三株防治新疆红枣树黑斑病病害的生防细菌菌株的制作方法
【专利摘要】本发明公开了三株防治新疆红枣树黑斑病的拮抗细菌菌株，菌株为芽孢杆菌属。所述芽孢杆菌经平板对峙试验筛选所得，能够有效抑制红枣树黑斑病病原菌的生长。菌株来源于土壤中，012菌体形状为杆状，鞭毛特征不明显，为革兰氏阴性茵，单菌落为近圆形，乳白色、奶油状、不透明、中央有隆起的皱褶、边缘整齐、不易乳化；045-1菌体的形状为短杆状，鞭毛特征不明显，为革兰氏阳性菌，单菌落为近圆形，乳白色、奶油状、不透明、中央有隆起的皱褶、边缘整齐、易乳化；063-1菌体的形状为短杆状，鞭毛特征不明显，为革兰氏阳性菌。单菌落为近圆形，乳白色、奶油状、不透明、中央有隆起的皱褶、边缘整齐、不易乳化。菌株做为生物制剂，不含有化学农药的有害成分，具有无毒无污染、易生产等优点，具有广阔的应用前景。
【专利说明】三株防治新疆红枣树黑斑病病害的生防细菌菌株
【技术领域】
[0001]本发明属于森林保护领域，具体涉及三株防治新疆红枣树黑斑病病害的拮抗细菌菌株及其应用。
【背景技术】
[0002]随着人们对红枣的营养价值及药用价值认识得不断深入，社会需求量的加大，有效地激发了新疆规模化发展、产业化经营枣树的积极性，现已发展成为南疆林果业中的新型产业。随着农业产业结构的调整和退耕还林政策的实施，新疆红枣产业发展迅速，截至2009年底，新疆红枣种植面积已达32.07万hm2，约占全国的21.38%，南疆已成为我国商品枣的生产基地。随着红枣直播建园技术的应用，红枣种植规模迅速扩大，矮化密植栽培模式在全疆广泛采用，但综合管理水平相对滞后，导致黑斑病、缩果病、裂果病等病害在局部地区严重发生，尤其是枣黑斑病。
[0003]通常主要通过加强枣园综合管理，增强树势来防治。如合理密植、合理施肥合理灌水、合理利用激素、化学防治等。由于生态果园的提出，化学防治对果园生态环境与人类健康有影响。生物防治不仅具有有效控制害虫、不污染环境、改善农业生态系统、而且利用生物防治或微生物活菌剂防治植物病害，资源丰富，选择性强，对人、畜及植物安全，一旦被驯化而建立种群，对病虫害有较长期的控制作用。从微生物种类来看，多作为微生物农药使用，不论是病毒、细菌、和真菌等，研究的热点都是-拮抗细菌。拮抗细菌是从土壤中筛选出的对植物病原物有抑制作用的细菌，主要是通过产生抑制物质或改变菌种周围的小环境来致使病菌菌丝畸形或菌丝不产孢，从而达到拮抗的作用的一类细菌。拮抗菌株芽孢杆菌，是从土壤中分离获得的对红枣树黑斑病具有较好拮抗作用的一株生物防治细菌菌株，对红枣黑斑病病害的防治具有重要意义。
【发明内容】
[0004]本发明所要解决的 技术问题是提供三株防治新疆红枣树黑斑病病害的生防细菌株。
[0005]本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为:通过对土壤中细菌进行分离纯化，筛选出对红枣黑斑病病原菌拮抗活性好的拮抗细菌。其方法如下:
[0006]1、筛选细菌；
[0007]2、供试病原菌由10级研究生从红枣病斑中分离得到；
[0008]3、配制培养基:1)菌株纯化常用的培养基；2)细菌鉴定常用培养基
[0009]4、拮抗细菌拮抗作用的测定:1)拮抗细菌对病原菌的平板对峙拮抗试验；2)拮抗细菌发酵液对病原菌生长影响的试验
【具体实施方式】
[0010]以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。[0011]实施例1
[0012]采用土壤稀释法筛选分离细菌，很据形态、生理生化特征及16S rDNA序列分析鉴定确定其为小芽孢杆菌。菌株来源于土壤中，012菌体形状为杆状，鞭毛特征不明显，为革兰氏阴性菌，单菌落为近圆形，乳白色、奶油状、不透明、中央有隆起的皱褶、边缘整齐、不易乳化；045-1菌体的形状为短杆状，鞭毛特征不明显，为革兰氏阳性菌，单菌落为近圆形，乳白色、奶油状、不透明、中央有隆起的皱褶、边缘整齐、易乳化；063-1菌体的形状为短杆状，鞭毛特征不明显，为革兰氏阳性菌。单菌落为近圆形，乳白色、奶油状、不透明、中央有隆起的皱褶、边缘整齐、不易乳化。通过拮抗细菌的拮抗试验可以得出三株拮抗菌对红枣黑斑病病菌的拮抗效果平 均达到了 85%，效果非常可观；通过抑制原理实验可以得出:三株拮抗细菌与红枣黑斑病病菌发生拮抗试验时，拮抗细菌使红枣黑斑病病原菌正常的菌丝隔膜发生了断裂、解体或畸形。且本次试验鉴定出的三株芽孢杆菌，本次试验鉴定出的拮抗细菌，均为好氧型细菌，在厌氧情况下可以缓慢生长，具有良好地适应生长能力，在温度高达45°C时也能正常生长。从而在生物药剂开发中，提高了培育拮抗细菌的存活率，为以后农业提供廉价、高效的生物农药奠定了基础。
【权利要求】
1.筛选细菌。
2.供试病原菌由10级研究生从红枣病斑中分离得到。
3.配制培养基:1)菌株纯化常用的培养基；2)细菌鉴定常用培养基。
4.拮抗细菌拮抗作用的测定:1)拮抗细菌对病原菌的平板对峙拮抗试验；2)拮抗细菌发酵液对病原菌生长影响的试验。
【文档编号】C12Q1/04GK103695527SQ201310727738
【公开日】2014年4月2日 申请日期:2013年12月26日 优先权日:2013年12月26日
【发明者】马荣, 田呈明, 朱银飞, 梁英梅, 王晓炜, 王阳阳, 胡建新 申请人:新疆农业大学