专利名称：：一种泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的制备方法一种泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的制备方法
技术领域：
一种泥鰍富硒活性肽营养液或营养粉的制备方法，具体涉及利用酶法水解以及利用纳滤膜浓縮脱盐的方法，用泥鳅蛋白制备泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉，属于生物工程和膜
技术领域：
。技术背景泥鰍被誉为"水中人参"，味道鲜美，营养价值极高，蛋白质、糖类、矿物质(钙，磷，铁)和维生素(Vs，VA，Vc)均比一般鱼虾高。蛋白质含量达到18克/100克泥鳅，有机硒含量达到35微克/100克泥鳅。自古以来，泥鳅就被人们认为具有较高的药用价值。据《医学入门》査考，泥鳅性甘、平，具"补中、止泄"之功能。《本草纲目》中记载泥鳅有暖中益气之功效，对治疗肝炎、小儿盗汗、痔疮、皮肤瘙痒、跌打损伤、手指疔、阳痿、乳痈等症都有一定疗效。经现代医学临床验证，采取泥鳅食疗，既能强身增加体内营养，又可补中益气、护肝除黄、壮阳利尿、清热解毒、消痞散结等药用功效。综合考虑泥鳅在食品领域和医药领域的利用价值，利用其营养丰富和药用价值高的特点，可将泥鳅开发成各种保健食品。泥鰍富硒活性肽营养液、营养粉是泥鳅蛋白水解的中间产物，泥鳅富硒活性肽营养液与泥鳅的氨基酸组成相同，但其分子量比泥鳅蛋白要小得多。因此，泥鳅富硒活性肽营养液具有良好的水溶性，优良的吸湿保湿功能，较好的酸、热稳定性。水解蛋白富含具有多种生理活性的多肽和氨基酸，这些肽可以充分被人体吸收，补充人体所需的营养，调节机体功能，促进身体健康。随着生物技术和其它高新技术的发展，国内外对泥鳅的食用研究也越来越重视。泥鳅肉中蛋白含量占其干重的80%，氨基酸组成完善，具有很高的营养价值。据报道，泥鳅提取物具有保肝护肝、防治肝炎、增强基体免疫力等功效。因此，富含泥鳅富硒活性肽营养液的食品具有很好的营养保健价值，可以作为一种功能性食品，其研究开发也因此受到重视。因为泥鰍的营养价值丰富，国内外对以泥鳅为原料的保健品和药品的开发刚刚开始，仅有少量粗加工的专利和研究报道，尚未能对泥鳅进行深度加工和综合利用。膜分离技术是用天然或人工合成的高分子膜，以外界能量或化学位差为推动力，对双组分或多组分的溶质和溶剂进行分离、分级、提纯和富集的方法。此技术具有分离效率高、分离条件温和、流程简单及能耗较低，而它具有效率、设备价格、运行费用等都相差不大等优点，因此在蛋白质的浓縮、酶的分离与精制、发酵产品的分离与精制等方面应用广泛。
发明内容本发明目的是提供一种采用酶法水解一纳滤浓縮脱盐工艺制备泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的方法。本发明的技术方案一种泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的制备方法，利用酶法水解泥鳅蛋白，再用纳滤技术浓縮并脱盐，步骤为1)以泥鳅为原料，捣碎制备匀浆；2)泥鳅匀浆以1:1比例加水，采用蛋白酶在pH310，30-6(TC下进行酶解反应，蛋白酶用量为泥鳅匀浆和水总重量的1%-3%，酶解2-10h，采用pH-STAT或TNBS法控制水解度DH为12%~20%;3)反应结束后灭酶，离心过滤，得滤液即酶解液；4)酶解液用纳滤膜进行纳滤脱盐及初步浓縮，得到泥鳅富硒活性肽营养液；或酶解液用纳滤膜进行纳滤脱盐浓縮，然后喷雾干燥，即制得泥鳅富硒活性肽营养粉。酶解液的纳滤脱盐浓縮，纳滤的截留分子量为150—300Dalton。纳滤后浓缩液进行喷雾干燥，干燥条件为进风温度150°C-220°C，出风温度60°C-100°C。制备的泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉用于直接制成胶囊、冲剂、口服液或口服含片；或作为功能性食品配料用于保健食品或普通食品的配方中。纳滤(NF)膜是介于反渗透(RO)膜和超滤(UF)膜之间的一种膜，其膜表面孔径处于纳米级范围(10—9米)。纳滤膜由于截留分子量介于超滤和反渗透之间，同时还存在道南(Donnan)离子效应的影响，因此对低分子量有机物和盐的分离有很好的效果，且具有不影响分离物质的生物活性、节能、无公害等特点。粗蛋白的测定微量凯氏定氮法。糖原的测定苯酚-硫酸法。本发明的有益效果首先采用酶法水解泥鳅蛋白，虽然传统的酸法和自溶法水解简单、便宜，但其缺点是水解度不易控制，且氨基酸破坏大。酶法水解条件温和，水解度易控制，对氨基酸破坏小，而且具有专一性。因此，采用酶法水解泥鳅蛋白，不仅可以大大提高泥鳅肽的产量，而且产品的相对分子质量可以得到控制，大大提高产品的功能性。然后利用纳滤膜分离技术进行浓縮及脱盐，具有处理量大、分离条件温和、流程简单及能耗较低等优点，是一种高效的浓缩方法，可实现工业化生产。图1纳滤膜脱盐浓縮压力与渗透通量的关系。图2纳滤膜脱盐浓縮温度与渗透通量的关系(AP:0.9MPa)。图3纳滤膜脱盐浓縮时间与渗透通量的关系(AP=0.9MPa)。具体实施方式实施例1水解度(DH)=18%的泥鰍富硒活性肽营养液和营养粉的制备泥鳅肉捣碎得匀浆，以1:1比例加水，采用酸性蛋白酶在pH3.0^4.0、40°C下进行酶解反应，酶用量为泥鳅匀桨和水总重量的1%-3%，酶解2-10h，采用TNBS法控制水解度在18%，反应结束后加热灭酶，离心过滤后，滤液用美国陶氏化学公司提供的截留分子量150Dalton的聚酰胺纳滤膜进行脱盐浓縮，在脱盐过程中不断加水稀释料液，并保持浓縮液的体积不变。脱盐后，料液经进一步浓縮即得泥鳅富硒活性肽营养液，或继续进行喷雾干燥即制得泥鳅富硒活性肽营养粉。DH^18。/。的泥鳅富硒活性肽营养液溶液纳滤浓縮实验图1显示，随着操作压力的增大，膜两侧的压力差增加，膜的渗透通量增大，从图中看出，清水通量和酶解液通量随压力近似成线性增大，但由于浓差极化、膜面污染及膜孔堵塞等原因，水解液的渗透通量增加幅度小于清水通量的增加幅度。图2显示，随温度升高，膜的渗透通量增大。温度高，料液粘度小，流动状态好，扩散及传质系数高，各种分子的活化能提高，减小浓差极化的影响，从而膜的渗透通量提高。图3显示，随时间的延长，通量呈现下降趋势。初期，料液中的大分子在膜的表面迅速沉积，产生浓差极化、凝胶层、膜孔堵塞及膜吸附等现象，使透过液阻力剧增，通量骤减；然后，膜表面的沉积层逐渐增加，浓差极化及阻力加强，通量的下降趋势趋于缓和；后期，当边界层的浓度和厚度达到一定的动态后，膜通量较为稳定。产品为淡黄色粉末，复水性良好。表1纳滤膜分离前后泥鳅富硒活性肽营养液产品的成分比较<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>实施例2水解度(DH)=20%的泥鳅富硒活性肽营养液和营养粉的制备泥鳅肉捣碎得匀浆，以l:l比例加水，采用碱性蛋白酶Alcalase，于60。C、pH8.5下进行酶解反应，酶用量为泥鳅匀浆和水总重量的1%-3%，酶解2-10h，采用pH-STAT法控制水解度在20y。，反应结束后加热灭酶，离心过滤后，滤液用截留分子量为300Dalton的纳滤膜进行脱盐浓縮，在脱盐过程中不断加水稀释料液，并保持浓縮液的体积不变。脱盐后，料液经进一步浓縮即得泥鳅富硒活性肽营养液，继续进行喷雾千燥即制得泥鳅富硒活性肽营养粉末。权利要求1、一种泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的制备方法，其特征在于利用酶法水解泥鳅蛋白，再用纳滤技术浓缩并脱盐，步骤为1)以泥鳅为原料，捣碎制备匀浆；2)泥鳅匀浆以1∶1比例加水，采用蛋白酶在pH3～10，30-60℃下进行酶解反应，蛋白酶用量为泥鳅匀浆和水总重量的1％-3％，酶解2-10h，采用pH-STAT或TNBS法控制水解度DH为12％～20％；3)反应结束后灭酶，离心过滤，得滤液即酶解液；4)酶解液用纳滤膜进行纳滤脱盐及初步浓缩，得到泥鳅富硒活性肽营养液；或酶解液用纳滤膜进行纳滤脱盐浓缩，然后喷雾干燥，即制得泥鳅富硒活性肽营养粉。2、根据权利要求1所述的一种泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的制备方法，其特征在于酶解液的纳滤脱盐浓縮，纳滤的截留分子量为150—300Dalton。3、根据权利要求1所述的一种泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的制备方法，其特征在于纳滤后浓縮液进行喷雾干燥，干燥条件为进风温度150°C-220°C，出风温度60°C-100°C。4、权利要求1所述方法制备的泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的应用，其特征是泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉用于直接制成胶囊、冲剂、口服液或口服含片；或作为功能性食品配料用于保健食品或普通食品的配方中。全文摘要一种泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的制备方法，属于生物工程和膜
技术领域：
。本发明采用酶法水解—纳滤浓缩脱盐工艺制备泥鳅富硒活性肽营养液或营养粉的方法，本发明以泥鳅为原料，以1∶1比例加水，采用蛋白酶在pH3～10，30℃～60℃下进行酶解反应，蛋白酶用量为泥鳅匀浆和水总重量的1％-3％，酶解2-10h，米用pH-STAT或TNBS法控制水解度在12％～20％，反应结束后加热灭酶，离心过滤，得滤液即酶解液，酶解液用纳滤膜进行纳滤浓缩脱盐，得到泥鳅富硒活性肽营养液，再经喷雾干燥，即制得泥鳅富硒活性肽营养粉。本发明优点是处理量大、分离条件温和、流程简单及能耗较低，可实现规模化生产。文档编号A23P1/02GK101233937SQ20081002062公开日2008年8月6日申请日期2008年2月4日优先权日2008年2月4日发明者卢蓉蓉,张文斌,杨瑞金申请人:江南大学