本发明涉及一种植物种子休眠解除的技术，具体涉及一种促进滇重楼种子发芽的方法。
背景技术：
滇重楼Paris polyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.是2015版《中华人民共和国药典》收载的重楼药材的基原植物之一，以其根茎入药，具有清热解毒，消肿止痛，凉肝定惊等功效，是云南白药、宫血宁、夺命丹等中成药的主要原料之一。
滇重楼果期为9-11月，当果实开裂，种子外种皮由橙色逐渐变为深红色时种子成熟，但成熟种子的胚发育不完全，没有明显的分化，处于球形胚阶段，是典型的休眠种子。滇重楼种子休眠期较长，自然条件下需要两冬一夏才能完成形态学后熟和生理学后熟。重楼药材的人工栽培以种子繁殖为主，由于种子休眠程度高、萌发速率慢、发芽率低等原因导致生产上出苗困难、种子种苗成本费用高，阻碍了重楼种植的大面积推广。为了提高滇重楼种子发芽速度和发芽率，前人已发明了一批专利技术，如：在种子处理剂方面，赤霉素、钨酸钠以及百菌清等处理重楼种子后发芽率可达95％以上(申请号CN201310707971)，赤霉素、萘乙酸、6-苄氨基嘌呤、滇重楼寡糖素等培养重楼种子可促进重楼种子萌发和芽增殖生长(申请号CN98118955.5)；在种子物理处理措施方面，温汤浸种和种皮伤害(申请号CN103222362A)、低温层积(申请号CN201210348005)、变温层积(申请号CN200910084213)、干湿交替刺激(申请号CN200810058414)、电压刺激(申请号CN201210183202)等可打破休眠，促进种子萌发。但尚未见赤霉素浸种、超声波刺激、干湿交替刺激、变温层积等共同作用能促进重楼种子发芽的方法报道。
技术实现要素：
本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种促进重楼种子发芽的方法。
为此，本发明提供的技术方案为：
一种促进重楼种子发芽的方法，包括如下步骤：
步骤一、取重楼种子，用质量体积浓度为0.1-0.5％的赤霉素溶液于温度20-30℃浸泡；
步骤二、对经过赤霉素浸泡后的重楼种子进行超声处理；
步骤三、将经过超声处理的重楼种子进行回干处理；
步骤四、将经过回干处理的重楼种子进行变温层积处理，首先于温度5℃恒温条件下层积一段时间，之后于25℃恒温条件下层积一段时间，最后再于5℃恒温条件下层积一段时间。
优选的是，所述的促进重楼种子发芽的方法中，所述步骤一中，用所述赤霉素溶液浸泡所述重楼种子6小时，所述重楼种子与所述赤霉素溶液的质量体积比为1:2～3。
优选的是，所述的促进重楼种子发芽的方法中，所述步骤四中，所述一段时间为1个月。
优选的是，所述的促进重楼种子发芽的方法中，所述步骤四中，进行所述变温层积处理之前，还包括如下步骤：
4.1)使用所述赤霉素溶液浸泡珍珠岩至其吸收水分充足；
4.2)取浸泡过的珍珠岩与经过回干处理的重楼种子按照体积比3:1混匀，置于塑料自封袋或整理箱内，并密封，之后进行所述变温层积处理。
优选的是，所述的促进重楼种子发芽的方法中，所述赤霉素溶液需要即时配置。
优选的是，所述的促进重楼种子发芽的方法中，所述步骤二中，所述超声处理的具体步骤包括：
将赤霉素溶液浸泡后的种子置于超声波清洗器内，以40KHz、200-300W的工作功率超声处理10分钟，间隔30min后再以200-300W的工作功率超声处理10分钟，重复处理2-3次，超声处理的总时间为20-30分钟。
优选的是，所述的促进重楼种子发芽的方法中，所述步骤三中，所述回干处理的具体步骤包括：
将经过超声处理的重楼种子，沥干，摊放于温度20-25℃和相对湿度70-80％的室内环境下2-3天，期间不断翻动。
优选的是，所述的促进重楼种子发芽的方法中，所述步骤四中，在所述变温层积过程中，定期补充水分，保持所述珍珠岩水分充足。
优选的是，所述的促进重楼种子发芽的方法中，在所述步骤一之前，还包括如下步骤：
重楼种子采集和净选：每年9-11月分批采集重楼成熟蒴果，趁鲜搓去鲜红色多浆汁的外种皮，清水漂洗除去漂浮于水面的种皮、杂质及空瘪籽，得到所述重楼种子。
本发明至少包括以下有益效果：
第一，通过本发明处理后的滇重楼种子，置于光照培养箱内(温度25℃、8小时光照/16小时黑暗)作发芽培养，1个月后发芽率为24％，2个月后发芽率为86％。第二，本发明结合了赤霉素浸种、超声波刺激、干湿交替刺激、变温层积等多方面的有益刺激，有效的打破了种子休眠，极大的加快了种子后熟进程，缩短了重楼种子萌发所需时间。第三，通过本发明处理后的种子，发芽试验得出种子快速发芽期是播种后的第2个月，发芽率从24％迅速增加到86％，提高了出苗整齐度。第四，通过本发明处理后的种子，作发芽试验鉴定正常幼苗和非正常幼苗得率，正常幼苗数占发芽种子数的95％，极大的提高了重楼种苗质量。第五，本发明方法操作简单、易于推广。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
本发明提供一种促进重楼种子发芽的方法，包括如下步骤：
步骤一、取重楼种子，用质量体积浓度为0.1-0.5％的赤霉素溶液于温度20-30℃浸泡；
步骤二、对经过赤霉素浸泡后的重楼种子进行超声处理；
步骤三、将经过超声处理的重楼种子进行回干处理；
步骤四、将经过回干处理的重楼种子进行变温层积处理，首先于温度5℃恒温条件下层积一段时间，之后于25℃恒温条件下层积一段时间，最后再于5℃恒温条件下层积一段时间。
在本发明的其中一个实施例中，作为优选，所述步骤一中，用所述赤霉素溶液浸泡所述重楼种子6小时，所述重楼种子与所述赤霉素溶液的质量体积比为1:2～3。
在本发明的其中一个实施例中，作为优选，所述步骤四中，所述一段时间为1个月。
在本发明的其中一个实施例中，作为优选，所述步骤四中，进行所述变温层积处理之前，还包括如下步骤：
4.1)使用所述赤霉素溶液浸泡珍珠岩至其吸收水分充足；
4.2)取浸泡过的珍珠岩与经过回干处理的重楼种子按照体积比3:1混匀，置于塑料自封袋或整理箱内，并密封，之后进行所述变温层积处理。
在本发明的其中一个实施例中，作为优选，所述赤霉素溶液需要即时配置。
在本发明的其中一个实施例中，作为优选，所述步骤二中，所述超声处理的具体步骤包括：
将赤霉素溶液浸泡后的种子置于超声波清洗器内，以40KHz、200-300W的工作功率超声处理10分钟，间隔30min后再以200-300W的工作功率超声处理10分钟，重复处理2-3次，超声处理的总时间为20-30分钟。
在本发明的其中一个实施例中，作为优选，所述步骤三中，所述回干处理的具体步骤包括：
将经过超声处理的重楼种子，沥干，摊放于温度20-25℃和相对湿度70-80％的室内环境下2-3天，期间不断翻动。
在本发明的其中一个实施例中，作为优选，所述步骤四中，在所述变温层积过程中，定期补充水分，保持所述珍珠岩水分充足。
在本发明的其中一个实施例中，作为优选，在所述步骤一之前，还包括如下步骤：
重楼种子采集和净选：每年9-11月分批采集重楼成熟蒴果，趁鲜搓去鲜红色多浆汁的外种皮，清水漂洗除去漂浮于水面的种皮、杂质及空瘪籽，得到所述重楼种子。
实施例1
2015年10月16日采集云南省文山市小街镇重楼种植基地的成熟滇重楼果实，随即搓去种皮，水漂去空瘪籽粒和种皮，沥干得净种子。取净种子100g(约2000粒)，置于500mL玻璃三角瓶内，加0.1％(质量分数)的赤霉素溶液200mL在室温下浸泡6小时。将种子连同三角瓶置于超声波清洗器内(上海早盈精密清洗机械有限公司，型号ZY-1004，超声波功率240W，超声波频率40KHz)超声处理10分钟，间隔半小时后再超声处理10分钟。取出三角瓶，滤去赤霉素溶液，将种子摊放于20-25℃、相对湿度70-80％的室内环境下阴干3天，不定时翻动种子使种子表面无明显水分痕迹。将600mL珍珠岩用现配的0.1％(质量分数)赤霉素溶液浸透，然后与100g种子混匀，装入塑料自封袋内(透明型，长12cm，宽17cm)，密封。将装有种子的自封袋置于5℃冰箱内保存1个月，取出转移至25℃光照培养箱内保存1个月(期间补充水分1次)，再转移至5℃冰箱内保存1个月。
依照上述方法，重楼种子的1个月后发芽率为23％，2个月后发芽率为82％，出苗整齐度高，正常幼苗数占发芽种子数的90.5％。
实施例2
赤霉素浸种时所用浓度为0.5％(质量分数)，赤霉素溶液浸泡珍珠岩时所用浓度为0.5％(质量分数)，其余操作流程及参数与实施例1相同。
依照上述方法，重楼种子的1个月后发芽率为22.8％，2个月后发芽率为81.5％，出苗整齐度高，正常幼苗数占发芽种子数的90％。
实施例3
超声波处理种子的次数为3次，总超声处理时间为30分钟，其余操作流程及参数与实施例1相同。
依照上述方法，重楼种子的1个月后发芽率为23％，2个月后发芽率为86％，出苗整齐度高，正常幼苗数占发芽种子数的95％。
实施例4
种子来源为2015年10月25日采集自云南省大理白族自治州弥渡县弥城镇滇重楼种植基地的滇重楼种子，其余操作流程及参数与实施例1相同。
依照上述方法，重楼种子的1个月后发芽率为24％，2个月后发芽率为85.5％，出苗整齐度高，正常幼苗数占发芽种子数的94.5％。
实施例5
一种促进重楼种子发芽的方法，包括如下步骤：
(1)9-11月，当滇重楼果实开裂，种子外种皮由橙色逐渐变为深红色时，采集成熟蒴果；
(2)趁鲜搓去外种皮，水选除去杂质、外种皮和空瘪籽，得到净种子；
(3)将净种子用现配的0.3％(质量分数)赤霉素溶液在25℃条件下浸泡后6小时，每100g净种子用赤霉素250mL。
(4)将赤霉素浸泡后的种子置于超声波清洗器内，以250W的工作功率超声处理10分钟，间隔半小时后再超声处理10分钟，重复3次，一共超声处理30分钟。
(5)将超声处理后的种子沥干，在22.5℃、相对湿度75％的室内环境阴干2.5天至种子表面无明显水分痕迹。
(6)珍珠岩用现配的0.3％(质量分数)赤霉素溶液浸透后，与种子按体积比3:1混合均匀，装入塑料自封袋或整理箱内，密封。
(7)将自封袋或整理箱置于5℃冰箱内层积1个月。
(8)将自封袋或整理箱转入25℃光照培养箱内层积1个月，定期补充水分，保持珍珠岩水分充足。
(9)将自封袋或整理箱转入5℃冰箱内层积1个月。
依照上述方法，重楼种子的1个月后发芽率为24％，2个月后发芽率为86％，出苗整齐度高，正常幼苗数占发芽种子数的95％。
如上所述，根据本发明，重楼种子的1个月后发芽率为24％，2个月后发芽率为86％，出苗整齐度高，正常幼苗数占发芽种子数的95％。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节。