提高党参耐盐性的方法
【专利摘要】本发明公开了一种提高党参耐盐性的方法，其是在党参播种前用有益土壤细菌枯草芽孢杆菌GB03菌液对其进行浸泡处理，浸泡处理后分离出种子进行播种。采用上述方案在播种前对党参种子进行处理，其可有效地提高党参的耐盐性，显著提高党参种子在盐碱化土壤中播种的出苗率、生长势，提高党参根系的生长，从而提高了产量。同时，枯草芽孢杆菌具有对人畜无毒无害、不污染环境、非致病性和抗逆性强等特点。本发明对党参种子处理的方法简单，可广泛应用于在轻度和中度盐碱化土地上栽培党参，具有重要的经济、社会和生态价值。
【专利说明】提高党参耐盐性的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及中药材种植领域，具体涉及一种提高党参耐盐性的方法。
【背景技术】
[0002]党参，又名黄参，产于我国山西、甘肃、陕西、四川和湖北等地，目前，党参主要采用人工栽培种植，少量为野生，其中，甘肃是党参的最大产区。近年来，党参在治疗冠心病、高血脂症、低血压病等方面取得了新的进展，使其用量速增；同时，随着中药现代化的实施以及中国在世界经济中地位的提升，中药材的生产和出口均稳步的增长，党参药材供不应求已经成为中药生产中的一大难题。党参耐盐性弱，对盐溃化土壤敏感，而我国大部分耕地土壤盐碱化严重，使得党参难以被大范围的推广栽培种植。
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于提供一种提高党参耐盐性的方法，使得党参的耐盐性增强，扩大党参的种植区域，解决目前市场上党参供不应求的难题。
[0004]为实现上述目的，本发明采用如下技术方案进行实施:
[0005]一种提高党参耐盐性的方法，其是在党参播种前用有益土壤细菌枯草芽孢杆菌GB03菌液对其进行浸泡处理，浸泡处理后分离出种子进行播种。
[0006]具体操作步骤为:
[0007]S1:对党参种子进行消毒处理；
[0008]S2:配制枯草芽孢杆菌GB03菌液；
[0009]S3:对党参种子进行浸泡处理；
[0010]S4:将浸泡处理后的党参种子与农田土混合，然后进行播种。
[0011]详细的操作为:
[0012]有益土壤细菌枯草芽孢杆菌GB03菌液中OD6tltl为0.8~1.0，浸泡处理的时间为
5~IOmin0
[0013]步骤SI中党参种子先用酒精浸泡8~10s，然后用次氯酸钠浸泡10~12min，最后用灭菌的蒸馏水冲洗，放置于2~4°C的冰箱中过夜待用。所用的酒精浓度为75%，次氯酸钠浓度为5%，蒸馏水冲洗6~8次。
[0014]配制枯草芽孢杆菌GB03菌液的具体操作为:配制LB液体培养基，灭菌冷却后在每IOOmL的LB液体培养基中加入50~100 μ L的枯草芽孢杆菌GB03菌液，然后进行菌株培养，当菌液浓度0D_为0.8~1.0时，取出备用。LB液体培养基中氯化钠、胰蛋白胨和酵母粉的重量比为1:2:1，溶 剂为蒸馏水；调pH至7.2，115~132°C灭菌，然后冷却至20~35°C备用。菌株培养在恒温培养摇床上进行，控制转速为180~250r/min，温度为25~30°C。
[0015]采用上述方案在播种前对党参种子进行处理，其可有效的提高党参的耐盐性，可显著提高党参种子在盐碱化土壤中播种的出苗率、生长势，提高党参根系的生长，从而提高了产量。同时，枯草芽孢杆菌具有对人畜无毒无害、不污染环境、非致病性和抗逆性强等特点。本发明对党参种子处理的方法简单，可广泛应用于在轻度和中度盐碱化土地上栽培党参，具有重要的经济、社会和生态价值。
【专利附图】
【附图说明】
[0016]图1为枯草芽孢杆菌GB03对不同盐浓度土壤中党参根长(Root length)的影响；
[0017]图2为枯草芽孢杆菌GB03对不同盐浓度土壤中党参根鲜重(Root fresh weight)的影响；
[0018]图3为枯草芽孢杆菌GB03对不同盐浓度土壤中党参根干重(Root dry weight)的影响。
【具体实施方式】
[0019]为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步的详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。以下所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本【技术领域】的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以作出若干的同等的替换和润饰，这些同等的替换和润饰也应视为本发明权利要求请求的保护范围。
[0020]实施例1
[0021]党参种子消毒处理:党参种子用75%的酒精浸泡IOs后，使用5%次氯酸钠浸泡lOmin，用灭菌的蒸馏水冲洗7次，于2~4°C冰箱过夜；
[0022]枯草芽孢杆菌GB03菌液制备:先配制溶菌肉汤LB液体培养基:按照氯化钠、胰蛋白胨和酵母粉的比例为1:2:1配制，溶剂为蒸馏水；调？!1到7.2，高温为132°C灭菌，待冷却温度为20°C后，每IOOmL的LB液体培养基加入50 μ L的枯草芽孢杆菌GB03菌液，在转速为250r/min下，温度为25°C的恒温培养摇床上培养过夜后，测定菌液浓度为OD6tltl为0.8~1.0时，取出备用；
[0023]种子菌液处理:将消毒处理完成种子浸泡于枯草芽孢杆菌GB03菌液中lOmin，然后将菌液倒出；取适量的农田土与刚处理完的种子混合均匀，保证土壤颗粒松散待用。
[0024]实施例2
[0025]党参种子消毒处理:党参种子用75%的酒精浸泡8s后，使用5%次氯酸钠浸泡12min，用灭菌的蒸馏水冲洗8次，于2~4°C冰箱过夜；
[0026]枯草芽孢杆菌GB03菌液制备:先配制溶菌肉汤LB液体培养基:按照氯化钠、胰蛋白胨和酵母粉的比例为1:2:1配制，溶剂为蒸馏水；调？11到7.2，高温为115°C灭菌，待冷却温度为35°C后，每IOOmL的LB液体培养基加入100 μ L的枯草芽孢杆菌GB03菌液，在转速为180r/min下，温度为30°C的恒温培养摇床上培养过夜后，测定菌液浓度为OD6tltl为0.8~1.0时，取出备用；
[0027]种子菌液处理:将消毒处理完成种子浸泡于枯草芽孢杆菌GB03菌液中5min，然后将菌液倒出；取适量的农田土与刚处理完的种子混合均匀，保证土壤颗粒松散待用。
[0028]实施例3
[0029]党参种子消毒处理:党参种子用75%的酒精浸泡IOs后，使用5%次氯酸钠浸泡lOmin，用灭菌的蒸馏水冲洗7次，于2~4°C冰箱过夜；[0030]种子菌液处理:取适量的农田土与消毒处理完的种子混合均匀，保证土壤颗粒松散待用。
[0031]实施例4
[0032]党参种子消毒处理:党参种子用75%的酒精浸泡8s后，使用5%次氯酸钠浸泡12min，用灭菌的蒸馏水冲洗8次，于2~4°C冰箱过夜；
[0033]种子菌液处理:取适量的农田土与消毒处理完的种子混合均匀，保证土壤颗粒松散待用。
[0034]实施例5
[0035]分别配制NaCl浓度为0mM、50mM、IOOmM和150Mm的土壤，然后将实施例1、2中处 理后的党参种子分别播种于上述各土壤中，标记为GB03 ;将实施例3、4中处理后的党参种子分别播种于上述各土壤中，标记为对照LB，观察党参茎、根的长势，具体结果如图1~3所
/Jn ο
[0036](I)、在0、50、100和150mM的NaCl盐胁迫下，与对照LB相比，GB03分别显著(P< 0.05)增加党参根长 9%、12.3%U9.4%和 27.7%。
[0037](2)、在 0、50、100 和 150mM NaCl 盐胁迫下，较对照 LB, GB03 分别显著(P < 0.05)增加党参根部鲜重66.0%、72.7%、8.6%和28.4%，分别显著(P < 0.05)提高党参根部干重 117%、69.9%,31.0%和 37.9%。
【权利要求】
1.一种提高党参耐盐性的方法，其是在党参播种前用枯草芽孢杆菌GB03菌液对其进行浸泡处理，浸泡处理后分离出种子进行播种。
2.如权利要求1所述的提高党参耐盐性的方法，其特征在于:枯草芽孢杆菌GB03菌液中 OD6tltl 为 0.8 ~1.0。
3.如权利要求1所述的提高党参耐盐性的方法，其特征在于:浸泡处理的时间为5~IOmin0
4.如权利要求1或2或3所述的提高党参耐盐性的方法，其特征在于，具体操作步骤为: S1:对党参种子进行消毒处理； S2:配制枯草芽孢杆菌GB03菌液； S3:对党参种子进行浸泡处理； S4:将浸泡处理后的党参种子与农田土混合，然后进行播种。
5.如权利要求4所述的提高党参耐盐性的方法，其特征在于:步骤SI中党参种子先用酒精浸泡8~IOs,然后用次氯酸钠浸泡10~12min,最后用灭菌的蒸懼水冲洗,放置于2~S4°C的冰箱中过夜待用。
6.如权利要求4所述的提高党参耐盐性的方法，其特征在于，配制枯草芽孢杆菌GB03菌液的具体操作为:配制LB液体培养基，灭菌冷却后在每IOOmL的LB液体培养基中加入S50~100 μ L的枯草芽孢杆菌GB03菌液，然后进行菌株培养，当菌液浓度OD6tltl为0.8~1.0时，取出备用。
7.如权利要求5所述的提高党参耐盐性的方法，其特征在于:所用的酒精浓度为75%，次氯酸钠浓度为5%，蒸馏水冲洗6~8次。
8.如权利要求6所述的提高党参耐盐性的方法，其特征在于:LB液体培养基中氯化钠、胰蛋白胨和酵母粉的重量比为1:2:1，溶剂为蒸馏水；调？11至7.2，115~1321:灭菌，然后冷却至20~35°C备用。
9.如权利要求6所述的提高党参耐盐性的方法，其特征在于:菌株培养在恒温培养摇床上进行，控制转速为180~250r/min，温度为25~30°C。
【文档编号】A01C1/00GK103999595SQ201410246686
【公开日】2014年8月27日 申请日期:2014年6月5日 优先权日:2014年6月5日
【发明者】张金林, 吴永娜, 许瑞, 韩庆庆, 吕昕培, 王引权, 王锁民 申请人:兰州大学