专利名称：一种腐植酸菌肥的制备方法
技术领域：
本发明涉及肥料技术领域，尤其涉及一种应用微生物发酵方法生产高活性腐植酸 菌肥的一种方法。
背景技术：
腐殖酸类肥料是富含腐殖酸和一定标明量无机养分的肥料，简称腐肥。用腐殖酸 含量较高的泥炭、褐煤、风化煤等为主要原料，经不同的化学处理或加入一定量的氮、磷、钾 或某些微量元素所制成的肥料。如腐殖酸铵、硝基腐殖酸铵、腐殖酸氮磷复合肥等，这些统 称为腐殖酸类肥料，简称腐肥。腐肥即含有大量有机质，具有农家肥料的多种功能，同时又 含有速效养分，兼有化肥的某些特性，所以称它是一种多功能的有机无机复合肥料。目前， 国内外生产各种腐殖酸肥料品种，已广泛用于农业生产，而市面上出售的以风化煤为原料 的肥料大部分是腐植酸有机肥或腐植酸有机复合肥。生产工艺主要采取利用物理或化学方 法提取风化煤中的腐植酸，辅料加入一些含有腐植酸的物质，如褐煤、泥炭等。虽然这些方 法能提取出大量的腐植酸，但却需要大型的设备及大量的人力物力，增加了肥料的生产成 本，而且污染环境。而且现有菌肥只是注重肥料本身的微生物活性，但是不注重微生物在土 壤里的活性，肥料的作用效果差。
发明内容
本发明目的在于提供一种从风化煤中分离出具有降解风化煤使腐植酸含量增加 的高活性菌株，以风化煤为底物进行降解发酵，利用菌种在风化煤中的代谢活动，使腐植酸 活性增加，生产制成高活性腐植酸菌肥。本发明的目的由如下技术方案实施一种腐植酸菌肥的制备方法，包括以下步骤(1)微生物菌种分离步骤从风化煤堆中选取风化煤作为样品，用水稀释样品质 量份的5-30倍后，作为培养基，在37°C条件下培养，通过平板划线分离法，利用接种环挑选 出菌种，反复调节培养基，PH在6. 2-8. 3和温度为20-37°C的条件下，通过72-168小时，可 分离出能降解风化煤的分离菌种，所述分离菌种包括霉菌、放线菌、细菌；(2)菌种培养步骤将所述分离菌种在温度20 37°C、PH为6. 2 8. 3条件下， 在三角瓶中进行菌种扩大培养72-168小时；再在温度20 37°C、PH 6. 2 8. 3条件下， 在大三角瓶中进行菌种扩大培养72-168小时；再在温度20 37°C、PH 6. 2 8. 3条件 下，在一级种子罐中进行菌种扩大培养72-168小时；再在温度20 37°C、PH 6. 2 8. 3 条件下，在二级种子罐中进行菌种扩大培养72-168小时后，得到培养菌种；(3)发酵步骤将风化煤粉碎到粒径在0. 2mm以下，按其质量百分比的比例 加入所述培养菌种，混合后在温度25-37°C的条件下，在发酵槽中发酵7-15天，得到一次发 酵风化煤；(4)复混步骤将所述一次发酵风化煤按其质量百分比的1-2%比例加入所述培养菌种后再次混和后进行造粒，粒径在0. 2 0. 8mm范围，得到二次发酵风化煤；(5)包装步骤将所述二次发酵风化煤的颗粒筛选、干燥、称重、装袋即为产品。一种腐植酸菌肥的制备方法，其中优选的步骤(1)微生物菌种分离步骤如下从 风化煤堆中选取风化煤作为样品，用水稀释样品质量份的15倍后，作为培养基，在37°C条 件下培养，通过平板划线分离法，利用接种环挑选出菌种，反复调节培养基，在PH 7. 2和温 度28°C的条件下，通过100小时，可分离出能降解风化煤的分离菌种，所述分离菌种包括霉 菌、放线菌、细菌。一种腐植酸菌肥的制备方法，其中优选的步骤(2)菌种培养步骤如下将所述分 离菌种在PH 7. 2和28°C条件下，在三角瓶中进行菌种扩大培养100小时；再在温度28°C 和PH 7. 2条件下，在大三角瓶中进行菌种扩大培养100小时；再在温度28°C和PH :7. 2条 件下，在一级种子罐中进行菌种扩大培养100小时；再在温度28°C和PH 7. 2条件下，在二 级种子罐中进行菌种扩大培养100小时后，得到培养菌种。一种腐植酸菌肥的制备方法，其中优选的步骤(3)发酵步骤如下将风化煤粉碎 到粒径在0. 2mm以下，按其质量百分比的1. 5%比例加入所述培养菌种，混合后在温度28°C 的条件下，在发酵槽中发酵10天，得到一次发酵风化煤。一种腐植酸菌肥的制备方法，其中优选的步骤(4)复混步骤如下将所述一次发 酵风化煤按其质量百分比的1. 5%比例加入所述培养菌种后再次混和后进行造粒，粒径在 0. 2 0. 8mm范围，得到二次发酵风化煤。本发明的优点在于所公开的菌肥生产方法较现在市面上出售的腐植酸肥料，具 有反应条件温和、生产工艺简单、无污染、成本低等优点；按照本发明生产的菌肥具有腐植 酸活性高，且含有微生物活菌，作用时效长效果好的特点。
具体实施例方式以下通过实施例进一步阐述本发明，这些实施例仅用于举例说明的目的，并没有 限制本发明的范围。实施例1:一种腐植酸菌肥的制备方法，包括以下步骤(1)微生物菌种分离步骤从风化煤堆中选取风化煤作为样品，用水稀释样品质 量份的5倍后，作为培养基，在37°C条件下培养，通过平板划线分离法，利用接种环挑选出 菌种，反复调节培养基，在PH8. 3和温度37°C的条件下，通过168小时的时间，可分离出能降 解风化煤的分离菌种，包括霉菌、放线菌、细菌；(2)菌种培养步骤将分离菌种在温度37°C、PH 8. 3条件下，在三角瓶中进行菌 种扩大培养168小时；再在温度37°C、PH 8. 3条件下，在大三角瓶中进行菌种扩大培养 168小时；再在温度37°C、PH 8. 3、温度37°C条件下，在一级种子罐中进行菌种扩大培养 168小时；再在温度37°C、PH 8. 3、温度37°C条件下，在二级种子罐中进行菌种扩大培养 168小时后，得到培养菌种；(3)发酵步骤将风化煤粉碎到粒径在0. 2mm以下，按其质量百分比的比例加 入培养菌种，混合后在温度37°C的条件下，在发酵槽中发酵15天，得到一次发酵风化煤；(4)复混步骤将一次发酵风化煤按其质量百分比的比例加入培养菌种后再次混和后进行造粒，粒径在0. 2 0. 8mm范围，得到二次发酵风化煤；(5)包装步骤将二次发酵风化煤的颗粒经筛选、干燥、称重、装袋即为产品。实施例2 一种腐植酸菌肥的制备方法，包括以下步骤(1)微生物菌种分离步骤从风化煤堆中选取风化煤作为样品，用水稀释样品质 量份的30倍后，作为培养基，在37°C条件下培养，通过平板划线分离法，利用接种环挑选出 菌种，反复调节培养基，在PH6. 2和温度20°C的条件下，通过72小时的时间，可分离出能降 解风化煤的分离菌种，包括霉菌、放线菌、细菌；(2)菌种培养步骤将分离菌种在温度20°C、PH 6. 2条件下，在三角瓶中进行菌 种扩大培养72小时；再在温度20°C、PH 6. 2条件下，在大三角瓶中进行菌种扩大培养72 小时；再在温度20°C、PH 6. 2条件下，在一级种子罐中进行菌种扩大培养72小时；再在温 度20°C、PH 6. 2条件下，在二级种子罐中进行菌种扩大培养72小时后，得到培养菌种；(3)发酵步骤将风化煤粉碎到粒径在0. 2mm以下，按其质量百分比的2%比例加 入培养菌种，混合后在温度25°C的条件下，在发酵槽中发酵7天，得到一次发酵风化煤；(4)复混步骤将一次发酵风化煤按其质量百分比的2%比例加入培养菌种后再 次混和后进行造粒，粒径在0. 2 0. 8mm范围，得到二次发酵风化煤；(5)包装步骤将二次发酵风化煤的颗粒经筛选、干燥、称重、装袋即为产品。实施例3:一种腐植酸菌肥的制备方法，包括以下步骤(1)微生物菌种分离步骤从风化煤堆中选取风化煤作为样品，用水稀释样品质 量份的10倍后，作为培养基，在37°C条件下培养，通过平板划线分离法，利用接种环挑选出 菌种，反复调节培养基，在PH:7和温度30°C的条件下，通过120小时的时间，可分离出能降 解风化煤的分离菌种，包括霉菌、放线菌、细菌；(2)菌种培养步骤将分离菌种在温度30°C、PH 7条件下，在三角瓶中进行菌种 扩大培养120小时；再在温度30°C、PH 7条件下，在大三角瓶中进行菌种扩大培养120小 时；再在温度30°C、PH 7条件下，在一级种子罐中进行菌种扩大培养120小时；再在温度 30°C、PH 7条件下，在二级种子罐中进行菌种扩大培养120小时后，得到培养菌种；(3)发酵步骤将风化煤粉碎到粒径在0. 2mm以下，按其质量百分比的1. 5%比例 加入所述培养菌种，混合后在温度30°C的条件下，在发酵槽中发酵12天，得到一次发酵风 化煤；(4)复混步骤将一次发酵风化煤按其质量百分比的1. 5%比例加入培养菌种后 再次混和后进行造粒，粒径在0. 2 0. 8mm范围，得到二次发酵风化煤；(5)包装步骤将二次发酵风化煤的颗粒经筛选、干燥、称重、装袋即为产品。实施例4 一种腐植酸菌肥的制备方法，包括以下步骤(1)微生物菌种分离步骤从风化煤堆中选取风化煤作为样品，用水稀释样品质 量份的15倍后，作为培养基，在37°C条件下培养，通过平板划线分离法，利用接种环挑选出 菌种，反复调节培养基，在PH :7. 2和28°C温度的条件下，通过100小时的时间，可分离出能 降解风化煤的分离菌种，包括霉菌、放线菌、细菌任意一种；
(2)菌种培养步骤将分离菌种在PH 7. 2和28°C条件下，在三角瓶中进行菌种扩 大培养100小时；再在温度28°C和PH :7. 2条件下，在大三角瓶中进行菌种扩大培养100小 时；再在温度28°C和PH 7. 2条件下，在一级种子罐中进行菌种扩大培养100小时；再在温 度28°C和PH 7. 2条件下，在二级种子罐中进行菌种扩大培养100小时后，得到培养菌种；(3)发酵步骤将风化煤粉碎到粒径在0. 2mm以下，按其质量百分比的1. 5%比例 加入培养菌种，混合后在温度28°C的条件下，在发酵槽中发酵10天，得到一次发酵风化煤；(4)复混步骤将一次发酵风化煤按其质量百分比的1. 5%比例加入培养菌种后 再次混和后进行造粒，粒径在0. 2 0. 8mm范围，得到二次发酵风化煤；(5)包装步骤将二次发酵风化煤的颗粒经筛选、干燥、称重、装袋即为产品。
权利要求
一种腐植酸菌肥的制备方法，其特征在于，包括以下步骤(1)微生物菌种分离步骤从风化煤堆中选取风化煤作为样品，用水稀释样品质量份的5-30倍后，作为培养基，在37℃条件下培养，通过平板划线分离法，利用接种环挑选出菌种，反复调节培养基，PH在6.2-8.3和温度为20-37℃的条件下，通过72-168小时，可分离出能降解风化煤的分离菌种，所述分离菌种包括霉菌、放线菌、细菌；(2)菌种培养步骤将所述分离菌种在温度20～37℃、PH为6.2～8.3条件下，在三角瓶中进行菌种扩大培养72-168小时；再在温度20～37℃、PH6.2～8.3条件下，在大三角瓶中进行菌种扩大培养72-168小时；再在温度20～37℃、PH6.2～8.3条件下，在一级种子罐中进行菌种扩大培养72-168小时；再在温度20～37℃、PH6.2～8.3条件下，在二级种子罐中进行菌种扩大培养72-168小时后，得到培养菌种；(3)发酵步骤将风化煤粉碎到粒径在0.2mm以下，按其质量百分比的1-2％比例加入所述培养菌种，混合后在温度25-37℃的条件下，在发酵槽中发酵7-15天，得到一次发酵风化煤；(4)复混步骤将所述一次发酵风化煤按其质量百分比的1-2％比例加入所述培养菌种后再次混和后进行造粒，粒径在0.2～0.8mm范围，得到二次发酵风化煤；(5)包装步骤将所述二次发酵风化煤的颗粒筛选、干燥、称重、装袋即为产品。
2.根据权利要求1所述的一种腐植酸菌肥的制备方法，其特征在于，其中步骤(1)微生 物菌种分离步骤从风化煤堆中选取风化煤作为样品，用水稀释样品质量份的15倍后，作 为培养基，在37°C条件下培养，通过平板划线分离法，利用接种环挑选出菌种，反复调节培 养基，在PH:7.2和温度28°C的条件下，通过100小时，可分离出能降解风化煤的分离菌种， 所述分离菌种包括霉菌、放线菌、细菌。
3.根据权利要求1所述的一种腐植酸菌肥的制备方法，其特征在于，其中步骤(2)菌 种培养步骤将所述分离菌种在PH 7. 2和28°C条件下，在三角瓶中进行菌种扩大培养100 小时；再在温度28°C和PH:7.2条件下，在大三角瓶中进行菌种扩大培养100小时；再在温 度28°C和PH 7. 2条件下，在一级种子罐中进行菌种扩大培养100小时；再在温度28°C和 PH 7. 2条件下，在二级种子罐中进行菌种扩大培养100小时后，得到培养菌种。
4.根据权利要求1所述的一种腐植酸菌肥的制备方法，其特征在于，其中步骤(3)发 酵步骤将风化煤粉碎到粒径在0. 2mm以下，按其质量百分比的1. 5%比例加入所述培养菌 种，混合后在温度28°C的条件下，在发酵槽中发酵10天，得到一次发酵风化煤。
5.根据权利要求1所述的一种腐植酸菌肥的制备方法，其特征在于，其中步骤(4)复混 步骤将所述一次发酵风化煤按其质量百分比的1. 5%比例加入所述培养菌种后再次混和 后进行造粒，粒径在0. 2 0. 8mm范围，得到二次发酵风化煤。
全文摘要
本发明公开了一种从风化煤中分离出具有降解风化煤使腐植酸含量增加的高活性菌株，以风化煤为底物进行降解发酵，利用菌种在风化煤中的代谢活动，使腐植酸活性增加，通过微生物菌种分离步骤、菌种培养步骤、发酵步骤、复混步骤和包装步骤，生产制成高活性腐植酸菌肥。本发明的优点在于所公开的菌肥生产方法较现在市面上出售的腐植酸肥料，具有反应条件温和、生产工艺简单、无污染等优点；按照本发明生产的菌肥具有腐植酸活性高，且含有微生物活菌，作用时效长，效果好的特点。
文档编号C05F11/08GK101823907SQ201010171860
公开日2010年9月8日 申请日期2010年5月14日 优先权日2010年5月14日
发明者刘媛媛, 段开红, 王春颖, 田瑞华, 田野, 胡利伟, 苏士, 郭旺, 阿拉坦其其格 申请人:内蒙古西蒙集团有限公司