本发明涉及一种植物生产领域，且特别涉及一种龙胆花的育苗方法及龙胆花的种植方法。
背景技术：
：龙胆花，别称：地胆头、龙胆草、观音草等。龙胆花大苦、大寒，中药苦味之中仅次于马钱子，胜于黄连，居第二位，多用败胃，且不易入口，佐以甘草，以调口味，常用于治疗顽固性偏头痛、头部湿疹、高血压、急性结膜炎、鼻炎等。因为龙胆花具有极佳的药用价值，市场上对龙胆花的需求量正在不断的增加，而仅靠采摘野生龙胆花满足市场的需求，不仅采摘量达不到需求，过度的采摘还会导致龙胆花的生存危险。再者，龙胆花生长在海拔较高地域，其生长的条件要求苛刻，人工育苗、栽培难度较大，又进一步导致了龙胆花的产量无法满足市场的需求。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种龙胆花的育苗方法，其将龙胆花的种子去皮后，人为的帮助种子完成了破皮的步骤，缩短了种子出芽的时间；在初代培养基中添加珍珠岩保证种子在初代培养基中能够进行良好的呼吸，并且使初代培养基的pH保持适宜酸度，更加有利于种子的出苗；EM菌使无菌苗更加壮实，增大存活率；在经过继代培养和生根培养后，得到的龙胆花幼苗，其从种子到幼苗的培养时间短，并且能够有效地提升出苗率和成活率。本发明的另一目的在于提供一种龙胆花的种植方法，将龙胆花的幼苗经过驯化之后，更容易适应种植环境，提高龙胆花幼苗的存活率，提升龙胆花的种植产量，满足市场的需求，减缓野生龙胆花的需求压力，在一定程度上避免了龙胆花的灭绝。本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。一种龙胆花的育苗方法，其是将龙胆花的种子浸泡于质量浓度为10％-20％的次氯酸钠溶液进行去皮，去皮之后用无菌水进行冲洗，得到去皮种子；将去皮种子接种到初代培养基中，进行初代培养，得到无菌苗；将无菌苗的子叶和下胚轴作为外植体，并接种于继代培养基中，进行继代培养，得到无根苗；将无根苗转植于生根培养基中，进行生根培养，得到龙胆花幼苗；初代培养的温度为15-25℃，光照强度为2000-3000lx，光照时间为10-12h，初代培养基为添加有珍珠岩以及质量浓度为0.1-0.5mg/L的吲哚乙酸、0.5-1mg/L的6-苄氨基腺嘌呤和0.01-0.05mg/L的EM菌的MS培养基。一种龙胆花的种植方法，其是按照上述龙胆花的育苗方法培育出龙胆花幼苗驯化，得到驯化苗；将驯化苗种植于大棚内，控制大棚内的光照时间为10-12h，光照强度为2000-3000lx，配合田间管理，至得到成熟的龙胆花。本发明实施例提供的龙胆花的育苗方法及龙胆花的种植方法的有益效果是：通过对龙胆花种子的去皮处理，加速龙胆花种子出芽的速率，且通过在初代培养基中添加珍珠岩，能够有利于种子的呼吸，同时又保证了初代培养基pH的适宜酸度，进一步加速种子的出芽；EM菌能够使无菌苗更加的壮实，增大无菌苗的存活率；在继代培养和生根培养的一系列组织培养的作用下，提升龙胆花种子的出苗率和存活率，并且增强龙胆花幼苗的适应能力；将龙胆花幼苗经过驯化之后再种植，能够进一步地提升龙胆花幼苗的存活率，增加龙胆花的产量，满足市场的需求，减少野生龙胆花的采摘量，避免龙胆花出现灭绝的危险。具体实施方式为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。下面对本发明实施例的龙胆花的育苗方法及龙胆花的种植方法进行具体说明。本发明实施例提供一种龙胆花的育苗方法，其是用次氯酸钠溶液对龙胆花的种子进行去皮，在去皮之后用无菌水进行冲洗，得到去皮种子；上述去皮种子经过初代培养、继代培养和生根培养之后，即可得到龙胆花幼苗。本发明实施例还提供一种龙胆花的种植方法，其是将上述的龙胆花幼苗经过驯化后，得到驯化苗；将驯化苗种植于大棚内，控制大棚内的光照时间为10-12h，光照强度为2000-3000lx，配合田间管理，至得到成熟的龙胆花。具体的，龙胆花的育苗方法和龙胆花的种植方法，依以下步骤进行：S1去皮步骤：将龙胆花的种子放入能够密封的容器中，比如：带瓶盖的PVC材质的塑料瓶，然后向装了种子的容器中倒入质量浓度为10％-20％的次氯酸钠溶液，将上述容器密封，用该质量浓度为10％-20％的次氯酸钠溶液浸泡种子5-10min。次氯酸钠溶液可以是种皮松软脱落，除了可以给种子去皮之外，还可以给种子消毒杀菌，保证在之后的组织培养过程能够成功的进行，保证了种子较高的出苗率。优选地，在进行浸泡的过程中，可以对上述装了种子和次氯酸钠溶液容器进行震荡，在震荡和次氯酸钠溶液的双重作用下，种子的外皮的松动程度会有所增加。进一步地，在上述容器中倒入次氯酸钠溶液之前，还可以在容器中放入若干个石子，当容器中注入了次氯酸钠溶液并开始震荡后，里面的石子也会随着振动力一起振动，石子和种子的碰撞中，可以使部分种皮更快的松动，便于之后的种皮完全除去的工作。具体地，浸泡完成之后，除去容器中的次氯酸钠溶液，并将浸泡完成的种子置于网筛中，一边用无菌水冲洗种子，一边将种子按压在网筛上进行揉搓，使种子的外皮快速的脱落，并在种子的外皮脱落后，继续用无菌水冲洗20-30min，得到去皮种子。用无菌水对用次氯酸钠溶液浸泡过的种子进行较长时间的冲洗，可以有效地避免次氯酸钠给种子带来损伤，保证较高的出芽率。更优选地，还可以将去皮完成的种子铺放在吸水纸上，并送入紫外杀菌箱进行紫外诱发，上述紫外诱发的紫外线波长例如为250-254nm，紫外诱发的时间控制为2-3h。通过上述紫外诱发，不仅可以进一步给去皮种子除菌消毒，还可以进一步地提高种子的出苗率。S2初代培养:将去皮的种子接种于初代培养基上，进行初代培养，得到无菌苗。上述初代培养基是在MS培养基中添加珍珠岩以及质量浓度为0.1-0.5mg/L的吲哚乙酸(IAA)、0.5-1mg/L的6-苄氨基腺嘌呤(GA3)、0.01-0.05mg/L的EM菌制备得到的，上述珍珠岩的添加量为每1L的上述MS培养基中添加10-20g，且该珍珠岩的粒径为6-8mm；上述的MS培养基为市售的含蔗糖和琼脂的MS培养基。吲哚乙酸能够刺激形成层细胞的分裂，刺激枝的细胞伸长，抑制根的细胞生长，调节愈伤组织的形态建成，添加于MS培养基中能够促进去皮种子快速的出芽，并且提升去皮种子的出芽率，但是对添加的吲哚乙酸的量的把握很重要，如果添加的吲哚乙酸的量过多反而会抑制种子的出芽；6-苄氨基腺嘌呤能够提高分化和抗逆性，促进种子的出芽，在MS培养基中添加的6-苄氨基腺嘌呤的量大于吲哚乙酸的量能够进一步地促进去皮种子的出芽；EM菌中包括了芽孢菌、酵母菌和乳酸菌等有益菌类，能够增强植物的新陈代谢，促进无菌苗更加壮实，提高存活率；添加于培养基中的珍珠岩，能够给接种于培养基的种子提供足够的氧气，保证种子接种于培养基中能够进行足够的呼吸，如果种子无法进行正常的呼吸作用，也会导致萌芽率的降低，还能够保持初代培养基的pH酸度，进一步促进种子的萌芽。吲哚乙酸、6-苄氨基腺嘌呤和EM菌的混合使用时，每种物质对种子萌芽率的影响力均得到了提升，并增大无菌苗的存活率，使去皮种子的萌芽率得到进一步地提升。初代培养时的培养温度为15-25℃，光照强度为2000-3000lx，光照时间为10-12h，且培养时的环境湿度为55％-75％。因为龙胆花的生长对湿度和光照的条件要求较高，所以在进行初代培养时为了能够提高种子的出芽率，将培养的条件调控成符合其生长的气候条件，即初代培养时的温度温暖，光照较弱，光照时间较长，环境湿度较高，提升种子的萌芽率。S3继代培养:将初代培养后，得到的无菌苗的子叶和下胚轴作为外植体接种于继代培养基中，进行继代培养，得到无根苗。其是将初代培养的无菌苗的子叶切去叶尖，留下叶柄，并将叶柄切成0.3cm×0.3cm的小块；将无菌苗的下胚轴切成0.3cm的小段；将上述的子叶块和下胚轴段接种于继代培养基上，进行继代培养。将从种子发育出来的无菌苗的子叶和下胚轴切分之后再次培养，能够有效地加大龙胆花幼苗的产量，使一颗种子就可以培育出多颗优质的种苗，大大地提升幼苗的产量。继代培养的培养基例如可以是在MS培养基中加入质量浓度为0.1-0.5mg/L的6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、1-1.5mg/L的赤霉素(GA3)和0.5-1mg/L的吲哚乙酸(IAA)后得到的，其中，上述MS培养基是市售的含蔗糖和琼脂的MS培养基。6-苄氨基腺嘌呤能够促进细胞分裂、促进细胞增大增肥、促进茎叶的伸长生长、抑制老化、提高植物的抗损伤能力等，在外植体的培养中，添加6-BA能够有效地提升外植体的分化和抗逆性，既可以提高外植体的出苗率；IAA能够刺激形成层细胞的分裂，刺激枝的细胞伸长，抑制根的细胞生长，调节愈伤组织的形态建成，添加于MS培养基中能够促进快速形成无根苗，提升出苗率；GA3加速细胞分裂，促进茎、叶的伸长生长，加速了无根苗的生长。在上述三种植物激素的作用下，能够协同作用于外植体的出苗，进一步地提升外植体的出苗率。继代培养的培养温度优选为15-25℃，光照强度为2000-3000lx，光照时间为10-12h，以及培养的环境湿度为55％-75％，其温度、光照条件和环境湿度接近龙胆花的原产地的温暖、弱光、较湿润的环境条件，能够保证外植体的出苗率，并且提升外植体培育出的无根苗的抗性，使无根苗的长势更强，生存率更高。S4生根培养：将继代培养得到的无根苗转植于生根培养基中，进行生根培养，直到得到龙胆花幼苗。继代培养是在MS培养基中加入质量浓度为1-1.5mg/L的萘乙酸(NAA)和0.5-1mg/L的激动素(KT)后得到的，上述MS培养基同样为市售的含有蔗糖和琼脂的MS培养基。NAA是一种促进植物根系生长的植物生长调节剂，具有促进细胞分裂与扩大的作用，能够使无根苗快速的长出不定根。KT不仅可以促进细胞分裂，还可以诱导芽的分化和发育以及增加气孔开度，从而提升植物吸取二氧化碳，增加植物的光合作用，以便有更多的养分促进无根苗的生长和发根。生根培养时的温度为15-25℃，且在无根苗长出根之前，进行遮光处理，有利于无根苗的生根，生根培养时环境湿度为55％-75％；同时，较低的温度和湿度条件接近龙胆花原产地的海拔较高的环境，不仅有利于无根苗的生根，还可以提升苗的抗逆性，增加幼苗的存活率。S5龙胆花的种植：按照上述方法培育出的龙胆花幼苗经过驯化之后，得到驯化苗，再将驯化苗种植于大棚内，通过一系列田间管理，得到成熟的龙胆花。上述的驯化是指，将龙胆花幼苗种植于光照培养箱中，将光照强度设置为2000-3000lx，且光照时间为10-12h，幼苗在光照培养箱中的整个培育期中，光照培养箱的湿度以1h为间隔，交替按70％和50％设置。通过对幼苗进行高湿度环境和低湿度环境交替栽培的抗性训练，使龙胆花能够同时适应低海拔地区的湿度相对较高的生长环境和高海拔地区的湿度相对较低的生长环境，进一步提升龙胆花幼苗进入大棚种植后的存活能力。而上述的光照条件接近龙胆花原产地的光照条件，保证龙胆花幼苗的旺盛生长势，提升移栽幼苗的存活率，也促使龙胆花的幼苗能够更好的适应不同湿度的抗性训练。经过了不同湿度下的抗性训练后的龙胆花在移栽于大棚之后其存货率更高，从而提升龙胆花的产量。龙胆花在大棚中种植时，光照强度优选设置为2000-3000lx，光照时间为10-12h，并可以配合使用农家肥、除杂草等工作，使龙胆花能够更加旺盛的生长，其产量能够得到提升。以下结合实施例对本发明的龙胆花的育苗方法和龙胆花的种植方法作进一步的详细描述。实施例1将龙胆花种子装入PVC塑料瓶中，并在上述PVC塑料瓶中放入少量石子，然后注入质量浓度为10％次氯酸钠溶液，盖紧瓶盖，浸泡并震荡10min后，将次氯酸钠溶液除去，将瓶中的种子，倒入网筛中，用无菌水冲洗，一边冲洗一边将种子按压在网筛上揉搓，直到将种皮全部除去，并继续用无菌水冲洗20min。将吸干水的去皮的种子放入紫外杀菌箱中，在250nm的波长下处理3h。将去皮种子接种于含有0.1mg/L吲哚乙酸、0.5mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.05mg/L的EM菌和10g、大小为6mm的珍珠岩的初代培养基中，在温度为25℃、光照强度为2000lx、光照时间为10h和湿度为55％的条件下进行培养，直到得到无菌苗。将无菌苗的子叶切分成0.3cm×0.3cm的小块、下胚轴切成0.3cm的小段分别接种于含有0.1mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、1mg/L赤霉素和0.5mg/L吲哚乙酸的继代培养基中，在温度为15℃、光照强度为2000lx、光照时间为12h以及培养的环境湿度为55％条件下培养，直到得到无根苗。将无根苗转接于含有1mg/L的萘乙酸和0.5mg/L的激动素的生根培养基中，在温度为15℃，环境湿度为55％，遮光的条件下进行培养，直到得到龙胆花幼苗。将龙胆花幼苗栽培于光照培养箱中，光照强度为2000lx，光照时间为12h，并且光照培养箱的湿度以1h为间隔，交替按照70％和50％设置，直到得到驯化苗。将驯化苗种植于大棚内，保证大棚内的光照强度达到2000lx，光照时间达到10h，并配合施用农家肥和除草等工作种植出成熟的龙胆花。实施例2将龙胆花种子装入PVC塑料瓶中，并在上述PVC塑料瓶中放入少量石子，然后注入质量浓度为20％次氯酸钠溶液，盖紧瓶盖，浸泡并震荡5min后，将次氯酸钠溶液除去，将瓶中的种子，倒入网筛中，用无菌水冲洗，一边冲洗一边将种子按压在网筛上揉搓，直到将种皮全部除去，并继续用无菌水冲洗30min。将吸干水的去皮的种子放入紫外杀菌箱中，在254nm的波长下处理2h。将去皮种子接种于含有0.5mg/L吲哚乙酸、1mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.01mg/L的EM菌和20g、大小为8mm的珍珠岩的初代培养基中，在温度为15℃、光照强度为3000lx、光照时间为12h和湿度为75％的条件下进行培养，直到得到无菌苗。将无菌苗的子叶切分成0.3cm×0.3cm的小块、下胚轴切成0.3cm的小段分别接种于含有0.5mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、1.5mg/L赤霉素和1mg/L吲哚乙酸的继代培养基中，在温度为25℃、光照强度为3000lx、光照时间为10h以及培养的环境湿度为75％条件下培养，直到得到无根苗。将无根苗转接于含有1.5mg/L的萘乙酸和1mg/L的激动素的生根培养基中，在温度为25℃，环境湿度为75％，遮光的条件下进行培养，直到得到龙胆花幼苗。将龙胆花幼苗栽培于光照培养箱中，光照强度为3000lx，光照时间为10h，并且光照培养箱的湿度以1h为间隔，交替按照70％和50％设置，直到得到驯化苗。将驯化苗种植于大棚内，保证大棚内的光照强度达到3000lx，光照时间达到12h，并配合施用农家肥和除草等工作种植出成熟的龙胆花。实施例3将龙胆花种子装入PVC塑料瓶中，并在上述PVC塑料瓶中放入少量石子，然后注入质量浓度为15％次氯酸钠溶液，盖紧瓶盖，浸泡并震荡6min后，将次氯酸钠溶液除去，将瓶中的种子，倒入网筛中，用无菌水冲洗，一边冲洗一边将种子按压在网筛上揉搓，直到将种皮全部除去，并继续用无菌水冲洗25min。将吸干水的去皮的种子放入紫外杀菌箱中，在252nm的波长下处理2.5h。将去皮种子接种于含有0.3mg/L吲哚乙酸、0.8mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.03mg/L的EM菌和15g、大小为7mm的珍珠岩的初代培养基中，在温度为20℃、光照强度为2500lx、光照时间为11h和湿度为65％的条件下进行培养，直到得到无菌苗。将无菌苗的子叶切分成0.3cm×0.3cm的小块、下胚轴切成0.3cm的小段分别接种于含有0.3mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、1.2mg/L赤霉素和0.8mg/L吲哚乙酸的继代培养基中，在温度为20℃、光照强度为2500lx、光照时间为11h以及培养的环境湿度为65％条件下培养，直到得到无根苗。将无根苗转接于含有1.2mg/L的萘乙酸和0.7mg/L的激动素的生根培养基中，在温度为20℃，环境湿度为65％，遮光的条件下进行培养，直到得到龙胆花幼苗。将龙胆花幼苗栽培于光照培养箱中，光照强度为2500lx，光照时间为11h，并且光照培养箱的湿度以1h为间隔，交替按照70％和50％设置，直到得到驯化苗。将驯化苗种植于大棚内，保证大棚内的光照强度达到2500lx，光照时间达到11h，并配合施用农家肥和除草等工作种植出成熟的龙胆花。实施例4将龙胆花种子装入PVC塑料瓶中，并在上述PVC塑料瓶中放入少量石子，然后注入质量浓度为16％次氯酸钠溶液，盖紧瓶盖，浸泡并震荡9min后，将次氯酸钠溶液除去，将瓶中的种子，倒入网筛中，用无菌水冲洗，一边冲洗一边将种子按压在网筛上揉搓，直到将种皮全部除去，并继续用无菌水冲洗24min。将吸干水的去皮的种子放入紫外杀菌箱中，在251nm的波长下处理2.2h。将去皮种子接种于含有0.2mg/L吲哚乙酸、0.8mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.02mg/L的EM菌和12g、大小为6mm的珍珠岩的初代培养基中，在温度为18℃、光照强度为2700lx、光照时间为12h和湿度为68％的条件下进行培养，直到得到无菌苗。将无菌苗的子叶切分成0.3cm×0.3cm的小块、下胚轴切成0.3cm的小段分别接种于含有0.2mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、1.3mg/L赤霉素和0.8mg/L吲哚乙酸的继代培养基中，在温度为22℃、光照强度为2700lx、光照时间为11.5h以及培养的环境湿度为68％条件下培养，直到得到无根苗。将无根苗转接于含有1.4mg/L的萘乙酸和0.7mg/L的激动素的生根培养基中，在温度为22℃，环境湿度为68％，遮光的条件下进行培养，直到得到龙胆花幼苗。将龙胆花幼苗栽培于光照培养箱中，光照强度为2700lx，光照时间为12h，并且光照培养箱的湿度以1h为间隔，交替按照70％和50％设置，直到得到驯化苗。将驯化苗种植于大棚内，保证大棚内的光照强度达到2700lx，光照时间达到12h，并配合施用农家肥和除草等工作种植出成熟的龙胆花。比较实施例1、实施例2、实施例3、实施例4和对照组1的初代培养出芽率，其中对照组1的处理方式和实施例类似，唯一不同之处在于，对照组1的初代培养基中没有添加EM菌。无菌苗的存活率＝(无菌苗的数量/种子的数量)×100％，上述5组处理均按照100颗种子计算。对比结果见表1。表1种子的出苗率组号实施例1实施例2实施例3实施例4对照组1出苗率90％93％91％89％68％根据对比结果可知，经过去皮处理的4组实施例的出苗率明显高于未进行去皮处理的对照组1。说明在进行育苗时，在初代培养基中添加了EM菌，能够明显的提高无菌苗的存活率。比较实施例1、实施例2、实施例3、实施例4和对照组2的初代培养出芽率，其中对照组2的处理方式和实施例类似，唯一不同之处在于，初代培养基中未添加珍珠岩。出苗率＝(无菌苗的数量/种子的数量)×100％，上述5组处理均按照100颗种子计算。对比结果见表2。表2种子的出苗率组号实施例1实施例2实施例3实施例4对照组2出苗率90％93％91％89％72％根据对比结果可知，在初代培养基中添加了珍珠岩种子的出苗率高于未添加珍珠岩的对照组2。说明在初代培养基中添加了珍珠岩能够有利于种子的呼吸作用，提高出苗率。比较实施例1、实施例2、实施例3、实施例4和对照组3的幼苗种植存活率，其中对照组3的处理方式和实施例类似，唯一不同之处在于，在将幼苗种植于大棚之前没有进行不同环境湿度的训练。存活率＝(移栽存活的苗数量/总的移栽数量)×100％，上述5组处理均按照100颗幼苗计算。对比结果见表3。表3幼苗的存活率组号实施例1实施例2实施例3实施例4对照组3存活率88％89％91％93％64％根据对比结果可知，4组实施例的幼苗在大棚中的存活率比对照组3的存活率高，说明在将幼苗移栽至大棚前进行不同湿度的训练，能够提升幼苗移栽的存活率。综上所述，本发明实施例的龙胆花的育苗方法和龙胆花的种植方法，通过对龙胆花种子的去皮处理，加速龙胆花种子出芽的速率，并通过在初代培养基中添加珍珠岩，能够有利于种子的呼吸，并且保持初代培养基pH的酸度，进一步加速种子的出芽；EM菌能够使无菌苗更加的壮实，增大无菌苗的存活率；并在继代培养和生根培养的一系列组织培养的作用下，提升龙胆花种子的出苗率和存活率，并且增强龙胆花幼苗的适应能力；将龙胆花幼苗经过驯化之后再种植，能够进一步地提升龙胆花幼苗的存活率，增加龙胆花的产量，满足市场的需求，减少野生龙胆花的采摘量，避免龙胆花出现灭绝的危险。以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。当前第1页1 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