一种东南景天的水培漂浮育苗方法与流程

本发明属于植物繁殖与育苗领域，涉及一种东南景天的水培漂浮育苗方法。

背景技术：

近年来土壤镉污染日益严重，土壤中的镉通过食物链进入人体，危害人体健康。如何治理和减轻土壤中的镉污染，成为目前急需解决的问题。植物修复是利用重金属超积累或富集植物治理土壤重金属污染的一种比较有环保前途的方式，具有费用低廉、无继发污染、节约土地资源、环境友好、可持续发展等优点。东南景天(sedumalfrediihance)是在我国浙江省衢州市一个古老的铅锌矿上首次发现的一种锌、镉超积累植物、铅富集植物，近年来广泛用于重金属污染土壤的植物修复。然而，大规模的植物修复需要大量东南景天种苗，作为是一种野生植物，东南景天的人工繁殖技术一直以来是科研工作者关心的问题。东南景天是一种景天科景天属的多年生被子植物，生命力强，既可以有性繁殖，又可以无性繁殖，广泛分布于我国华中、华南和华东地区。

现有专利cn101057542a公开了一种东南景天的有性繁殖方法，该方法涉及种子采收、种子保存、种子发芽以及幼苗管理等技术。虽然该方法解决了一定的问题，比如保存了东南景天种质资源，然而作为一种以无性繁殖为主的植物，东南景天的有性繁殖技术具有种子难采集，育苗时间长，后代对重金属积累能力退化等缺点。同时，现有专利cn1973617a和cn101444185a公开了一种重金属超积累植物东南景天的无性繁殖方法，该方法涉及东南景天叶片愈伤组织诱导分化技术、茎尖组织快繁技术和茎段扦插技术等技术。这些方法虽然能获得大量种苗，但是基于植物组织培养技术的无性繁殖方法具有成本高、育苗时间长、幼苗移栽成活率低等缺点；用育苗基质或有机基质或营养液的茎段扦插技术具有育苗成本高、运输不便、耗时耗力等缺点，难以满足大规模工厂化育苗的需要。

技术实现要素：

为解决现阶段国内大规模的植物修复需要短期快速地获得大量东南景天种苗的现实需求，本发明提供一种东南景天的水培漂浮育苗方法。

一种东南景天的水培漂浮育苗方法，包括如下步骤：

(1)采集当年生、无病虫害的东南景天地上部枝条，剪成插穗，于阴凉通风处放置使其伤口愈合；

(2)将伤口愈合后的插穗下半部分于促生液中浸泡后扦插在带孔的泡沫板上，所述泡沫板漂浮于清水中，使插穗的下半部分于清水接触、上半部分与空气接触，，所述促生液为生长素溶液或植物促生菌菌液；

(3育苗期间定期更换清水，待根系长至5cm后，即可用于移栽。

本发明方法方法不受季节限制，高度集约化，单位面积出苗多，出苗快，产业化前景好，实现了工厂化大规模育苗，可以短期快速为土壤重金属修复提供大量种苗；种苗根系发育较好，种苗较茁壮，无杂草，无土传病虫害，移栽成活率较高；节约苗床，节省了人力物力。

优选地，步骤(1)中所述插穗的长度为5～6cm，阴凉通风处的放置时间为20～25小时。进一步优选地，阴凉通风处的放置时间为24小时。

优选地，所述生长素溶液中的生长素为吲哚乙酸。所述吲哚乙酸是一种能促进植物生根发芽的物质，在植物体内普遍存在。

优选地，所述生长素溶液中吲哚乙酸的浓度为0.5～2μm；进一步优选为0.8～1.2μm；最优选为1μm。

生长素溶液的制备方法(以1μm浓度为例)：称取1.7519g生长素，溶于1l清水，加少量氢氧化钠帮助其溶解，将此生长素溶液稀释1万倍，此时溶液浓度为1μm，备用。

优选地，所述植物促生菌菌液中的植物促生菌为保藏号为cgmccno.12173的荧光假单胞杆菌(pseudomonasfluorescens)sasm05。

本发明使用的植物促生菌为sasm05是从东南景天体内分离得到的一种可以分泌生长素并且促进植物生长的有益细菌，属于荧光假单胞杆菌(pseudomonasfluorescens)，已保藏到中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：cgmccno.12173，且已在公开号为cn105950502a的专利申请文献中公开。

进一步优选地，所述植物促生菌菌液中植物促生菌的浓度以od600为0.5～1.5进行配制；进一步优选为od600＝1.0。

植物促生菌菌液的制备方法(以od600＝1.0为例)：在超净工作台上吸取1ml保存的菌种注入50mllb液体培养基(每1l含：氯化钠10g，酵母粉5g，蛋白胨10g，ph为7.2)，封口后于150rpm、35℃摇床培养24h，将菌液于5000rpm离心15分钟得到沉淀，用清水溶解沉淀并稀释至od600＝1.0备用。

优选地，插穗在促生液中的浸泡时间为3～5小时；进一步优选地，浸泡4小时。

优选地，在促生液中浸泡时，每35～45支一捆进行浸泡；更进一步优选地，每40支一捆进行浸泡。

优选地，所述插穗在泡沫板上的扦插行株距为(3～5)×(3～5)cm；进一步优选为4×4cm。

所述泡沫板采用30×20×0.5cm带孔泡沫板，所述泡沫板漂浮于装满清水的塑料方框里，每框40支插穗。

优选地，育苗期间每3～5天更换一次清水；进一步优选地，育苗期间每4天更换一次清水。

待根系长到5cm之后(约14天)，将种苗移出水体，于阴凉通风处放置24小时后即可移栽。

更进一步优选地，本发明方法将东南景天枝条剪成5-6cm的插穗，插穗放置一天后在促生液(iaa或sasm05)里浸泡4小时，然后把浸泡过促生液和没有浸泡过促生液的插穗分别扦插在泡沫板上，泡沫板漂浮在清水上，四天换一次清水，14天后根系长到5cm左右即可移栽；最优选地，所述促生液为sasm05。

与现有方法相比，本发明具有如下有益效果：

1)本发明育苗不受季节限制，高度集约化，单位面积出苗多，出苗快，产业化前景好，实现了工厂化大规模育苗，可以短期快速为土壤重金属修复提供大量种苗；

2)本发明使用水培漂浮育苗方式繁殖东南景天种苗，根系不受土壤或育苗基质限制，根系发育好，根冠比大，种苗茁壮，无杂草，无土传病虫害，移栽成活率高；

3)本发明使用水培漂浮育苗方式繁殖东南景天种苗，节约苗床，起苗、运苗、移栽简化，节省了人力物力，此方法便于在实际生产当中应用。

附图说明

图1是本发明东南景天水培漂浮育苗流程图。

图2是水培14天时候实施例1～3的东南景天根系生长和发育对比图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明：

实施例一，水培漂浮育苗

1)采集当年生、无病虫害的东南景天地上部枝条，剪成5-6cm的插穗，于阴凉通风处放置24小时，使其伤口愈合。

2)把放置后的插穗按4×4cm行株距扦插在30×20×0.5cm带孔的泡沫板上，泡沫板漂浮在30×20×10cm装满清水的塑料方框里，使插穗下半部分与清水接触，上半部分与空气接触，每框40支插穗。

3)育苗期间四天换一次清水，待根系长到5cm之后(约14天)，将种苗移出水体，于阴凉通风处放置24小时后即可移栽。

此法不受季节限制，高度集约化，单位面积出苗多，出苗快，产业化前景好，实现了工厂化大规模育苗，可以短期快速为土壤重金属修复提供大量种苗；种苗根系发育较好，种苗较茁壮，无杂草，无土传病虫害，移栽成活率较高；节约苗床，节省了人力物力。

实施例二，生长素辅助水培漂浮育苗

1)采集当年生、无病虫害的东南景天地上部枝条，剪成5-6cm的插穗，于阴凉通风处放置24小时，使其伤口愈合。

2)把放置后的插穗40支一捆捆好，使插穗下半部分在1μm生长素溶液里浸泡4小时。

3)把浸泡后的插穗按4×4cm行株距扦插在30×20×0.5cm带孔的泡沫板上，泡沫板漂浮在30×20×10cm装满清水的塑料方框里，使插穗下半部分与清水接触，上半部分与空气接触，每框40支插穗。

4)育苗期间四天换一次清水，待根系长到5cm之后(约14天)，将种苗移出水体，于阴凉通风处放置24小时后即可移栽。

由于生长素具有促进植物生根发芽、生长发育的作用，所以此法获得了比实施例一更好的育苗效果，种苗根系发育更好，种苗更茁壮，移栽成活率更高。

实施例三，植物促生菌辅助水培漂浮育苗

1)采集当年生、无病虫害的东南景天地上部枝条，剪成5-6cm的插穗，于阴凉通风处放置24小时，使其伤口愈合。

2)把放置后的插穗40支一捆捆好，使插穗下半部分在od600＝1.0的植物促生菌菌液(sasm05)里浸泡4小时。

3)把浸泡后的插穗按4×4cm行株距扦插在30×20×0.5cm带孔的泡沫板上，泡沫板漂浮在30×20×10cm装满清水的塑料方框里，使插穗下半部分与清水接触，上半部分与空气接触，每框40支插穗。

4)育苗期间四天换一次清水，待根系长到5cm之后(约14天)，将种苗移出水体，于阴凉通风处放置24小时后即可移栽。

由于植物促生菌sasm05可以分泌生长素，研究表明：sasm05菌液处理对东南景天的促生效果优于生长素处理，所以此法获得了比实施例二更好的育苗效果，种苗根系发育在三个实施例中最好，种苗最茁壮，移栽成活率最高。

以上所述仅为本发明专利的具体实施案例，但本发明专利的技术特征并不局限于此，任何相关领域的技术人员在本发明的领域内，所作的变化或修饰皆涵盖在本发明的专利范围之中。