋中获得蛋黄。然后估算出蛋黄的抗体响应。
C.用于猪脂肪组织质膜的蛋黄抗体的酶免疫测定制备和筛选出用于对适合的脂肪组织质膜的抗体滴度的蛋黄抗体，并且用于通过免疫检测法测定肝、肾、红血球和骨骼肌的交叉反应度。将碳酸盐缓冲溶液中的含有0.25μg脂肪组织质膜蛋白的100μl质膜涂抹到96孔聚苯乙烯板的每一个孔上。在4℃的增湿器中将板放置一个晚上。然后倾空孔，并且用含有0.05％吐温20的PBS来回堵孔三次。将用PBST稀释的100μl蛋黄加入到每个孔中。在37℃，将板放置1小时，然后用PBST冲洗三次。将在PBST中以1∶5000稀释的100μl兔抗鸡1gGHRP共轭抗体加入每个孔中。在37℃，将板温育1小时。用PBST冲洗板三次。然后将100μl的邻苯二胺酶解物(OPD)(1.5mg/ml)加入到每个孔中。之后在37℃，将板温育5-10分钟，并且加入50μl的2MH2SO4使每个孔中的反应停止。使用酶免疫分析仪测定的吸光率为490nm。每一个试验要进行两回并且重复三次。可以发现蛋黄中抗体的滴度要高于1∶12800，该值在本发明的情况中认为是相当高的浓度值。
试验2目标动物体重中脂肪组织抗体的作用A.背景本试验中使用的目标动物是实验室老鼠。试验中使用的是平均体重为140g的96只正在发育的母鼠。将老鼠随机地等分为4组。将老鼠以三个为一个子群关在笼子里。用普通的老鼠饲料喂食。试验于2001年9月30日开始，于2001年12月14日结束。
B.方法四个组中包括两个试验组和两个分别控制组。两个试验组中包括第一试验组，该组中在每个老鼠背部的不同位置注射包含了脂肪组织抗体的原蛋黄。根据上述试验1的步骤产生抗体。特别地，抗体是通过响应从猪脂肪组织中制备的抗原产生的。根据上述试验1描述的类似过程获得蛋黄脂肪组织抗体。每个注射剂的剂量为每只老鼠每天1ml。每一轮实施包括连续四天每天一次注射。试验中一个月使用一次蛋黄。原蛋黄中抗体的浓度要高于1∶12800。
对第二试验组使用相同剂量、浓度和频率的蛋黄脂肪组织抗体，但是不是通过注射，而是通过口服。
对于这两个老鼠试验组都有相应的对比组。将普通的原蛋黄使用给老鼠控制组。
C.结果下列表格显示试验结果。
表1体重和饲料转换率中蛋黄脂肪组织抗体的影响(X±SE)
表2在老鼠体内不同部位中蛋黄脂肪组织抗体对脂肪含量的影响(X±SE)
注具有不同上角标的值具有不同意义；A、B意味着P＜0.01；a、b意味着P＜0.05表3在老鼠体内血液中蛋黄脂肪组织抗体对甘油三酸酯、胆固醇和脂肪酸层上的的影响(X±SE)
注具有不同上角标的值具有不同意义；A、B意味着P＜0.01；a、b意味着P＜0.05D.结果与讨论表1显示出与老鼠相应的对比组比较，通过注射使用抗体使得第一试验组的体重和食物消耗量分别增长5.8％和1.7％。然而，饲料转换率降低0.32％。还显示出与老鼠相应的对比组比较，通过口服使用抗体使得第一试验组的体重减少3.9％，食物消耗量增加了0.14％。饲料转换率减少约10％。关于第一试验组和对比组的试验数据说明通过注射使用抗体，尽管饲料转换率降低地非常小，但体重还是轻微增长。低饲料转换率表示需要较少量的饲料来产生一个重量单位的体重。关于第二试验组和对比组的试验数据说明通过服用使用抗体，体重轻微地增加，并且饲料转换率明显减少10％。这点是重要的且论证了通过服用使用抗体在减少整个体重上更有效一点，在降低饲料转换率上更明显。
关于表2，显示出相对于相应的对比组，由于通过注射使用抗体导致其网膜和肠系膜、子宫旁结缔组织和肾周的脂肪含量分别减少了3.7％、4.2％和6.4％。然而，腓肠肌脂肪含量增加了5.2％。还显示出对于相应的对比组，由于通过服用使用抗体使得它们的网膜和肠系膜、子宫旁结缔组织和肾周的脂肪含量分别减少了17.1％、24.2％和2.16％。
在本试验中清晰显示出，无论哪种方式用于抗体的使用，注射或服用，通常在减少动物体内不同部位的脂肪含量都是有效的。尤其显示出，在减少动物的普通脂肪含量中通过服用的方式使用更明显有效。
关于表3，显示出通过注射使用抗体促使甘油三酸酯层明显减少25.5％。使得胆固醇和游离脂肪酸层分别少量地增长3.6％和4.0％。关于通过服用使用抗体，甘油三酸酯层明显减少22.3％。使得胆固醇和游离脂肪酸分别增加12.3％或32.4％。
当将所有三组数据综合考虑时，清楚显示出在动物体内抗体的使用能够减少其体内的总脂肪含量，并且这一点由表2中显示的试验组老鼠的整体脂肪含量和表3中显示的甘油三酸酯的降低所支持。尤其是，显示出相对于直接注射，服用方式的使用使抗体更有效。
上述结果在两方面是显著的。第一，意外的是，当通过口服使用根据本发明产生的抗体是更有效的。这是重要的，因为从理论上抗体能够与农场中的标准饲料混合，并且由此其使用变得非常简单有效，甚至能够达到减少脂肪含量的计划中功能。第二，对动物没有明显的副作用。例如，整个体重没有受到任何明显的影响，然而脂肪含量减少。饲料转换率也有轻微地改善。换句话说，目标动物体内有更少的脂肪含量和更高的瘦肉含量。
表3中显示游离脂肪酸层明显增加。其能够通过如下解释甘油三酸酯是由脂肪酸和甘油组成的。当引起甘油三酸酯层(即脂肪含量)降低时，下列显示的平衡向右移动。
甘油三酸酯脂肪酸+甘油→由于这个原因，引起游离脂肪酸层增加。
试验3脂肪组织抗体对老鼠体重的影响A.背景和方法本试验中使用的目标动物是实验室老鼠。试验中使用的是平均体重为110g的150只正在发育的母鼠。将老鼠随机地分为5组(即组I到V)关入笼子中，每个笼子中3只老鼠。组I是对比组，组II到V是试验组。用普通的老鼠饲料喂食。普通饲料的组合物如下所示。
表4普通饲料组合物
试验中，组I的老鼠用普通食品喂养。组II到V用加入了根据上述试验1描述的方法制备的不同数量的脂肪组织抗体的普通食品喂养。根据上述试验1的制备方法产生抗体。尤其是，根据从猪脂肪组织中制备的抗原注射剂中产生抗体。
试验开始于2002年11月28日，结束于2003年2月18日。
B.结果表5抗体对脂肪组织的影响(X±SE)
C.讨论和结论上述结果说明相对于对比组老鼠，喂养加入了75ppm抗体的食物的老鼠的子宫旁结缔组织脂肪减少了16.89％、肠系膜脂肪减少了7.76％、肾周脂肪减少了11.88％和腹部减少了12.60g。相对于对比组老鼠，喂养加入了75ppm抗体的食物的老鼠的腓肠肌肌肉重量没有明显不同。
上述结果说明相对于对比组老鼠，喂养加入了6000ppm抗体的食物的老鼠的子宫旁结缔组织脂肪减少了14.90％、肠系膜脂肪减少了10.56％、肾周脂肪减少了20.21％和腹部减少了13.05g。相对于对比组老鼠，喂养加入了6000ppm抗体的食物的老鼠的腓肠肌肌肉重量增加了1.08％。不过，这个增加是明显的。
试验数据显示不同老鼠组的食物食用量在统计上大致相同。
试验数据显示根据本发明制备和使用的抗体对调节，尤其是减少目标动物的脂肪组织是有效的。
根据上述试验的结果，当将抗体使用于畜牧场(例如，通过动物饲料)时，其能够生产出具有更多瘦肉的动物。在大多数供给人类消耗品的作为产肉的饲养动物中，猪倾向于具有相当多的脂肪含量。因此，本发明尤其适合应用于养猪。
当应用于在人类的使用中时，抗体能应用于治疗或预防肥胖症和/或相关情况的药物或组合物的制备。换句话说，抗体能够加入到适合人类消耗品的食品增补剂中。也可以生产包括这个抗体的药物。
在这里，上述提及的每一个参考文献的内容和英国专利No.0212876.7合并为其整个参考文献。值得注意的是数量的变化、修正和进一步的实施方案是有可能和有根据的，所有这些变化，修改和实施方案都能被认为是在本发明的范围之内，而且能被本领域技术人员所理解。
权利要求
1.一种生产抗体的非治疗方法，该抗体束缚需要所述抗体的目标动物内的脂肪组织，以调节所述目标动物内脂肪组织的含量，该方法包括以下步骤(1)从源动物脂肪组织制备抗原；(2)对产蛋动物使用抗原，促使所述抗体的产生；和(3)从所述产蛋动物的蛋中获得所述抗体，其中所述源动物和所述产蛋动物属于不同物种。
2.根据权利要求1的方法，包括促使来自所述产蛋动物体内的所述抗体产生的步骤。
3.根据权利要求1或2的方法，包括促使所述抗体在所述产蛋动物的所述蛋中沉积的步骤。
4.根据上述任何权利要求的方法，其中所述可获得的步骤包括从所述蛋的蛋黄中分离所述抗体的步骤。
5.根据上述任何权利要求的方法，其中所述抗原包括所述源动物的所述脂肪组织的质膜、其脂肪细胞质膜表层蛋白、或其片段。
6.根据上述任何权利要求的方法，其中所述抗体是多克隆抗体。
7.根据上述任何权利要求的方法，其中所述源动物和所述产蛋动物属于明显不同的物种。
8.根据上述任何权利要求的方法，其中所述目标动物和所述产蛋动物属于不同物种。
9.根据权利要求8的方法，其中所述目标动物和产蛋动物属于明显不同的物种。
10.根据上述任何权利要求的方法，其中所述目标动物和源动物属于相同物种。
11.根据上述权利要求1到9中任何一个权利要求的方法，其中所述目标动物和所述源动物属于接近物种。
12.根据上述任何权利要求的方法，其中所述目标动物是饲养动物。
13.根据上述任何权利要求的方法，其中所述源动物和/或目标动物是猪。
14.根据上述权利要求1到11中任何一个权利要求的方法，其中所述目标动物是患者。
15.根据上述任何权利要求的方法，其中所述产蛋动物是禽类动物，所述源动物是非禽类动物。
16.根据上述任何权利要求的方法，其中所述源动物是哺乳动物。
17.根据上述任何权利要求的方法，其中一个或多个所述动物在所述方法实施后死亡。
18.根据权利要求1到17中任何一个权利要求所限定的方法获得的抗体。
19.根据权利要求18的所述抗体，其用于治疗或诊断的方法。
20.根据权利要求18所限定抗体的使用，其应用于制备由过度的脂肪细胞引起的状况的治疗的药物。
21.一种含有有效量的根据权利要求18所限定的抗体的饲料添加剂。
22.根据权利要求21的饲料添加剂，其适合降低所述目标动物内所述脂肪组织的含量。
23.根据权利要求21或22的饲料添加剂，其中所述组合物包括含有所述抗体的所述蛋的蛋黄。
24.一种含有药学有效量的根据权利要求18所限定的抗体的药物。
25.根据权利要求24的药物，其适合通过食用应用。
26.根据权利要求24的药物，其适合通过注射应用。
27.一种调节需要抗体的目标动物体内脂肪组织含量的方法，包括以下步骤(1)从源动物的脂肪组织制备抗原；(2)对产蛋动物使用所述抗原；(3)使得所述产蛋动物响应所述抗原产生所述抗体；(4)从所述产蛋动物的蛋中获得所述抗体；(5)对所述目标动物使用所述药学有效量的所述抗体，其中所述源动物和所述产蛋动物属于不同物种。
28.根据权利要求27的方法，其中所述可获得的步骤包括从所述蛋的蛋黄中分离所述抗体的步骤。
29.根据权利要求27或28的方法，包括通过食用使用所述抗体的步骤。
30.根据权利要求27或28的方法，包括通过注射使用所述抗体的步骤。
31.根据权利要求27到30中的任何一个权利要求的方法，包括所述抗体束缚所述目标动物的所述脂肪组织质膜的特征成分的步骤。
32.根据权利要求31的方法，包括所述抗体束缚所述目标动物的所述脂肪组织的粒状粘质蛋白的步骤。
33.根据权利要求31的方法，包括所述抗体束缚所述目标动物的所述脂肪组织的纤维粘质蛋白的步骤。
34.根据权利要求27到33中的任何一个权利要求的方法，其中所述抗原包括所述源动物脂肪组织的质膜、其脂肪细胞质膜表层蛋白、或其片段。
35.根据权利要求27到34中的任何一个权利要求的方法，其中所述抗体是多克隆抗体。
36.根据权利要求27到35中的任何一个权利要求的方法，其中所述源动物和所述产蛋动物属于明显不同的物种。
37.根据权利要求27到36中的任何一个权利要求的方法，其中所述目标动物和所述产蛋动物属于不同物种。
38.根据权利要求37的方法，其中所述目标动物和所述产蛋动物属于明显不同的物种。
39.根据权利要求27到38中的任何一个权利要求的方法，其中所述目标动物和所述源动物属于相同物种。
40.根据权利要求27到38中的任何一个权利要求的方法，其中所述目标动物和所述源动物属于接近物种。
41.根据权利要求27到40中的任何一个权利要求的方法，其中所述方法是非治疗性方法。
42.根据权利要求27到41中的任何一个权利要求的方法，其中所述目标动物是饲养动物。
43.根据权利要求27到42中的任何一个权利要求的方法，其中所述源动物和/或所述目标动物是猪。
44.根据权利要求27到41中的任何一个权利要求的方法，其中所述目标动物是患者。
45.根据权利要求27到44中的任何一个权利要求的方法，其中所述产蛋动物是禽类动物，所述源动物是非禽类动物。
46.根据权利要求27到45中的任何一个权利要求的方法，其中所述源动物是哺乳动物。
47.根据权利要求27到46中的任何一个权利要求的方法，其中一个或多个所述动物在所述方法实施后死亡。
48.一种生产抗体的方法，该抗体束缚需要所述抗体的目标动物内脂肪组织，以调节所述目标动物内脂肪组织的含量，包括以下步骤(4)从源动物的脂肪组织制备抗原；(5)对产蛋动物使用所述抗原，促使所述抗体的产生；和(6)从所述产蛋动物的蛋中获得所述抗体，其中所述源动物和所述产蛋动物属于不同物种。
全文摘要
一种生产抗体的非治疗方法，该抗体束缚需要抗体的目标动物内脂肪组织，以调节目标动物内脂肪组织的含量，该方法包括以下步骤(a)用源动物脂肪组织制备抗原；(b)对产蛋动物使用抗原，促使抗体的产生；和(c)从产蛋动物的蛋中获得抗体，其中源动物和产蛋动物属于不同物种。
文档编号A23K1/18GK1659186SQ03813074
公开日2005年8月24日 申请日期2003年6月5日 优先权日2002年6月5日
发明者F·池, 陆天水 申请人:华扩达动物科技(I.P.4)有限公司