西番莲提取物防治三七黑斑病的用途
【专利摘要】本发明公开了西番莲提取物防治三七黑斑病的用途，属于植物病虫害防治【技术领域】，所述的西番莲提取物的制备方法如下：(1)选取无病，无虫害的西番莲鲜体，洗净，晾干，然后将鲜茎剪成小段，鲜叶剪成碎片；(2)往步骤(1)的西番莲鲜茎小段和鲜叶碎片中加入5-10倍量的水或无水乙醇，在室温下浸提0.5-2h，然后超声20-40min，再用绸布与滤纸分别过滤一次，得到滤液，滤渣再用4-8倍量与2-6倍量的水或无水乙醇重复上述提取步骤各一次，分别得到滤液，合并三次的滤液，减压浓缩，干燥，使用紫外线杀菌，然后用无菌水定容得到本发明的西番莲提取物溶液。本发明的西番莲提取物对三七黑斑病病原菌具有良好的抑菌效果。
【专利说明】西番莲提取物防治三七黑斑病的用途
【技术领域】
[0001]本发明涉及病虫害防治【技术领域】，尤其涉及西番莲提取物防治三七黑斑病的用途。
【背景技术】
[0002]西番莲(学名:Passiflora edulis)，产于美洲的热带及亚热带地区。原产于巴西，1610年间传入欧洲，当时西班牙传教士发现其花部的形状极似基督之十字架刑具，柱头上3个分裂，极似3根钉，花瓣红斑、恰似耶稣头部被蔷薇刺出血形象，5个花药，恰似受伤伤痕，西班牙人以Pass1flos名之，直译之为“受难花”。Pass1n也有热情之意，故也常被称为热情果。西番莲的花有5片花萼和5片花瓣，像钟上的字盘，所以又称为时计果。西番莲的果汁常被用作香料，加在其他果汁中。
[0003]三七(Panax notoginseng F.H.chen)又名田七、金不换等。是我国名贵的特产药材，也是驰名中外的云南白药主要原料之一，它能补血、去癖生新、止血蛆、能通能补，功效良好。三七花、叶还可代茶饮用，具有清凉祛暑、消渴通便作用，对高血压头昏目眩有较好的疗效。三七治疗冠心病、心绞痛等有显著效果，国内外医学家极为重视。三七黑斑病是三七近年来主要病害之一，产区群众称“扭脖子”、“扭上盘”、“扭下盘”、“干花症”、“黑杆瘟”等病。其症状大都由三七黑斑病菌(Alternaria panax Whetzel)危害所致。三七产区的云南省文山壮族自治州各县，广西壮族自治区靖西等县都有分布，危害严重，常年一般发病率20-35 %，严重的三七园发病率可达90 %以上。所以三七黑斑病是造成近几年三七产量品质和种子大幅度下降的主要原因。本发明的西番莲提取物对三七黑斑病病原菌(Alternariapanax ffhetzel)具有良好的抑菌效果，这种抑菌作用具有积极的应用价值，对于三七病害的生物防治技术具有重要意义。
【发明内容】
[0004]本发明目的在于提供一种西番莲提取物防治三七黑斑病的用途。
[0005]本发明采取的技术方案是:
[0006]西番莲提取物防治三七黑斑病的用途。
[0007]本发明的西番莲提取物的制备方法的具体步骤如下:
[0008](I)选取无病，无虫害的西番莲鲜体，洗净，晾干，然后将鲜茎剪成小段，鲜叶剪成碎片；
[0009](2)往步骤(I)的西番莲鲜莖小段和鲜叶碎片中加入5-10倍量的水或无水乙醇，在室温下浸提0.5-2h，然后超声20-40min，再用绸布与滤纸分别过滤一次，得到滤液，滤渣再用4-8倍量与2-6倍量的水或无水乙醇重复上述提取步骤各一次，分别得到滤液，合并三次的滤液，减压浓缩，干燥，使用紫外线杀菌，然后用无菌水定容得到本发明的西番莲提取物溶液。
[0010]步骤(I)中，鲜莖小段长4-5cm,鲜叶碎片长2-3cm,宽1cm。
[0011]步骤(2)中，优选往步骤(I)的西番莲鲜茎小段和鲜叶碎片中加入8倍量的水或无水乙醇,在室温下浸提Ih,然后超声30min。
[0012]步骤(2)中，超声功率为1000W。
[0013]步骤⑵中，优选滤渣再用6倍量与4倍量的水或无水乙醇重复上述提取步骤各一次，分别得到滤液。
[0014]步骤⑵中，用无菌水定容至浓度为5g/ml的西番莲提取物溶液。
[0015]本发明的积极效果如下:
[0016]本发明的西番莲提取物对三七黑斑病病原菌具有良好的抑菌效果，实验结果表明:西番莲叶的乙醇提取液能明显抑制三七链格孢菌生长，在浓度为lg/ml时抑制率为40%，抑制作用随着浓度降低而下降；茎的水提液、乙醇提液均能明显抑制三七链格孢菌生长，在浓度为lg/ml时抑制率均为30%，抑制作用随着浓度降低而下降。
【具体实施方式】
[0017]下面的实施例是对本发明的进一步详细描述。
[0018]实施例1
[0019]1、西番莲提取物制备:
[0020]取西番莲无病、无虫害鲜体洗净、晾干。鲜茎剪成4_5cm长小段，鲜叶剪成长2-3cm,宽Icm碎片，分别用8倍量水室温下浸提Ih后超声0.5h (超声功率为1000W)，然后用绸布与滤纸分别过滤一次，得到滤液；滤渣再分别用6倍量与4倍量水重复以上提取步骤各一次，分别得到滤液，合并三次滤液；减压浓缩，干燥，使用紫外线杀菌后，用无菌水定容至浓度为5g/ml溶液。
[0021]取西番莲无病、无虫害鲜体洗净、晾干。鲜茎剪成4_5cm长小段，鲜叶剪成长2-3cm,宽Icm碎片，分别用8倍量无水乙醇室温下浸提Ih后超声0.5h (超声功率为1000W)，然后用绸布与滤纸分别过滤一次，得到滤液；滤渣再分别用6倍量与4倍量无水乙醇重复以上提取步骤各一次，分别得到滤液，合并三次滤液；减压浓缩，干燥，使用紫外线杀菌后，用无菌水定容至浓度为5g/ml溶液。
[0022]2、西番莲茎、叶提取物的抑菌作用
[0023]2.1材料与试剂
[0024]西番莲茎、叶的水和乙醇提取物、PDA培养基、分析用水为灭菌超纯水。供试菌种:三七黑斑病病原菌链格孢(Alternaria panax ffhetzel)由广西大学农学院植物病理实验室提供。
[0025]人参链格孢(Alternaria panax ffhetzel)采用PDA培养基,采用病原菌生长速率法测定不同浓度提取物对病原菌的抑制效果。量取20ml、1ml、5ml西番莲水和乙醇提取物供试样，分别加入80ml、90ml、95ml灭菌的PDA培养基中，制得不同浓度的PDA培养基(供试样浓度分别为lg/ml、0.5g/ml和0.25g/ml)。将配好的PDA培养基倒入培养皿(每个培养皿15ml)，待培养基冷却后，用直径0.5cm的打孔器(高温灭菌)在预先培养的病原菌种中打取菌丝块，用接种针将菌丝块转接到培养皿的中央，每培养皿接种一块，置于生化培养箱中37°C下培养，至第五天时取出用十字交叉法测量菌落直径，结果取三次重复实验的平均值，得到不同浓度提取物对供试菌的抑菌效果。
[0026]用Williamson提出的敏感指数RI作为衡量指标，RI = {当T彡C时，1-C/T ;当T〈C时，T/C-l } C为对照值，T为处理值。RI>0时表示促进作用；RI〈0时为抑制作用；RI=O时表示没有作用。RI绝对值代表抑菌作用强度的大小。
[0027]表1.西番莲提取物对三七黑斑病病原菌的抑制作用
[0028]
处埋浓度(g/ml) 处理值(cm) CK (cm) RI值
1.003,453.70 -0.07
水提取液 0.50 3.71 3.70 0.00
0.253.753.70 0.0!
1.002.233.70 -0.40
乙醇提取液 0.50 2.4 3.70 -0.35
0.252.963.70 -0.20
1.002.563.70 -0.31
水提取液 0.50 3.24 3.70 -0.12
*0.253.543.70-0.04
茎
1.002.55 3.70-0.31
乙醇提取液 0.50 2.76 3.70-0.25
0.25_320_3.70-0.14
[0029]由表I可见:西番莲叶的乙醇提取液能明显抑制三七链格孢菌生长，在浓度为Ig/ml时抑制率为40%，抑制作用随着浓度降低而下降；茎的水提液、乙醇提液均能明显抑制三七链格孢菌生长，在浓度为lg/ml时抑制率均为30%，抑制作用随着浓度降低而下降。
[0030]尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
【权利要求】
1.西番莲提取物防治三七黑斑病的用途。
2.如权利要求1所述的西番莲提取物的制备方法，其特征在于:所述方法的具体步骤如下: (1)选取无病，无虫害的西番莲鲜体，洗净，晾干，然后将鲜茎剪成小段，鲜叶剪成碎片; (2)往步骤(I)的西番莲鲜茎小段和鲜叶碎片中加入5-10倍量的水或无水乙醇，在室温下浸提0.5-2h，然后超声20-40min，再用绸布与滤纸分别过滤一次，得到滤液，滤渣再用4-8倍量与2-6倍量的水或无水乙醇重复上述提取步骤各一次，分别得到滤液，合并三次的滤液，减压浓缩，干燥，使用紫外线杀菌，然后用无菌水定容得到本发明的西番莲提取物溶液。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于:步骤(I)中，鲜茎小段长4-5cm，鲜叶碎片长 2_3cm,宽 1cm。
4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于:步骤(2)中，往步骤(I)的西番莲鲜茎小段和鲜叶碎片中加入8倍量的水或无水乙醇,在室温下浸提lh，然后超声30min。
5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于:步骤(2)中，超声功率为1000W。
6.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于:步骤⑵中，滤渣再用6倍量与4倍量的水或无水乙醇重复上述提取步骤各一次，分别得到滤液。
7.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于:步骤(2)中，用无菌水定容至浓度为5g/ml的西番莲提取物溶液。
【文档编号】A01P3/00GK104126615SQ201410369959
【公开日】2014年11月5日 申请日期:2014年7月30日 优先权日:2014年7月30日
【发明者】李良波, 岑春艺, 张平刚, 韦继光, 黄荣韶, 蓝芳 申请人:广西大学