蓝莓种苗的脱毒繁育方法与流程

文档序号:12714318阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种蓝莓种苗的脱毒繁育方法,其特征在于步骤如下:

①、外植体的选择

选长势旺盛的幼嫩枝条,除去所有叶片,切取除顶芽外的第3~10节茎段作外植体;

②、外植体的灭菌

切取2~4cm带顶芽的幼嫩茎段,去叶片留叶柄,用清水洗干净,然后进行灭菌处理,灭菌后将茎段切成1~2个腋芽的小段;

③、初代培养

对外植体进行初代培养,所用基本培养基为:WPM+蔗糖+琼脂+激素;

④、继代培养

将丛生芽切割1~3cm茎段,每瓶接种4~5节,转入继代增殖培养基中继代增殖培养,3个月后观察实验情况,再进行继代增殖培养;

⑤、生根培养

在继代增殖培养基中生长的苗,一部分用以继续增殖,另外转入生根培养基进行生根培养;取1~3cm长的新梢接种到生根培养基上,接种后首先黑暗处理18~22天,然后转到光照下培养,30~40天可以移栽。

2.如权利要求1所述的一种蓝莓种苗的脱毒繁育方法,其特征在于:步骤②中的灭菌处理具体为:先用75%酒精浸泡25~35s,再用0.1%升汞溶液消毒7~10min,接着用无菌水冲洗3~5次,最后用滤纸吸去水分。

3.如权利要求1所述的一种蓝莓种苗的脱毒繁育方法,其特征在于:步骤③中所用基本培养基中蔗糖浓度为2~3%,琼脂浓度为0.60~0.65%,激素为0.5~5.0mg/L的6-BA(6-苄氨基嘌呤)、0.01~0.05mg/L的德卡林碱和0.05~0.25mg/L的NAA(萘乙酸)。

4.如权利要求1所述的一种蓝莓种苗的脱毒繁育方法,其特征在于:步骤③中初代培养的综合培养条件为:pH值为4.0~5.0,121℃、131kpa的条件下灭菌15~25min,培养温度为24~26℃,空气相对湿度为55~65%,光照强度为1200~1600lx,光照10~12h/d。

5.如权利要求1所述的一种蓝莓种苗的脱毒繁育方法,其特征在于:步骤⑤中生根培所用培养基为1/2WPM+NAA 0.15mg/L。

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