一种促进桂牧1号杂交象草快速健康扦插生根的方法与流程

本发明涉及牧草无性繁殖技术领域，尤其涉及一种促进桂牧1号杂交象草快速健康扦插生根的方法。

背景技术：

桂牧1号杂交象草[(pennisetumamericanum×p.purpureum)×p.purpureumschum.cv.guimuno.1]是以禾本科狼尾草属杂交狼尾草(p.americanum×p.purpureum)为母本，矮象草(p.purpureumcv.mott)为父本，有性杂交选育而成，2000年经全国饲料牧草育种委员会审定登记(品种登记号211)。桂牧1号杂交象草是多年生牧草种类，茎干直立高大丛生，分蘖多，叶量大，喜温暖湿润气候，产量高，利用年限长，几乎无病虫害等特点，是我国长江流域及其以南地区主要栽培的高大禾草种类，其繁殖方式主要采用种茎切段扦插栽培法。栽培前选择冬藏后茎秆保持颜色青绿作为种用。种茎切段后进行扦插，插条的生根率和生根效果直接影响插条的成活率和再生植株的生长速度。

原花青素(proanthocyanidins，pc)，是一种由儿茶素(catechin)或表儿茶素(epicatechin)结合形成的二至五个聚合体，也称为低聚原花青素(oligomericproanthocyanidins，opc)，属多酚类物质，是比维生素c和维生素e活性更强的自由基清除剂，具有超强的抗氧化能力。

截至目前为止，并未有任何将原花青素应用于植物生根的研究报道和专利申请，也未有文献或报道提出原花青素可作为植物生根的技术启示或相关指引。

技术实现要素：
：

本发明的目的就在于提供一种促进桂牧1号杂交象草快速健康扦插生根的方法。

本发明的技术方案如下：

将安全贮藏的桂牧1号杂交象草种茎切段后，插条在一定浓度的原花青素浸泡4～6h，达到饱和含水量，然后用于扦插；插条的生根率、发芽率、不定根生根数和根长有显著提高。

具体地说，本方法包括下列步骤：

1、一种促进桂牧1号杂交象草快速健康扦插生根的方法，其特征在于：

①插条的选取和切段：选择冬季安全贮藏的桂牧1号杂交象草，每段插条保留1个茎节，茎节下部留下1/3，上部留2/3，节段切成斜面；

②插条处理：插条浸泡于200mg/l的原花青素处理液中，处理液要超过插条斜切面，4～6h达到饱和含水量后捞出滤干；

③-1，在大田自然环境条件下原花青素处理插条生根时，经过步骤①和②后，需当天扦插至种苗床，种苗床宽1.2m，深翻土，施45～75吨/ha腐熟牛粪；扦插深度以茎节插入土1cm左右为标准，扦插密度为2cm×2cm；扦插后，盖上一层猪或牛粪水，覆盖薄膜增温，根据天气情况，揭膜透风及浇水保湿；于扦插后30d随机抽选标本，统计生根率、发芽率、生根数、根长，监测200mg/l原花青素处理后，种茎生根率和每根种茎的生根数及根长等效果；

③-2，在人工控制环境条件下原花青素处理插条生根时，经过步骤①和②后，需进行插条培养；处理好的插条，每10个插条一捆，放置于呈放有1/2霍格兰氏培养液的塑料盒中，塑料盒为30cm×22cm×12cm，于人工气候箱中进行恒温培养，20℃，12h黑暗/12h光照；期间保持塑料盒内溶液量不低于插条斜面最高点；

霍格兰氏培养液配方：硝酸钙945mg/l；硝酸钾607mg/l；磷酸铵115mg/l；硫酸镁493mg/l；铁盐溶液2.5ml/l；微量元素5ml/l；ph6.0；

20d后将插条取出，统计生根率、发芽率、统计生根数、根长，监测200mg/l原花青素处理后，种茎生根率和每根种茎的生根数及根长等效果。

生根率：生根插条数/总处理插条数×100％；

发芽率：发芽插条数/总处理插条数×100％；

生根数：插条平均生根数，个/株；

根长：插条根的平均长度，mm。

工作机理：

原花青素具有极强的抗氧化活性，是极有效的自由基清除剂之一，低浓度的原花青素易溶于水，在植株体内可有效地清除超氧阴离子自由基和羟基自由基等，也可中断自由基链式反应；并参与保护脂质不发生过氧化损伤。本发明使用一定浓度的原花青素可有效地促进桂牧1号快速萌发不定根，促进新生苗得生长，从而达到提高桂牧1号扦插成活率的目的。

本发明具有以下优点和积极效果：

①促进杂交象草桂牧1号插条扦插后快速生根，不定根多且可明显促进新生毛细根；

②极大地提高了插条的生根率，促进插条健康生长，插条根系繁殖速度增快，根量大，提高移栽成活率；

③方法简单，便宜，成本低，易操作，且适用于狼尾草系列无性繁殖牧草的插条，具有较高的经济效益。

附图说明：

图1为桂牧1号杂交象草插条的图片；

图2为室内恒温培养20d后桂牧1号杂交象草插条生根情况的图片；

图3为大田环境培养30d后桂牧1号杂交象草插条生根情况的图片。

图2、3中：

ck为未浸泡直接生根的对照组；

原花青素处理浓度从左至右，依次为：0mg/l、50mg/l、100mg/l、150mg/l、200mg/l。

具体实施方式：

下面结合附图和实施例详细说明：

原花青素：分子式c30h26o13，分子量594.52，uv98％，浓度为50～200mg/l。

一、实施例1

人工控制环境条件下原花青素处理促进桂牧1号杂交象草插条生根生长的试验，主要步骤如下：

1)插条的选取和切段：于2017年2月25日(晴天)选用冬贮保持绿色的桂牧1号杂交象草种茎为试验材料，每段插条保留1个茎节，茎节下部留下1/3，上部留2/3，节段切成斜面(图1)；

2)插条处理：插条浸泡于5个浓度梯度(0，50，100，150，200mg/l)的原花青素处理液中，处理液要超过插条斜切面，4h后达到饱和含水量，捞出滤干；ck为未浸泡直接生根的对照；每处理100株插条；

3)插条培养：处理好的插条，每10个插条一捆，放置于呈放有1/2霍格兰氏培养液的塑料盒(30cm×22cm×12cm)中，于人工气候箱中进行恒温培养(20℃，12h黑暗/12h光照)；期间保持塑料盒内溶液量不低于插条斜面最高点；

霍格兰氏培养液配方：硝酸钙945mg/l；硝酸钾607mg/l；磷酸铵115mg/l；硫酸镁493mg/l；铁盐溶液2.5ml/l；微量元素5ml/l；ph＝6.0；

4)20d后将插条取出，统计生根率和发芽率；每处理随机抽选10份已生根样本，用清水洗净后，统计生根数(插条平均生根数，个/株)；根长等。结果表明，室内恒温培养20d后，随着原花青素浓度的升高，种茎的生根率、发芽率、生根数随之升高，根长随之增长，且当原花青素浓度高达200mg/l时，长出大量侧根，种茎生根率和每根种茎的生根数及根长与对照组都有显著差异(表1、图2)。

表1-恒温培养20d后桂牧1号杂交象草插条生根情况

注：同列不同字母表示处理间在0.05水平有显著差异。

二、实施例2

大田自然环境条件下验证原花青素处理桂牧1号杂交象草种茎生根的试验，操作步骤如下：

1)插条的选取和切段：于2017年2月25日(晴天)于湖南省畜牧兽医研究所草业基地进行，选用冬贮保持绿色的桂牧1号杂交象草种茎为试验材料，每段插条保留1个茎节，茎节下部留下1/3，上部留2/3，节段切成斜面(图1)；

2)插条处理：插条浸泡于5个浓度梯度(0，50，100，150，200mg/l)的原花青素处理液中，处理液要超过插条斜切面，4h后达到饱和含水量，捞出滤干；ck为未浸泡直接生根的对照；每处理100株插条。

3)当天扦插至种苗床，种苗床宽1.2m，深翻土，施45～75吨/ha腐熟牛粪。扦插深度以茎节插入土1cm左右为标准，扦插密度为2cm×2cm，每处理100株插条。

4)扦插后，盖上一层猪牛粪水，覆盖薄膜增温，根据天气情况，揭膜透风及浇水保湿。

5)分别于扦插后30d每处理随机抽选20份标本，统计生根率和发芽率；每处理随机抽选10份已生根样本，用清水洗净后，统计生根数(插条平均生根数，个/株)；根长等。结果表明，室内恒温培养20d后，随着原花青素浓度的升高，种茎的生根率、发芽率、生根数随之增高，根长随之增长，且当原花青素浓度高达200mg/l时，长出大量侧根，种茎生根率和每根种茎的生根数及根长与对照组都有显著差异(表2，图3)。

表2大田环境培养30d后桂牧1号杂交象草插条生根情况

注：同列不同字母表示处理间在0.05水平有显著差异。