专利名称：：一种水稻种子人工老化的方法
技术领域：
：本发明涉及一种水稻种子人工老化的方法，属于种子检测
技术领域：
。用此方法，将能縮短检测水稻种子耐贮藏和抗劣变性能的时间。(二)
背景技术：
：种子生理成熟后出现不可逆转的质量下降变化总称为"劣变"(seeddeterioration)或老化(aging)。种子老化具有不可逆，不可避免和群体间不同等特点，但可通过控制贮藏和加工处理等条件延缓种子劣变度，提高其潜在表现。种子劣变可降低种子质量，如活力、生活力、贮藏能力和田间建植率等，从而造成难以估算的经济损失。据估计，仅美国每年在种子销售方面，因质量问题造成的损失可达5亿美元.若考虑世界范围质量对产量等方面的影响，损失将更大。种子是活的有机体，它与其他生物一样有生长、发育和衰老过程。种子活力与种子的老化劣变存在密切关系，即种子活力水平高则种子劣变程度就低。因此，种子活力与种子劣变之间的关系是现代活力和活力测定的主要生物学基础。种子达到生理成熟即具有最高的生活力和活力，由于种子本身的遗传特性和环境条件不同，种子活力的降低和劣变程度的增加会发生明显差异。种子劣变程度较低时，即在失去发芽力之前，表现发芽速率和生长速率及整齐度、健壮度均逐渐下降，且出苗时对环境条件的敏感性增加，即抵抗逆境能力下降。当劣变程度较低时，对种子生活力和发芽影响不大，而对活力则有影响，因此可用活力测定的方法了解变质的程度。种子劣变的结果表现在生产性能降低，最终和最大的危害是种子失去发芽能力。从种子检验角度来看是失去长成正常幼苗的能力。种子老化、劣变导致种子活力、生活力下降以致生命力丧失，食用品质下降。种子贮藏过程中劣变、老化是一个自然、较长时间缓慢发生的过程，机理复杂；不合适的种子贮藏条件会加速老化、劣变过程。农作物种子耐贮藏，抗劣变、老化是一个重要的农艺性状，是农作物品种评价的重要指标。科学、快速检测农作物耐老化能力的技术，有重要应用价值和实际生产意义。人工加速老化法是一种检测种子质量的方法，加速老化测定可以预测种子的耐贮藏力和生长表现。人工加速老化测定方法是测定种子活力的一种常用方法，可靠度好，应用局限性小。此方法通过在人为控制下将种子短期内放在高温高湿的环境中，让种子从潮湿的环境中吸水，提高其含水量，便随高温导致种子迅速老化。通过比较其发芽率来确定种子活力的高低。这种加速老化的方法极大的有助于关于种子劣变机制的研究。我国是个农业大国，水稻种质资源占据了农业生产的重要地位，种子的质量优劣是提高粮食产量的重要因素。水稻又是一种较耐高温的作物，一般的人工老化技术不适合用于水稻。所以研究水稻种子劣变机理，建立水稻种子老化技术体系和方法，为培育耐储存、抗老化和劣变的优质种子的新水稻品种(或种质资源)做技术支持。(三)
发明内容技术问题本发明的目的在于提供加速水稻种子老化的一种方法，有助于研究种子耐老化的机制，为培育耐储存、优质种子的新水稻种质资源做技术支持。技术方案水稻种子人工老化的方法，包括将水稻种子置于45-47.5t:，湿度为100%的人工气候箱中进行人工老化处理，处理时间为8-10天。人工老化处理的最适温度为46.5t:，最佳处理时间为10天。有益效果本发明通过研究比较确定了水稻种子加速老化测定的最优化条件，在技术应用程序上，大大縮短人们对水稻种子老化方面的研究周期，可以在io天，甚至八天内完成模拟水稻种子在自然情况下需要几年来完成的老化过程，为耐老化水稻新品种的研发以及水稻种子耐老化的检测方面提供了实用性的方法。本发明也可以检测种子的耐贮藏力与活力。另外，本发明技术方法简便，易于操作和程序规范化，适合相关企业、质检机构进行水稻种子质量的检测。(四)图1:人工老化处理对水稻种子萌发和幼苗生长的影响A:萌发三天后的水稻种子B:生长五天后的幼苗C:生长十天后的幼苗图2:老化处理对幼苗根与茎生长的抑制图3:老化处理后种子丙二醛含量的变化图4:老化处理后幼苗干重与鲜重的变化(五)具体实施例方式1.水稻种子人工老化处理选取大小一致、种皮完好的干日本晴种子，将种子放入白色纱窗袋中，置于预先设置好条件的人工气候箱中处理。注意维持人工气候箱内环境的一致性，加湿器内水源不要中断。分别置于45"、46"，46.5°C，47.5"湿度为100%的人工气候箱中进行老化处理，每个处理使用100粒种子，四次重复。处理时间为一天、两天、三天、四天、五天、八天、十天、十五天。观察处理一至十五天后的种子发芽率和发芽势以及幼苗生长情况。将每个处理发芽的种子移植入水培箱中培养，观察幼苗生长状况。每天分别将刚刚萌发的水稻种子移入水培箱中培养，营养液采用国际水稻所的营养液配方。分别于第三、五和十天观察水稻幼苗生长状况。(1)发芽率与发芽势的测定方法采用国家标准GB/T5520-85。将老化处理后的种子分别放入盛有三层滤纸的培养皿中，设四次重复，在30°C8小时光照16小时黑暗条件下培养，第五天计算种子发芽势，第十天计算种子发芽率。(2)丙二醛含量的测定采用《植物生理生化实验技术原理》中的方法。取0.1克粉碎后的种子，加入lml5X三氯乙酸，研磨后所得的匀浆在5000r/min下离心10min。将上清液转入一个新的离心管，加入0.5ml0.67%的硫代巴比妥酸，混合后在IO(TC水浴上煮沸30min，冷却后再离心一次。分别测定上清液在450nm、532nm和600nm处的吸光度值，丙二醛含量的计算公式为丙二醛含量&mol/gFW)=[6.45(A532_A6。。)_0.56A45。]X提取液体积(ml)种子重量(g)A450、A532、A600分别表示450nm、532nm和600nm波长处的吸光度值。2.结果(1)水稻种子人工老化后发芽率与发芽势的变化发芽率与发芽势的测定方法采用国家标准GB/T5520-85。将老化处理后的种子分别放入盛有三层滤纸的培养皿中，设四次重复，在30°C8小时光照16小时黑暗条件下培养，第五天计算种子发芽势，第十天计算种子发芽率。经不同老化温度处理后发现，45t:处理不会引起种子发芽与生长变化，47.5t:处理后种子几乎丧失发芽能力，这两种处理是处理的两个极端，我们着重考虑46t:和46.5°C的老化处理。表l老化处理后水稻种子发芽率<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>表2老化处理后水稻种子发芽势<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>从实验结果来看，46t:和46.5。C都会引起水稻种子的老化，但是46.5。C处理效果更快，更明显，为我们最终确定的老化温度。(2)种子经人工老化后丙二醛含量的变化人工老化后，将种子脱皮后经粉碎机粉碎，测定单位质量种子的丙二醛含量。结果显示丙二醛含量发生了明显的变化，即处理四小时后丙二醛含量达到峰值，随后含量慢慢回落到比对照稍高的水平，如图3。丙二醛是膜脂过氧化作用的产物之一，经常发生在植物器官老化或逆境条件下。通常利用它作为膜脂过氧化指标，表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件反应的强弱。我们的实验结果说明此人工老化处理能够使种子进入了一种老化的状态之中。(3)种子经人工老化后的水稻幼苗的生长状况我们采用46.5t:，相对湿度为100%进行人工老化处理水稻种子，老化后的种子经发芽床发芽后移入水培箱中培养，分析生长十天后老化处理对水稻幼苗生长的抑制情况结果见图2和图4。试验数据采用SPSS13.0软件进行分析，显著差异为P〈0.05。结果表明，经过温度为46.5t:，相对湿度为100%的人工老化后，水稻种子出现了明显的老化现象，即种子的萌发速度开始下降，生长率和出苗整齐度减少，畸形苗增多，最终导致种子失去发芽的能力。以上试验结果说明，本发明技术可以在IO天，甚至八天内完成模拟水稻种子在自然情况下需要几年来完成的老化过程，为耐老化水稻新品种的研发以及水稻种子耐老化的检测方面提供了实用性的方法。本发明也可以检测种子的耐贮藏力与活力，方法简便，易于操作和程序规范化，适合相关企业、质检机构进行水稻种子质量的检测。权利要求一种水稻种子人工老化的方法，包括将水稻种子置于45-47.5℃，湿度为100％的人工气候箱中进行人工老化处理，处理时间为8-10天。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，人工老化处理的温度为46.5°C。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，处理时间为10天。全文摘要本发明是一种水稻种子人工老化的方法，属于种子检测
技术领域：
。包括，在相对湿度为100％的条件下，以不同温度处理水稻种子，以加速老化，处理后观察人工老化对种子发芽率以及幼苗生长的影响。通过试验得出结论，水稻种子最佳的人工老化条件为温度46.5℃相对湿度为100％。经老化后种子的萌发速度开始下降，生长率和出苗整齐度减少，畸形苗增多，最终导致种子失去发芽的能力。利用本发明提供的人工老化方法，能够在短时间内，检测水稻种子耐贮藏、抗劣变能力。此法科学、可靠，操作简单，不需要复杂的设备，便于推广和应用。文档编号A01C1/02GK101720583SQ201010018300公开日2010年6月9日申请日期2010年1月22日优先权日2010年1月22日发明者井文,李莉,王法微,王蓉,章文华申请人:南京农业大学