专利名称：一株栅藻藻株及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及微生物工程领域，具体而言，本发明涉及一株栅藻藻株(Desmodesmussp.)及其应用。
背景技术：
日益严重的能源短缺与环境恶化问题已成为全世界关注的热点。石油、天然气、煤等化石燃料是当今的主要能量来源，这类能源不可再生，随着这类能源的不断消耗，其天然储备急剧减少，按照全世界对化石燃料的消耗速度计算，这些能源可供人类使用的时间大约还有:石油45-50年，天然气50-60年，煤炭200-220年。化石燃料燃烧产生大量的水和二氧化碳，二氧化碳又是全球气候变暖的主要原因。许多科学家都认为，煤、油、天然气和树木的燃烧产生大量二氧化碳，二氧化碳进入大气层后使地球升温，全球性的温度的升高将产生一系列的台风、干旱、洪水和冰川加速融化的问题，对于人类的长期发展形成巨大的威胁。目前的二氧化碳治理所采用的捕捉掩埋技术成本较高，不适用于大面积推广。除废气夕卜，化石燃料的燃烧、各种产业生产过程中产生的废弃物导致的水污染也越来越引起全世界人们的关注。能源微藻技术的发展将为上述问题的解决提供了新的方向。微藻是体积小、结构简单、生长迅速的单细胞藻类，其分布极其广泛，从热带、温带到寒带直至南北两极，从淡水湖泊、盐碱沼泽到海水，从水表到大洋深处几乎都有微藻存在和繁衍。微藻还具有光能转换率高、对环境适应性强、易于遗传改良等特点，可以对其进行大规模培养。目前，微藻在大气污染和水污染治理、生物质能源等领域的开发应用价值得到日益关注。栅藻是淡水中常见 的浮游藻类，极喜在营养丰富的静水中繁殖。许多种类的栅藻对有机污染物具有较强的耐性。栅藻在水体自净和污水净化中有一定作用，是有机污水氧化塘生物相中的优势种类。它可与细菌同时附着在水中有机物碎片和其他水生植物体上，形成胶质层，吸附有机物。栅藻进行光合作用时，一方面产生氧气供细菌分解有机质的需要，另一方面还可直接利用有机质作为碳源和氮源，使水中有机物迅速降解，从而净化水体。栅藻细胞内含有丰富的蛋白质和维生素，是鱼类很好的饲料，大量繁殖的藻体也可作为家禽的饲料。栅藻繁殖快，营养价值高，可作为人工大量培养的材料。季祥、王金荣等发表的一株斜生栅藻的筛选及生长条件的优化(水产科技情报201037 (6))文献中公开了栅藻的藻株，在分类学上与本专利的栅藻藻株各属于不同属，含油率为31.5%，此文并未研究藻株的特殊环境条件下生长和收集特性。
发明内容
本发明目的在于提供一株栅藻藻株，可用于上述领域，且具有耐高温、易收集的特点，环境适应性强，适于高密度养殖，产业化应用潜力较大，可用于环境或工业生产中废弃二氧化碳的处理、生物能源的生产和废水处理。本专利中的藻株具有耐高温、易收集等特点。
本发明的技术方案如下:本发明提供的栅藻藻株(Desmodesmus sp.)为ENN2203A，于2010年11月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏号为CGMCC N0.4323。该ENN2203A栅藻藻株属淡水藻，栅藻属，椭圆形，大小10 μ m左右，两端及侧面带刺，常以四联体、二联体形式存在，也有单体存在，细胞内单个蛋白核(见图2);生长迅速，沉降性好，易收集，含油率高、提取总脂时较为容易，具有较大的大生产应用潜力，最高总脂含量达到52.168%。所述ENN2203A栅藻藻株的ITS部分序列为: TTTTTCCTCCCCCTTATTGATATGCTTAAGTTCAGCGGGTAGCCTTGCCTGAGCTCAGGTCGAATACAGAGATACGCGTCAGAGACACGTTTCCTGCTTGGCTCCTAACCAGGTCCTCAGACACAACTTCGTGTAGGCACCCGAGGGTGTTGCTACCTATGCAGTTGAGGGCGAATGGGGTGGCAGTTTAAGCCTCTGTGCTTCAGCCAACCCAATCGGAGGTGAGTCCGATTGGGAGGGCCAGATCCACCCCTGATGCCGGCTTGAGCAAGCACGACAAGCTTCCTGTTGAGGAAGAGGGGTGAGGGTGTAAACCGACGCTGAGGCAGACATGCTCTTCTCCGAGGAGTCGAGCGCAATATGCGTTCAAAGATTCGATGGTTCACGGAATTCTGCAATTCACACTACGTATCGCATTTCGCTGCGTTCTTCATCGTTGCGAGAGCCAAGATATCCGTTGTTGAGAGTTGTTTTCGTTAAAACTGCCGATTAACAGCAGCTGAAACTTCAGAGTTTGGTTTAATCAAATGTTGGTCAATGGTGTGTGTGTAGGTTAGTAGGCAAAACCAGGGTTAGTGGTTCGACCTAACGTCGGTACACAAATAAAAGAGTGCGTGTTGTGGTTTGCATATTCAATGATCCTTCCGCAGGTTCACCTACGGAAACCTTGTTACGACTTTTAGCATCCAAAAA，其如SEQ ID N0.1所示。将获得的ENN2203A的ITS部分序列及5.8S序列登录GenBank数据库进行BLAST比对，结果显示与ACCESSION号为DQ417525.1的Desmodesmusmutilvariousi 的 internal transcribed spacer 1,5.8S ribosomalRNA gene andinternal transcribed spacer 2sequence具有较高的相似性达95 %,覆盖率只有92 %(图1);表明ENN2203A与Desmodesmus mutilvariousi的亲缘关系最近,说明两者为同属藻株。
本发明通过自然界藻种分离纯化及筛选，获得一株性能良好的栅藻藻株(Desmodesmus sp.)ENN2203A。由于本发明提供的栅藻藻株ENN2203A在常温与高温下养殖干重全程差异都不大，最终15天时干重达7.2g/L左右，在40°C高温下养殖8-12h对ENN2203A的生长几乎没有影响，因此具有生物量高、生长速度快、培养密度高、环境适应性强的优势，适合产业化应用。而且本发明提供的藻株的总油脂含量可达50%以上，具有油脂含量高的特性，特别适合生物柴油的生产。本发明提供的栅藻藻株ENN2203A作为生长迅速，富含蛋白质和各种不饱和脂肪酸，可被广泛用作为许多水产品幼体的开口饵料或轮虫的饵料，也可用于开发生产动物饲料。本发明还提供了栅藻藻株ENN2203A的以下用途:其可用于含氮磷污水的污处理；其可用于二氧化碳减排。具体地，本发明包括以下方面:1、一株栅藻藻株(Desmodesmus sp.)ENN2203A，其保藏号为 CGMCCN0.4323。2、按以上I所述的栅藻藻株ENN2203A，其特征在于，所述栅藻藻株如SEQ ID N0.1所示的ITS部分序列。3、按以上1所述的栅藻藻株ENN2203A，其特征在于，所述栅藻藻株具有高温耐受性；优选耐受15-40°C的温度。4、按以上1所述的栅藻藻株ENN2203A，其特征在于，所述栅藻藻株的12小时沉降率为95%以上。5、按以上1所述的栅藻藻株ENN2203A的养殖方法，其特征在于，所述栅藻藻株在15-40°C的温度下养殖。6、按以上1所述的栅藻藻株ENN2203A的收集方法，其特征在于，所述栅藻藻株使用自然沉降法收集。7、一种以上1所述栅藻藻株ENN2203A的用途，其为用于含氮磷污水的污处理。
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8、一种以上1所述栅藻藻株ENN2203A的用途，其为用于二氧化碳减排。9、一种以上1所述栅藻藻株ENN2203A的用途，其为用于生物柴油生产。10、一种以上1所述栅藻藻株ENN2203A的用途，其为用于水产品饵料或动物饲料。本发明的技术效果如下:1、本发明的栅藻藻株沉降性能良好，有效降低藻体收集的成本；2、本发明的栅藻藻株耐高温性能良好，适于夏季室外养殖；3、本发明的栅藻藻株生长速度快，易于实现高密度养殖，适合于产业化推广；4、本发明的栅藻藻株可用于含氮磷污水的污处理、可用于二氧化碳减排、用于生物柴油生产或用于水产品饵料或动物饲料。
图1为ENN2203A部分ITS序列进行Blast的比对结果；图2为本发明栅藻藻株的形态；图3为ENN2203A室内养殖生长曲线；图4为ENN2203A高温耐受性生长曲线；和图5为ENN2203A废水废气养殖生长曲线。
具体实施例方式下面将详细描述本发明的具体实施方式
，这仅用于解释本发明，而不能解释为对本发明的限制。实施例1筛选产油栅藻藻株取无菌水稀释后的从廊坊地区取回的河水水样，在400倍显微镜观察后，大约细胞浓度为800-1200个/ml，用毛细管取大约Iul的藻液，接种于48孔装有BGll培养基(见表I)的培养板中，在25°C、光照强度为50umol/m2.s情况下进行培养，当达到107/ml细胞浓度时，显微镜观察，选择只有单藻株的孔，稀释至细胞浓度为1000-3000个/ml后铺平板，得到单藻株并保存于BGll固体平板上，命名为ENN2203A。表IBGll培养基配方
权利要求
1.一株栅藻藻株(Desmodesmus sp.) ENN2203A，其保藏号为 CGMCCN0.4323。
2.按权利要求1所述的栅藻藻株ENN2203A，其特征在于，所述栅藻藻株如SEQID N0.1所示的ITS部分序列。
3.按权利要求1所述的栅藻藻株ENN2203A，其特征在于，所述栅藻藻株具有高温耐受性；优选耐受15-40°C的温度。
4.按权利要求1所述的栅藻藻株ENN2203A，其特征在于，所述栅藻藻株的12小时沉降率为95%以上。
5.—种按权利要求1所述的栅藻藻株ENN2203A的养殖方法,其特征在于,所述栅藻藻株在15-40°C的温度下养殖。
6.一种按权利要求1所述的栅藻藻株ENN2203A的收集方法，其特征在于，所述栅藻藻株使用自然沉降法收集。
7.一种权利要求1所述栅藻藻株ENN2203A的用途，其为用于含氮磷污水的污处理。
8.—种权利要求1所述栅藻藻株ENN2203A的用途，其为用于二氧化碳减排。
9.一种权利要求1所述栅藻藻株ENN2203A的用途，其为用于生物柴油生产。
10.一种权利要求1 所述栅藻藻株ENN2203A的用途，其为用于水产品饵料或动物饲料。
全文摘要
本发明提供一株栅藻藻株(Desmodesmus sp.)及其应用，其为ENN2203A，于2010年11月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏号为CGMCC NO.4323。本发明的栅藻藻株具有耐高温、易收集的特点，环境适应性强，适于高密度养殖，可用于含氮磷污水的污处理，可用于二氧化碳减排，用于生物柴油生产或用于水产品饵料或动物饲料等，产业化应用潜力较大。
文档编号A23K1/00GK103160440SQ201110427579
公开日2013年6月19日 申请日期2011年12月19日 优先权日2011年12月19日
发明者王媛媛, 邓平, 吴义诚, 马建源, 邵元龙, 吴洪 申请人:新奥科技发展有限公司