专利名称：抑菌型复合生物有机液态肥及其制备方法
技术领域：
本发明属有机肥料技术领域，具体涉及一种抑菌型复合生物有机液态肥及其制备
方法。
背景技术：
目前，长期使用化肥，对农业产生负面影响，造成土壤酸化、硬化，作物生长不良， 根部衰微，抗病力减弱，病原菌兹生，农药的滥用，更造成对土壤益生菌的伤害，形成不可收 拾的恶循环。利用益生菌群的优势及微生物分泌物的效果，可有效排挤并抑制病原菌。培 养各种益生菌，量产后再与天然资材制配后，可制成复方抑制病害的产品。本发明中使用有 机营养成分培养益生菌1.放线菌以分泌各种天然抗生素来抑制病害菌，其所分泌抑菌素 (P0LY0XIN)可使病原菌细胞壁几丁质合成作用受阻而死亡.2.萤光假单胞菌以分泌假单 胞抑菌素(Pseudobactin)对多种病原菌具有明显抑制作用，假单胞菌同时并具促进植物 磷肥的吸收能力及分解秸秆纤维及木质素之能力.3.乳酸菌及醋酸菌以分泌大量乳酸及 醋酸等有机酸以分解土壤中不溶性盐类，达到解除土壤酸化及板结的效果，进而使植物根 部伸展茁壮，抗病力增强，病害自然衰微.4.木霉菌有较强的纤维分解能力，能化秸秆等有 机废弃物为有利作物之肥分及土壤物理条件，又对多种真菌有拮抗作用，能发挥农药效果， 为良好的生物病害防治剂.5.强势益生菌群，包括枯草杆菌、米根菌、红曲菌、酵母菌等，以 分泌强烈生物酶来排剂害菌，并分解有机质为植物可吸收的单元体，提供有机营养成分，以 强化植株.6.利用天然甲壳素以达抑菌效果并促进作物的生长及抗病力.因此，研发既有 施肥作用又有抑制病害菌的新颖生物有机肥是促进农业可持续发展的重要课题。
发明内容
本发明的目的在于提出一种具有抑制害菌作用的新颖复合生物有机液态肥及其 制备方法。 本发明提出的抑菌型复合生物有机液态肥，其组分配比按重量计如下A.枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)15--20%B.荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)10--15%C.抗生链霉菌(Str印tomyces antibioticus)15--20%D.哈茨木霉菌(Trichoderma harzia皿m)10--20%E.甲壳素(Chitosan)30--50%总量满足100%。上述复合生物有机液态肥的制备方法如下 a.制作菌种源在实验室中，将上述A、B、C、D四项菌种纯化、复壮培养，分别投入 一公升培养基中培养熟化，再投入五十公升种子罐作成量产用菌种源；
b.单种量产以吨级反应罐根据各菌种最适配的处方制作大量无菌培养基，以50 倍放大上限，渐次放大到所需容量，每次放大需维持适当充氧、搅拌及温控条件，每次培养时间为5-10天。 单种量产所用培养基 1.枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)及荧光假单胞菌 (Pseudomonasf luorescens):综合氨基酸0. 2 0. 4 % ，磷酸二氢钾0. 8 1. 2 % ，尿素 0. 8 1. 2 % ，氯化钠0. 3 0. 5 % ，硫酸镁0. 01 0. 03 % ，硫酸亚铁0. 01 0. 02 % ，碳酸牵丐 0. 15 0. 25%，糖蜜(糖厂废液Molases)O. 08 0. 12%，酸碱度为6. 5-7. 0。
2.抗生链霉菌(Str印tomyces antibioticus):可溶性淀粉0. 8 1. 2% ，综合氨基 酸0. 2 0. 4 % ，磷酸二氢钾0. 08 0. 12 % ，硝酸钾0. 08 0. 12 % ，氯化钠0. 04 0. 06 % ，硫酸 镁0. 04 0. 06%，硫酸亚铁0. OO广O. 002%，糖蜜(糖厂废液Molases) 1. 2 1. 8%，酸碱度为 7. 0-7. 5。 3.哈茨木霉菌(Trichoderma harzian咖):磷酸氢二钾0. 08 0. 12 %，硝酸钾 0. 1 0. 3 %，氯化钾0. 04 0. 06 %，氯化钠0. 04 0. 06 %，硫酸镁0. 04 0. 06 %，硫酸亚铁 0. OO广O. 002% ，糖蜜(糖厂废液Molases) 4 6% ，麦麸3 5% ，酸碱度为6. 5-7. 0。
c.混合秸抗培养按菌种A D前述的重量配比，将经过单种量产培养的菌种同时 倒入混合容器里进行混合培养，并添加培养物重量的15% 25%的已经高温杀菌后的培养 基，该培养基主要成分为糖蜜(砂糖厂废弃物Molases)8 12X，鸡蛋0.8 1.2X，牛肉膏 0. 01 0. 02%，鲜奶0. 8 1. 2%，粉碎杂鱼2 4%、尿素0. 8 1. 2%、磷酸二氢钾0. 8 1. 2%。酸 碱度缓冲调整为P朋.5 7. O，操作控制温度25°C 30°C ，维持搅拌、充氧，确认二次熟化完成 后，再将E组分加入，继续维持打气搅拌条件，60 72小时后，即可倒入储存槽存放与包装成 商品。
菌种源 本产品所用菌种源出于广东省微生物研究所菌种保藏中心。经科凯生物工程公司 微生物研究中心培养，与土壤中筛选的菌种比对鉴定后采用。菌种来源资料如下列
A.枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis) GIM1. 185 ACCC10627 B.荧光假单胞菌 (Pseudomonas f luorescens) GM1. 209 AS1. 823
C.抗生链霉菌 (Str印tomyces antibioticus) GIM4.46 ATCC11891D.哈茨木霉菌 (Trichoderma harzia皿m) GIM3.442 ACCC30371 本产品的优点、特点
1.亍尤点 a.本产品筛选强烈抑菌能力之微生物群，经分开培养量产并熟化后，定比参混进 入二次拮抗培养以激发抑菌物质的分泌，采用半合成培养基及钙离子以增进孢子生长，因 此产品中同时含有活菌『菌种』、孢子及其所分泌的『抑菌物质』。可起到立即效果，同时活 菌又可继续繁殖，并不断分泌抑菌素，长久而稳定地提供抗菌物质以抗衡病害菌，达到免农 药，无农残的目标。提供兼具速效及长效之抑菌产品。 b.本产品由四种不同菌种分泌不同抑菌物质，综合成广谱效果之抑菌产品。同时 具备杀菌(Bacteriocidal action)、溶菌(Bacteriolytic action)与抑制增殖的静菌作用 (bacteriostatic action)，效果显着。
2.特点 a.本产品中所含枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)及荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)对有机物质，对粗纤维及木质素具有强烈分解能力，能帮助分
解作物秸秆，舒松土壤，增加有机质。本产品在抑制病原菌的同时，并具有改善土质与生态
平衡之特点，使产品中的有益菌得到良好的生存繁衍温床。 b.本产品含甲壳素，为天然无毐抑菌剂，与菌剂相辅相乘，效果更佳。 本产品的使用方法 A.冲施事先取用本产品10毫升，加水4 5升，制成400 500倍之稀释液，冲施地 面，深入土壤。 B.浸种将种子浸泡于本产品的400 500倍稀释液中，并间续搅拌5分钟后，随时 使用。 C.苗床前期作业发芽期间使用本产品500 600倍稀释液浇湿，每天代水浇灌。 D.预防病害使用本产品400 500倍稀释液浇灌。十天一次。 E.治疗病害使用本产品250 300倍稀释液浇灌根茎叶，每3-5天一次，直到病症消失。 本发明是一种有机绿色产品，产品采用同时具有强烈抑菌能力及土壤改良能力的 微生物经量化后，又经第二次培养令其相互拮抗以激发有效抑菌素的大量分泌，产品中又 添加天然有效抑菌物质_甲壳素，抑菌效果相辅相乘，十分明显。 2005年，江苏省的水稻条纹叶枯病发病率比较高，南京市郊区某农科站将本发明 液态肥试用于条纹叶枯病的防治。于7月25日，将本液态肥60克兑水15kg，均匀喷洒，7 月30日，将本液态肥25克、尿素30克及其它相关配料，兑水15kg，均匀喷洒。8月20日， 观察田间防治效果。与未喷洒本液态肥的对比田块相比，条纹叶枯病的病情明显好转，整体 叶色转为嫩绿。后续长势明显优于对比田块。
具体实施例方式实施例1A组分…"'.20%B组分…"'.10%，C组分…"'.15%，D组分…"'.10%，E组分…"'.35%，总量满足100%。
生产控制要求
将菌种A D按用量配比同时倒入混合容器里混合培养，并添加20%之已经高温杀菌后之培养基，主要成分为糖蜜(砂糖厂废弃物Molases) 10 % ，鸡蛋1 % ，牛肉膏0. 01 % ， 鲜奶1 % ，粉碎杂鱼3% 、尿素1 % 、磷酸二氢钾1 % 。酸碱度缓冲调整为p朋.8.操作控制温 度25°C -30°C ，维持搅拌、充氧，确认二次熟化完成后，再将E组分加入，继续维持打气搅拌 条件，72小时后，即可倒入储存槽存放与包装成商品。 依照实施例1所生产的抑菌复合生物有机液态肥经大田试验，对土豆、草莓、生姜 及棉花等作物因感染立枯丝核菌(Rzoctonia solani)引起的病害作防治的试验.播种前 整理施放基肥的同时，每亩使用本产品二公升稀释200倍，平均喷施土壤表皮，翻耕入土20cm.播种后每二星期每亩使用本产品一公升稀释250倍，喷施作物根部土壤及茎叶，重复 操作共五次.结果明显抑制立枯丝核菌，同时呈现大幅增产，尤其土豆增产18% -21%，生 姜选弃率减少16%，优品增产38-41%。在毒理试验上，白老鼠应用上未见异常。
实施例2 : A组分......15% B组分......15%， C组分......20%， D组分......20%， E组分......30%， 总量满足100%。
生产控制要求 将菌种A D按用量配比同时倒入混合容器里混合培养，并添加20%之已经高温杀 菌后之培养基，主要成分为糖蜜(砂糖厂废弃物Molases) 10 % ，鸡蛋1 % ，牛肉膏0. 01 % ， 鲜奶1 % ，粉碎杂鱼3% 、尿素1 % 、磷酸二氢钾1 % 。酸碱度缓冲调整为p朋.8.操作控制温 度25°C -30°C ，维持搅拌、充氧，确认二次熟化完成后，再将E组分加入，继续维持打气搅拌 条件，72小时后，即可倒入储存槽存放与包装成商品。 依照实施例2所生产的抑菌复合生物有机液态肥经大田试验，对水稻条纹病区试 验，在未发病期中进行予防作业，每亩使用本产品一公升，稀释250倍平均散布于地面，病 症出现期中，每星期一公升，稀释200倍喷施茎叶。共作业六次后，效果明显，它成功取代了 对人畜和环境有害的有机砷农药。后期追肥减少15%，最后收成时，其产量不但没有减少， 反而还增产2.5% -3.6%。在毒理试验上，白老鼠应用上未见异常。
实施例3 A组分......15% B组分......10%， C组分......15%， D组分......10%， E组分......50%， 总量满足100%。
生产控制要求 将菌种A D按用量配比同时倒入混合容器里混合培养，并添加20%之已经高温杀 菌后之培养基，主要成分为糖蜜(砂糖厂废弃物Molases) 10 % ，鸡蛋1 % ，牛肉膏0. 01 % ， 鲜奶1 % ，粉碎杂鱼3% 、尿素1 % 、磷酸二氢钾1 % 。酸碱度缓冲调整为p朋.8.操作控制温 度25°C -30°C ，维持搅拌、充氧，确认二次熟化完成后，再将E组分加入，继续维持打气搅拌 条件，72小时后，即可倒入储存槽存放与包装成商品。 依照实施例3所生产的抑菌复合生物有机液态肥经大田试验，对巻心菜线虫病区 试验，在前期收成时，将菜边皮留置地面，肥料用量不变，整地施肥的同时，每亩喷施本产品 二公升，稀释200倍平均散布于地面，耕耘入土 20cm以上，播种后每二星期一公升，稀释250 倍喷施茎叶。共作业六次后，效果明显，它成功抑制土壤中线虫的为害，死棵< 2%，为对照 的22.5%。节省化学农药50%，增产18.7%。在毒理试验上，白老鼠应用上未见异常。
权利要求
一种抑菌型复合生物有机液态肥，其特征在于组分配比按重量计如下A.枯草芽孢杆菌 15-20％B.荧光假单胞菌 10-15％C.抗生链霉菌 15-20％D.哈茨木霉菌 10-20％E.甲壳素 30-50％总量满足100％。
2. —种如权利要求1所述的抑菌型复合生物有机液态肥的配制方法，其特征在于具体 步骤如下a. 制作菌种源在实验室中，将上述A、B、C、D四项菌种纯化、复壮培养，分别投入一公 升培养基中培养熟化，再投入五十公升种子罐作成量产用菌种源；b. 单种量产以吨级反应罐根据各菌种最适配的处方制作大量无菌培养基，以50倍放 大上限，渐次放大到所需容量，每次放大需维持适当充氧、搅拌及温控条件，每次培养时间 为5-10天；单种量产所用培养基1) 枯草芽孢杆菌及荧光假单胞菌综合氨基酸0. 2 0. 4%，磷酸二氢钾0. 8 1. 2%， 尿素0. 8 1. 2 % ，氯化钠0. 3 0. 5 % ，硫酸镁0. 01 0. 03 % ，硫酸亚铁0. 01 0. 02 % ，碳酸牵丐 0. 15 0. 25 % ，糖蜜0. 08 0. 12 % ，酸碱度为6. 5-7. 0 ;2) 抗生链霉菌可溶性淀粉0.8 1.2%，综合氨基酸O. 2 0.4%，磷酸二氢钾 0. 08 0. 12 % ，硝酸钾0. 08 0. 12 % ，氯化钠0. 04 0. 06 % ，硫酸镁0. 04 0. 06 % ，硫酸亚铁 0. OO广O. 002%，糖蜜1.2 1.8%，酸碱度为7. 0 7. 5 ;3) 哈茨木霉菌磷酸氢二钾0.08 0. 12%，硝酸钾0. 1 0. 3%，氯化钾0.04 0.06%，氯 化钠0. 04 0. 06 % ，硫酸镁0. 04 0. 06 % ，硫酸亚铁0. 001 0. 002 % ，糖蜜 6 % ，麦麸3 5 % ， 酸碱度为6. 5 7. 0 ;c. 混合秸抗培养按菌种A D前述的重量配比，将经过单种量产培养的菌种同时倒入 混合容器里进行混合培养，并添加培养物重量的15% 25%的已经高温杀菌后的培养基， 该培养基主要成分为糖蜜8 12%，鸡蛋0. 8 1. 2%，牛肉膏0. 01 0. 02%，鲜奶0. 8 1. 2%， 粉碎杂鱼2 4%、尿素0. 8 1. 2%、磷酸二氢钾0. 8 1. 2%;酸碱度缓冲调整为p朋.5 7. O，操 作控制温度25°C 30°C ，维持搅拌、充氧，确认二次熟化完成后，再将E组分加入，继续维持 打气搅拌条件，60 72小时后，即可倒入储存槽存放与包装成商品。
全文摘要
本发明属有机肥料技术领域，具体为一种抑菌型复合生物有机液态肥。它由具有强烈分解酶及抑菌能力的枯草芽孢杆菌，荧光假单胞菌为具有分解农残及溶解土壤不溶性磷盐的根圈土壤益生菌，抗生放线菌则分泌抗生素以助减免化学农药的需求量，木霉菌除能防除多种病原菌外，并能分解秸秆粗纤维，增进土壤物理性及可利用有机质含量。本产品并含具有杀菌及促长作用的甲壳素。这些生物科技成分再配合有机无机营养成分，综含而成兼具肥料及天然生物杀菌剂的双效新型生物制剂。因此，本发明产品是有机绿色产品，可广泛用于各种农作物。
文档编号C05G3/04GK101774853SQ20101002250
公开日2010年7月14日 申请日期2010年1月7日 优先权日2010年1月7日
发明者李远丰, 杨雪枣, 耿林宏 申请人:杨雪枣