本发明涉及生物工程技术，尤其是涉及一种藏红花脱毒种球的生产方法。
背景技术：
藏红花又名西红花、番红花，属名贵紧缺中药材，因含有藏红花素而备受关注，被誉为世界上最贵的药用植物、世界上最好的染料、世界上最高档的香料。国家中医药管理局列为重点发展的中药材品种。近年来藏红花在医疗、保健、化工等方面的价值被全面开发，由于用量巨大，市场供不应求，主要依赖进口。藏红花为三倍体，不结实，所以采用无性繁殖，“种球”在繁殖过程中很容易感染植物病毒，一经染毒很难去除而且会越来越严重，极大降低了藏红花的产量和质量。经对现有技术的检索发现，藏红花脱毒后增产效果明显，但藏红花生长点剥离困难，另外微型种球的生长缓慢，这成为了限制藏红花脱毒技术大面积推广的一个瓶颈。
技术实现要素：
本发明的目的，就是为了解决上述问题，提供一种藏红花脱毒种球的生产方法。
为了达到上述目的，本发明采用了以下技术方案：一种藏红花脱毒种球的生产方法，包括如下步骤：
步骤一，用氯气对藏红花种球进行表面消毒，然后接种到生长培养基中；
步骤二，种球发芽后切取只带一个叶缘基的生长点进行脱毒处理，然后接种到生长培养基中成苗；
步骤三，生长点成苗后进行病毒检测；
步骤四，选择不带病毒的植株，继代到诱导培养基中，产生微型种球；
步骤五，将微型种球接种到含有扩繁培养基的生物反应器内扩繁；
步骤六，将扩繁后得到的微型种球放4℃保存备用。
所述生长培养基为添加1-2mg/L赤霉素和0.8-1.5mg/L 6-苄氨基嘌呤的MS培养基。
所述诱导培养基为添加10-15mg/L病毒唑的MS培养基。
所述微型种球的扩繁方法为：使用鼓泡式生物反应器进行连续培养。
所述种球的扩繁培养基为添加1-2.0mg/L 6-苄氨基嘌呤的MS培养基。
上述MS培养基为Murashige和Skoog(1962)公开的培养基，其中1/2MS培养基为大量元素减半的MS培养基。MS培养基在现有的生物以及农业等领域有着广泛的应用。
采用本发明的生产方法，藏红花脱毒效果好，脱毒材料繁殖速度快，在生产上有较大的应用价值。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步说明。
实施例的藏红花种子来自中国药科大学。
实施例所用MS培养基采用Murashige和Skoog(1962)公开的培养基，具体成分如表1所示。
表1
实施例：
步骤一，用75毫升次氯酸钠与25毫升浓盐酸生成的氯气对藏红花种球表面消毒20分钟后，接种到添加1mg/L赤霉素和1mg/L 6-苄氨基嘌呤的MS培养基中，获得无菌材料；
步骤二，种球发芽后切取带一个叶原基的生长点，接种到添加1mg/L赤霉素和1mg/L 6-苄氨基嘌呤的MS培养基中成苗；
步骤三，生长点成苗后用PCR和扫描电镜检测进行病毒检测；
步骤四，选择不带病毒的植株，转入添加15mg/L病毒唑的MS培养基生产微型种根；
步骤五，将扩繁后的微型种球接种到鼓泡式生物反应器内扩繁，扩繁培养基为添加1.5mg/L 6-苄氨基嘌呤的MS培养基；
本实施例中，12个种球表面消毒成功，生长点剥离后得到55个脱毒苗，诱导出的脱毒种球用5升的鼓泡式反应器进行扩繁，通气速率为0.3vvm。微球型根在反应器中27天内数量增加了两倍，并于4℃下保存6个月后发芽率达到100％。