本发明涉及果树杂交育种领域，具体涉及一种提高梨杂交种子发芽率及成苗率的方法。
背景技术：
杂交育种是目前梨育种的主要途径。由于通过人工杂交得到的杂交种子数量有限，梨杂交种子需要达到一定的需冷量才能解除休眠，而且梨杂交种子与苹果等其他杂交种子相比具有种皮厚、紧实等特点，给种子萌发带来一定困难。传统育种方法主要是利用自然冷源，通过冬季层积杂交种子60~80天，春季催芽再播种，一般成苗率只有50~60%。
在现有技术中，如专利申请号为200910061395.5的已授权专利“砂梨杂交种催芽育种的方法”，其操作时需要经砂梨杂交果的采摘、果实整理挑选、预贮、果实冷藏、种子剥离及清洗、种子沙藏、播种操作步骤，其操作较为繁复，在其果实冷藏操作步骤中需要历时3个月的时间，算上其种子沙藏的30天，育种周期至少4个月的时间，育种周期较长，也增加了育种成本，其发芽率虽可达到80 ~ 90%，但距离更优的发芽率还存在差距；专利申请号为201510117501.2的已公布专利申请“一种提高库尔勒香梨杂交种子发芽率的方法”中，其操作方法繁复，后熟期需要110~130天，层积需55~60天，发芽率虽可达到85%以上，但育种周期长。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种提高梨杂交种子发芽率及成苗率的方法，旨在缩短育苗周期，使育苗操作简便、易行，进一步提高梨杂交种子发芽率和成苗率。
为实现上述目的本发明采用的技术方案是：
一种提高梨杂交种子发芽率及成苗率的方法，包括如下步骤：
1) 杂交果实采摘及贮藏：
梨杂交果实充分成熟后采摘，放在储藏室内，放置时需分层摆放，室温保持在10~15℃，放置一个月让种子充分成熟；
2) 剥取种子：
一月后剥取步骤1)中完全变成褐色或深褐色梨杂交果实的种子，并将表面的粘性物质清洗干净；
3) 种子层积：
将种子与干净湿细沙按1:4的比例混匀装入尼龙网袋，放入装有湿沙的塑料篮内，置冰箱冷藏，温度控制在2~6℃，定期补水保持沙子湿度手握成团而不滴水，含水量控制在3~4%，每周翻动种子袋一次，层积60天左右；
4) 播种：
将层积好的种子取出，筛掉细沙，用水冲洗干净后将发芽种子和未发芽种子分开，发芽种子直接播种；未发芽种子先在清水中浸泡2小时，剥去种子外种皮及内种皮，注意不要伤及胚芽和子叶，播种到装有优质草炭土或育苗土的50目穴盘中，深度1cm；播种后洒透水，穴盘上盖无纺布保湿，5~7天洒一次水，一周后去除无纺布；
5) 苗期管理：
种子播种后7~10天出土，每2-3天视穴盘培养土墒情洒水1次，二叶期用3%的甲霜•噁霉灵水剂500倍液灌根1~2次，防止苗期立枯病发生，杂种实生苗四叶期时移入8cm×8cm的营养钵继续培育。
本发明中，采摘成熟的果实并在10~15℃的储藏室内储藏1个月，可使种子充分吸收果实营养、充分成熟，取种后直接冷藏层积60天左右，以打破种子休眠。
本发明的有益效果是：
与现有技术相比较，本发明的操作步骤更加简便易行，采摘成熟的果实并在10~15℃的储藏室内储藏1个月，可以使种子充分成熟，与现有的冷藏后熟操作相比可缩短种子成熟期；较传统方法将种子阴干后，贮藏一段时间再在水中浸泡待吸足水分层积操作更为简单，虽然冷藏层积需60天左右，但整个育苗周期缩短；将层积后未发芽种子直接剥去外种皮和内种皮后再播种，可保证其迅速发芽，提高了种子发芽率和实生苗整齐度；播种后覆盖无纺布保湿减少了洒水次数，使穴盘内土壤温湿度相对恒定，有利于种子发芽；从实生苗二叶期用3%的甲霜•噁霉灵高效杀菌剂灌根，预防猝倒病发生，提高了成苗率。
实施例证1：2016年对六个梨杂交组合的发芽数及成苗数的统计。
表1：2016年对六个梨杂交组合的发芽数及成苗数的统计
由表1可知，六个梨杂交组合的平均发芽率为2271/2388*100%=95.1%，平均成苗率为2240/2388*100%=93.8%；其中代号为2015-3的81-14-01×黄冠组合的发芽率最高，可达到447/458*100%=97.6%，同为81-14-01×黄冠组合代号为2015-1的发芽率次之，其值为96.7%，而代号为2015-4的翠玉×甘梨早8组合发芽率最低，但发芽率依然可以达到91%；成苗率最高的为代号为2015-3的81-14-01×黄冠组合，可达到449/458*100%=97.38%，成苗率最低的为代号为2015-4的翠玉×甘梨早8组合，其成苗率为88.44%，较为次之的为代号为2015-5的黄冠×甘梨早8组合，其成苗率为91.71%；由此可知采用本发明方法可以将梨杂交种子的发芽率提高到90%以上，其平均发芽率可达到95.1%，而其成苗率可以提高到88%以上，其平均成苗率可达到93.8%。
实施例证2：剥种皮处理对层积后梨杂交种子发芽率的影响。
2015年，采用组合为黄冠梨×早酥杂交种子200粒进行试验，在4℃下层积60天后，将种子随机分为2份，每份100粒，分别标记为A组、B组，A组统计层积后种子发芽数将所有种子直接播种，B组统计层积后种子发芽数，已发芽的直接播种，未发芽的在清水中浸泡2小时后剥去内外种皮再播种，15天后统计出苗情况（发芽率），统计数据见表2。
表2：2015年剥种皮处理对组合为黄冠梨×早酥杂交种子发芽数的影响
由表2可知，采用剥种皮处理的B组杂交种子其发芽率为95/100*100%=95%，而A组杂交种子其发芽率为64/100*100%=64%，可见，剥种皮处理对层积后的种子的发芽率有重要的影响，可使发芽率提高31%。
实施例证3：不同层积温度对梨杂交种子发芽率及成苗率的影响。
2015年，采用组合为黄冠梨×早酥杂交种子进行试验，分别在0℃、2℃、4℃、6℃、8℃五个温度梯度下恒温层积60天，分别处理种子，已发芽种子直接播种，未发芽种子剥去种皮再播种，15天后统计种子发芽率，二叶期用3%的甲霜•噁霉灵水剂500倍液灌根2次，四叶期移栽统计成苗率；统计数据见表3。
表3：不同层积温度对梨杂交种子发芽数及成苗数的影响
由表3可知，0℃时的种子发芽率为23/50*100%=46%，成苗率为22/50*100%=44%；2℃时的发芽率为92%，成苗率为92%；4℃时的发芽率为94%，成苗率为92%；6℃时的发芽率为90%，成苗率为88%；8℃时的发芽率为34%，成苗率为34%；由此可见，当层积温度为2~6℃时，可确保发芽率为90%以上，成苗率88%以上，其中2~4℃可确保成苗率和发芽率均达到90%以上；而当层积温度小于2℃或是大于6℃时，发芽率和成苗率呈断崖式的下降，由表3可知8℃时发芽率和成苗率最低。
综述，采用本发明的操作方法可以有效提高梨杂交种子的发芽率和成苗率；可以将梨杂交种子的发芽率提高到90%以上，而其成苗率可以提高到88%以上。
具体实施方式
一种提高梨杂交种子发芽率及成苗率的方法，包括如下步骤：
1) 杂交果实采摘及贮藏：
梨杂交果实充分成熟后采摘，放在储藏室内，放置时需分层摆放，室温保持在10~15℃，放置一个月让种子充分成熟；储藏室应阴凉通风、室温需严格保持在10~15℃之间，温度过高则易造成果实的腐烂，温度过低，则影响种子的成熟；果实采摘时避免损伤，摆放时需留有间隙，分层放置；
2) 剥取种子：
一月后剥取步骤1)中完全变成褐色或深褐色梨杂交果实的种子，并将表面的粘性物质清洗干净；取种时，需选取完全变成褐色或深褐色梨杂交果实的种子，其种子吸收营养充分、成熟，可进一步保障发芽率；
3) 种子层积：
将种子与干净湿细沙按1:4的比例混匀装入尼龙网袋，放入装有湿沙的塑料篮内，置冰箱冷藏，温度控制在2~6℃，定期补水保持沙子湿度手握成团而不滴水，含水量控制在3~4%，每周翻动种子袋一次，层积60天左右；为打破种子生理休眠，在2~6℃的冰箱中需冷藏层积60天左右，温度须严格控制在2~6℃，温度过高或过低都会影响种子的发芽率，同时应尽量保持恒温，恒温的温度可选择2℃~4℃；种子与干净湿细沙的混合比例为1:4，与常规的1:5相比较，减少了用沙量，而且操作时仅需每周翻动一次种子袋，无需多次翻动和混匀操作，减少了人工操作量，进一步为促进发芽率的提高提供保障；
4) 播种：
将层积好的种子取出，筛掉细沙，用水冲洗干净后将发芽种子和未发芽种子分开，发芽种子直接播种；未发芽种子先在清水中浸泡2小时，剥去种子外种皮及内种皮，注意不要伤及胚芽和子叶，播种到装有优质草炭土或育苗土的50目穴盘中，深度1cm；播种后洒透水，穴盘上盖无纺布保湿，5~7天洒一次水，一周后去除无纺布；为促进发芽及成苗，本发明对未发芽种子进行了人工干预，人工剥去种子外种皮及内种皮，并采用优质的草炭土或育苗土进行培养，通过无纺布保湿来减少洒水次数，操作也变得简便，可使穴盘内土壤温湿度相对恒定；
5) 苗期管理：
种子播种后7~10天出土，每2-3天视穴盘培养土墒情洒水1次，二叶期用3%的甲霜•噁霉灵水剂500倍液灌根1~2次，防止苗期立枯病发生，杂种实生苗四叶期时移入8cm×8cm的营养钵继续培育。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。